软枣猕猴桃RAPD分子标记反应体系的优化

以长白山地区及韩国等9个采样点采集的软枣猕猴桃新鲜幼叶为试材,进行RAPD分子标记反应扩增体系的优化。对实验结果影响较大的5个因素(模板DNA浓度,引物浓度, MgCl_2浓度, dNTP浓度, Taq DNA聚合酶浓度)进行单因素设计,以寻找最佳反应浓度。结果表明,总反应体积为20μL时,模板DNA 40 ng、引物浓度0.3μmol/L、MgCl_2浓度2.0 mmol/L、dNTP浓度250μmol/L、Taq DNA聚合酶2.0 U。此时扩增条带多、电泳结果清晰稳定,表明该体系是一个适合软枣猕猴桃RAPD分子标记反应的体系。该体系的建立有利于软枣猕猴桃的亲缘关系和遗传多样性分析。     

以新型城镇化建设为导向的园林专业实践教学体系构建——以延边大学为例

园林专业具有较强的实践性,加强人才培养过程中的实践教学环节、构建科学合理的实践教学体系是园林专业技术人才成长的必经之路。尤其是地方民族院校,强化专业技能培养对提高园林专业学生就业率具有重要意义,符合新型城镇化建设对园林专业人才的实际需求。本文以延边大学园林专业为例,重点分析了延边地区新型城镇化建设中社会经济发展对园林专业不同岗位从业人员的技能要求,指出现有实践教学体系存在的常见问题,并提出从实践教学目标体系、条件体系、课程体系、评价体系、管理体系等五个方面构建实践教学体系的基本思路。     

桃花粉可育基因连锁的RAPD 标记与SCAR标记的转化

 桃品种以重阳红(花粉不育) ×大久保(花粉可育) 的52株F₁代群体为试材, 应用RAPD技术, 结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis, BSA) 构建花粉可育/不育基因池, 利用180个随机引物, 筛选在花粉可育基因池中稳定扩增的一个RAPD标记OPW03-900。经过重复性验证和群体单株验证, 该标记仅在花粉可育个体(重组型除去) 中出现, 与桃花粉可育/不育位点的连锁距离为5.80cM。将该特异性片段回收、克隆、测序, 并设计一对特异SCAR引物, 再对F1代个体进行PCR扩增, 发现该特异带的位点及重组型个体的数目与RAPD扩增结果一致, 片段大小为906 bp, 命名为SCW03-906,表明RAPD标记已成功转化为与桃花粉可育基因连锁的SCAR标记。该序列已被GenBank收录, 登录号为DQ659676。     

桃AFLP技术反应体系的优化

以"珲春桃"与"正满早生"杂交获得的32株F_1代群体为材料,对影响桃AFLP技术分析体系的因素作了详细的探讨,优化出一套稳定、可靠的桃AFLP反应体系。经优化,得出最适宜的结果:酶切时间为6h、Mg- Cl_2浓度为1.75 mmol/L、预扩增产物稀释倍数为10倍。利用优化后的桃AFLP分析体系对该技术的重复性进行了验证,重复率可达90%。     

桃品种种质资源的RAPD分析

用筛选的20个随机引物对42个桃品种(种)进行RAPD扩增,用扩增产生的107条多态性带计算样品间的遗传距离,UPGMA法聚类分析,在遗传距离0.14处可将供试样品划分为四类,认为RAPD标记可用于分析桃种质资源间亲缘关系.在遗传距离0.11处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃明显区分开,但存在一定交叉现象,若以肉质类型划分桃品种,还应考虑桃品种的遗传背景.供试样品中珲春桃是优先保存的种质,其次是Fireprince、上海水蜜桃等.根据聚类分析结果和遗传距离,认为珲春桃不是桃和山桃的杂交后代,应为桃的一个变种.     

桃属植物RAPD反应体系的优化

以‘Yuuzora’、珲春桃、有明及其F1杂种群体为试材,对桃属植物的RAPD反应体系进行优化,结果表明:25μL总反应体积中含模板DNA10~200ng,引物20pmol,dNTP150μmol/L,MgCl21.5mmol/L,国产TaqDNA聚合酶1unit,10×反应缓冲液2.5μL,其余用重蒸馏水补充.热循环条件为:预变性94℃,5min,变性94℃,1min,退火36℃,1min,延伸72℃,2min,共50个循环;72℃最终延伸5min.应用优化后的反应体系获得的RAPD指纹图谱带型清晰、重复性好.     

应用RAPD标记对桃品种间亲缘关系的分析

以普通桃的36个品种为试材，应用RAPD标记进行品种间亲缘关系的分析，探讨应用RAPD标记划分桃品种的可行性，试验结果表明，利用筛选的20个引物在36个桃品种中共扩增出111条带，其中多态性带86条，占标记总数的77．5％，可用于样品间亲缘关系的分析．利用这些多态性带构建二元数据矩阵，计算样本间的遗传距离，并用UPGMA法对36个样品进行聚类分析，以遗传距离0．14为接合线，将供试类型分为五类．若进一步在遗传距离0．13处划分，可明显将水蜜桃、黄肉桃、油桃区分开，认为RAPD标记可用于桃品种分类，以肉质类型划分桃品种是可行的。     

优化《园艺植物研究法》教学的措施

《园艺植物研究法》是一门园艺专业本科生必修的核心课程。该课程具有内容纷繁庞杂的特点,因此,要想讲好本课程必须从教学计划的制定、教学方法的多样化、现代化教学手段和设备的选用、调动学生的学习热情、考核方式等方面进行优化。     

长白山区卫矛科种质资源及鉴别方法

我国有着丰富的卫矛科(Celastraceae)植物资源，可达14属192种。主要分布在长江流域以南各省区。而长白山区野生卫矛科植物是分布在我国的最北线的种质资源，是培育抗寒抗旱卫矛科新品种的珍贵的植物遗传资源，约有3属10种。本研究为了避免发生种质资源的混淆，在查阅大量文献的基础上，结合实际调查情况详细描述了各个种质资源的形态特征、生境、分布、繁殖方法，同时介绍了易混淆树种及鉴别方法。为今后我国北线卫矛科植物的保护、繁育、评价等科研工作提供理论依据。