马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析

根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列，设计并合成一对特异性引物，经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）成功扩增出了我国马流感病毒（A/equine/Qinghai/1/94核蛋白基因。将该片段连接到PGEM-T-EASY载体并转化DH5α，提取阳性菌落的质粒径EcRo1酶切的PCR鉴定其大小为1.5kb左右，对其测序并进行分析发现，与A/Equine/Kentucky/2/86,A/Equine/Miami/1/63等关系较近，同源率为93.3%--93.4%，而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/1/89株关系较远，同源率仅为84.6%。     

母猪产后不食的防治策略探究

母猪产后不食是一种较为常见的疾病,同时危害性大,不容易治疗,轻微产后不食容易导致母猪泌乳能力下降,仔猪得不到充足的营养,而导致体质下降,生长缓慢,腹泻甚至死亡;重度产后不食还会导致母猪乏情、久配不育或者产仔减少。这些都会严重挫伤农户饲养的热情,影响养猪业的正常发展。文章基于此,对母猪产后不食的防治措施进行探究性分析。     

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较

将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13代、18代、21代、23代、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒株LTR的U3负调节区出现大段的插入、点突变、缺失,U3增强子区变异较小。将LTR片段插入到pCAT-basic载体CAT报告基因前,转染驴胎皮肤细胞,通过检测CAT表达量来评价LTR的启动子活性。驴胎皮肤细胞毒株LTR的启动子活性随着病毒传代次数的增加而逐渐增强,而驴白细胞弱毒株LTR的启动子活性很低。     

山羊关节炎-脑炎病毒3＇LTR的克隆与序列分析

本实验通过对CAEV3’LTR克隆、测序及序列分析，对CAEV3’LTR的变异性与生物学功能有了一定的认识，为进一步揭示LTR与病毒的毒力及复制密切相关奠定了基础。     

中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒（EAV）感染马血清流行病学调查

马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一.本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品.其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%.鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播.     

貉球虫和大肠杆菌混合感染的诊治

1 发病经过 我县陆某饲养貉120只,发现部分貉精神沉郁、食欲减少、拉稀.病程1周左右有2只貉死亡,发病期间用环丙沙星、恩诺沙星等药物治疗,效果不理想.     

一种快速的酸奶质量跟踪监测检验新方法

分析酸奶中的菌种组成是酸奶质量控制的重要指标。本文用PCR—DGGE（denaturing gradient gel electrophotesis，变性梯度凝胶电泳）指纹图谱技术对市售某品牌酸奶在1个月内进行了动态监测。共收集了6个生产批次的18个酸奶样品，通过建立16S rDNA V3区PCR—DGGE分析、DGGE图谱条带割胶回收测序等一套完整的检测评价方法．结合常规分离培养方法．对样品微生物组成及其稳定性进行跟踪监测。结果显示。所有供试样品在整个动态监测期内DGGE指纹图谱都出现2条带．显示。其微生物组成比较稳定．割胶回收测序结果表明其微生物组成与厂家标注完全一致．分别为Lactobacillus delbrueckii subsp．balgaricus（保加利亚乳杆菌）和Streptococcus thermophilus（嗜热链球菌）。分离计数结果表明前者比后者低3个数量级．二者的DGGE条带亮度也有显著差别。本研究用菌种组成及其稳定性两个指标对酸奶样品质量进行评价，建立了DGGE评价方法，结果表明。该技术可以作为酸奶质量控制和动态监测的快速简便的新方法。     

多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒

为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED)，建立了同时检测这2种疾病痛原体的多重PCR方法。参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列，经DNAsis 2．0比较分析。分别筛选出TGEV、PEDVS基因相对保守区。以TGEV TH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDV CV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板，利用软件Primer3设计合成了2对寡核苷酸引物，以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板。利用所设计的2对引物进行多重RT-PCR扩增，结果同时得到与试验设计相符的499bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带。而对其他3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明。建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEV RNA和100pg PEDV RNA。     

一例猪水肿、附红体、弓形虫混合感染的防制

1发病情况2005年3月10日，鹿泉市铜冶镇某养殖户饲养了20千克左右的猪50头，有2头发病，表现眼睑肿胀，后肢站立不稳，拱背，由村兽医按水肿治疗无效，死亡，接着又出现3头同样症状的猪．于是养殖户于3月13日下午来我站就诊。     

SPF仔猪肠道菌群结构的分子分析

目的：对SPF（Specific Pathogen Free）仔猪断奶前后的肠道菌群组成进行动态监测,并以普通饲养仔猪（自然分娩）为对照作相关分子微生物生态学分析.方法：利用剖腹取胎的方式将仔猪从母体子宫中取出放于屏障系统中饲养,于7日龄时转移至消毒的开放式环境中,14日龄断奶,分别于10日龄、16日龄和22日龄以及32日龄采集仔猪新鲜粪便样品.提取粪便样品中细菌总DNA,获得其ERIC-PCR指纹图谱,再将其中一个样品的ERIC-PCR产物以地高辛标记为混合探针通过杂交对指纹图谱上DNA条带序列的异同进一步比较.结果：SPF仔猪和普通仔猪在断奶后肠道菌群的组成发生较大变化,而且SPF仔猪的肠道菌群和普通仔猪有显著差异.