番鸭细小病毒病病原的血清学检测与PCR鉴定

为了解安徽省番鸭细小病毒病的流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该省内部分番鸭群进行鹅细小病毒的血清抗体检测,同时对疑似病鸭进行了病原的PCR检测。结果发现,在被检测的44份血清样本中鹅细小病毒血清抗体阳性率高达34.1%;PCR检测结果显示,所检测的样品中,有2份为鹅细小病毒阳性,1份为番鸭细小病毒阳性,且3份被检样品均来自雏番鸭。该研究结果表明,该省番鸭群中存在鹅细小病毒和番鸭细小病毒感染,应采取有效的预防控制措施。     

猪流感研究进展

一、病原 猪流感病原为SIV,病毒呈多形态,一般球形,直径80～120 nm.有囊膜,囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白,即纤突和刺突,分别是柱状的血凝素(HA或H)、蘑菇状的神经氨酸酶(NA或N)和膜上的M2基脂蛋白.     

鸡粪便中氧氟沙星的降解动态研究

氧氟沙星（Ofloxacin,OFL）是畜禽养殖业中最常使用的抗菌药物之一,其在粪便中的残留会对微生态环境产生不利影响。本试验对3种条件下鸡粪便中氧氟沙星的降解进行了研究,结果显示,室温避光条件下,鸡粪便中氧氟沙星几乎不降解,发酵条件下OFL的降解很慢,自然光照时OFL的降解较快。 OFL降解的变化趋势符合一级动力学方程Ct=C0e-kt,根据此方程求得光照条件下的OFL降解半衰期为(5.77±0.466) d, 发酵条件下的OFL降解半衰期为(35.66±1.99) d。     

GPV·MDPV和FAdV-4三重PCR检测方法的建立

[目的]为快速地鉴别鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)和禽腺病毒血清4型(FAdV-4)3种病毒,建立一种特异强、敏感高、重复性好的三重PCR检测方法.[方法]根据Genbank登录的MDPV、GPV和FAdV-4的基因序列,设计3对特异性引物,以提取的核酸为模板,进行PCR特异性、敏感性和重复性试验.[结果]采用所建立的方法能够扩增出GPV、MDPV和FAdV-4特异性片段,且不能检出鸭黄病毒(DFV)、鸭I型肝炎病毒(DVH-Ⅰ)和禽呼肠孤病毒(ARV);GPV、MDPV和FAdV-4核酸模板的最低检测量分别为20、2、2 pg;对8份阳性临床病料进行检测,可见MDPV、GPV和FAdV-4的检出率均为100％.[结论]建立的三重PCR检测方法能够对MDPV、GPV和FAdV-4这3种病毒进行快速、准确的诊断.     

鸡传染性法氏囊病病毒分离鉴定及具VP2基因高变区序列分析

利用SPF鸡胚培养法,自安徽两个不同鸡场分离到2株传染性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为AH01和AH002.为了解其致病特性,进行了鸡胚半数致死量(ELD50)测定、动物回归实验、VP2基因片段的扩增与分析.结果显示,AH01和AH02第一代尿囊膜悬液病毒的ELD50值分别为104.7/0.2 mL和105.3/0.2 mL,人工感染致死率分别为60％和73.3％;两分离株间的核苷酸同源性为97.8％,与国内外参考超强毒株的核苷酸同源性为96.0％～97.2％和96.7％～98.6％,提示其VP2高变区序列符合IBDV超强毒株特征.     

兽药单克隆抗体研究进展

兽药大多属于小分子物质(半抗原),没有免疫原性,必须与载体交联成人工合成抗原(完全抗原)才能获得免疫原性,用人工合成的抗原来免疫动物制备兽药单克隆抗体。对兽药单克隆抗体的研究是随着兽药残留检测技术发展而开始的,人们已经在制备兽药单克隆抗体所需技术如兽药人工抗原合成的方法、选择合成兽药人工抗原的所需载体、对兽药结构的改造、免疫动物的注射方式、免疫程序、杂交瘤细胞的筛选及培养等方面进行一些研究,并成功地制备出十几种兽药单克隆抗体,且大多已应用于兽药免疫测定法(IAs)。目前仅有一种兽药单克隆抗体已应用于兽药免疫亲和色谱(IAC)。     

氟喹诺酮类药物的多残留酶免疫分析研究

以制备的多抗血清为基础，建立了氧氟沙星（OFL）、二氟沙星（DIF）和诺氟沙星（NOR）的多残留间接竞争酶免疫吸附测定法(Ci ELISA法)。OFL、 DIF和NOR的标准曲线的线性回归方程分别为y=-0.1984x+0.9687 (r=0.9885)、y=-0.1738x+0.9150 (r=0.9985)、y=-0.2004x+0.9572(r=0.9954)；中值（IC50）分别为231.57、245.32 、186.14 ng/ml ；最低检测限（LOD）分别为1.62、1.86、1.07 ng/ml；标准曲线在2~10000 ng/ml之间均有良好的线性关系(r≥0.9885)。方法的批内CV≤5.44%,批间CV≤12.45%。当OFL、DIF或NOR以浓度15~10000 ng/ml在牛奶中添加时，药物能较好地被回收，回收率均在71.70%~94.53%之间。     

放养条件下宣城麻黄鸡的胴体、肉品质特性及血清生化指标的研究

通过测定20只宣城麻黄鸡的胴体性状、肌肉品质和血清生化指标,研究在放养条件下饲养的宣城麻黄鸡生长状况,试验结果表明:宣城麻黄鸡154日龄的平均体重为1.3505kg,屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率、肝重率、心重率、腺肌胃率分别为90.86%、81.46%、67.33%、18.40%、23.14%、5.13%、2.70%、0.75%、3.52%;宣城麻黄鸡宰后24 h肌肉pH值为5.83,肉色L值为49.11、a值为1.36、b值为9.78,蒸煮损失、水分含量、硬度、弹性、粘聚性、黏性、咀嚼性、肌纤维直径、肌内脂肪含量、肌苷酸、羟脯氨酸和胸肌MDA含量分别为:20.10%、68.98%、1714.72 g、0.76 g、0.70 g、1 202.19 g、913.46 g、48.09μm、2.57%2、.3223 mg/g、415.3692μg/g和0.1788 nmol/mg;血清中SOD、XOD、AKP、ALT/GPT、AST/GOT、BUN的活性和MDA含量分别为138.8953 U/ml、2.9155 U/L、31.4216king/100 mL、0.5449 U/mL、0.4299...     

乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白C端片段的克隆及原核表达

[目的]为进一步研制检测乙脑抗体试剂盒奠定了基础。[方法]以本实验室已构建的重组质粒pET-E(E为乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白)为模板,利用PCR扩增乙型脑炎病毒E蛋白基因3′端部分片段,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析表达产物。[结果]所表达的融合蛋白分子量约为38KD,表达产物以水溶形式存在,37℃,诱导4 h的诱导培养条件最佳,表达量约占茵体总蛋白的20?。表达产物经Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。ELISA检测表明,表达的蛋白能与猪乙脑病毒抗体血清发生特异性反应,具有很好的抗原性。[结论]基因工程表达的JEV E蛋白有望成为重要的实验室诊断抗原。     

随机引物PCR技术及其在动物医学中应用的研究进展

随机引物PCR技术(AP-PCR)是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术,其特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段,在无需预知研究对象的情况下对其进行基因特征的分析,具有简便、高效、实用等优点,现已广泛应用于分子生物学的多个领域。文章主要对AP-PCR技术的原理、优缺点、研究近况及其在动物医学中的应用等作一综述。