猪新基因CFL2真核表达载体的构建及在C2C12细胞中的瞬时表达

从猪的股二头肌中提取总RNA,利用RT-PCR技术从猪骨骼肌中获得CFL2基因的编码区序列,T-A克隆至PMD-18T载体,经HindⅢ和XhoⅠ酶切后定向克隆至真核表达载体pCDNA3.1(+)中。获得的重组质粒pCDNA3.1(+)/CFL2用限制性内切酶酶切分析和DNA测序分析鉴定,并经脂质体瞬时转染C2C12细胞,最后利用PCR检测转基因细胞中CFL2基因的存在及其表达情况。结果显示:猪CFL2基因已克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)中,转染的C2C12细胞中检测到细胞内较高量CFL2的表达。pCDNA3.1(+)/CFL2真核表达载体的成功构建,为深入研究CFL2基因在猪肌肉细胞中的功能奠定基础,为猪肉质品质的改良提供了新的思路。     

用VB6．0制作进制转换器

用Visual Basic 6．0编写进制转换器。此程序最后形成．EXE件，可脱离VB环境在Windows环境下直接执行。     

基于全属性的水资源合理配置原则

水资源配置应始终遵循有效性、公平性和可持续性的指导思想，在实际配置操作过程中怎样坚持、怎样体现以及怎样量化配置原则，目前所开展的研究尚不多见。从3条原则的基本理论出发，探讨水资源的合理配置问题并衍生出各个原则的数学函数表达方法，通过适当处理来衡量各原则，为基于全属性的水资源配置实践提供有效的参考。     

NO3-+PO43-、Pd基体改进剂石墨炉原子吸收测定玉米中铅含量效果比较

分别采用NO3-+PO43-、Pd作为石墨炉原子化器测定玉米样品中铅的基体改进剂。结果表明,测定玉米样品中的铅时,以Pd作为基体改进剂改进效果显著,能有效地提高的灰化温度和原子化温度,在最佳用量25mg/kg的条件下,最佳灰化温度为500℃,最佳原子化温度为2200℃,回收率达80%,改进效果理想;而NO3-+PO43-不适宜基体改进剂。     

Solairs 8下Apache ilas web的配置、优化及安全性

较详细说明了如何在Sun工作站上，Solairs 8系统下，利用流行的Apache软件来配置优化ilas web及对应的安全性考虑，用来提供稳定、安全的校内ilas web服务。     

“土地整治”课程群建设路径研究

引入课程群概念,以华中农业大学土地整治课程群为例,阐述该课程群的科学内涵和融合过程,从教学内容整合、专业软件教学、教学方式改革等方面分析土地整治课程群的建设路径。针对现有研究量化分析的不足,通过网络平台开展课程群建设成效调查,运用有序Logistics模型分析影响建设成效的显著因素。计量结果显示,课程群与后续课程联系、专业软件操作能力、与行业发展结合程度会显著影响学生求职就业和职业发展。     

东北荷包猪FUT1基因多态性及其与产仔性能的关联分析

[目的]分析荷包猪Fun基因多态性及其与产仔性能的关系,为荷包猪资源保存、品种选育和开发利用提供参考依据。[方法]提取猪耳组织DNA,采用PCR-RFLP技术分析荷包猪FE们的基因多态性,并分析其基因型与产仔数的相关关系。[结果]用胁丽I限制性内切酶对扩增片段进行酶切,检测到GG、AG和AA3种基因型。抗性纯合子AA型个体1～5各胎次产仔数均值均高于AG和GG型个体,且第3胎和第4胎的产仔数均值显著高于AG型和GG型个体。[结论]荷包猪Fun基因具有多态性,其基因频率与国外杜洛克基本一致,与国外长白、大白和两者杂交猪差别较大。AA基因型对产仔性能而言是有益基因型。     

假苍耳的化学防除

采用混配方法系统研究了假苍耳的化学防除。结果表明,草甘膦对假苍耳有较好的防除作用,加入助剂能够提高草甘膦对假苍耳的防效,生助黑助(NH4)2SO45g(NH4)2SO41g对照,生助增效最大,最大株防效为98.03%～99.28%,最佳防除时期为4～6叶期;氟磺胺草醚对假苍耳有较好的防除作用,加入助剂能够提高氟磺胺草醚对假苍耳的防效,(NH4)2SO45g(NH4)2SO41g生助黑助对照,其中(NH4)2SO45g增效最大,最大株防效为95.15%～97.19%,最佳防除时期为4～6叶期。     

昆虫死亡素thanatin与斑点叉尾鮰β-防御素在毕赤酵母中的表达及其抑菌效果评价

旨在利用毕赤酵母表达系统表达出具有良好抑菌效果的重组抗菌肽。选定昆虫死亡素thanatin基因和斑点叉尾鮰β-防御素基因(命名为defbl),按毕赤酵母偏好性密码子优化后,将用T2A剪切肽连接的共表达基因(命名为TD)及各单基因分别构建至pMD19-T载体上,经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切后亚克隆至表达载体pPICZɑA上,经SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母GS115感受态细胞中,通过Zeocin抗性及PCR筛选出阳性菌株,利用1%甲醇进行诱导表达,72 h后收集培养基上清液,冻干浓缩并纯化后,进行Western blot检测及体外抑菌试验、溶血性试验。结果显示,成功构建重组毕赤酵母工程菌株GS115-pPICZαA-thanatin、GS115-pPICZαA-defbl和GS115-pPICZαA-TD,通过甲醇诱导成功获得重组蛋白,纯化后Western blot检测结果显示,thanatin组和defbl组分别在2.3 kDa和7.8 kDa处出现特异性条带,TD组同时出现上述2条带,蛋白大小均与预期相符;3个重组蛋白浓度分别为600、300和700μg/mL;体外抑菌试验及溶血性...     

猪附红细胞体特异性基因的克隆和PCR诊断方法的建立

根据2003年Hoelzle发表的猪附红细胞体的基因组序列（AJ504999）设计一对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物克隆到pMD18-T载体后测序,结果表明扩增出的片段为603bp,同源性分析表明该序列与参考基因组序列同源性为100％,反映出我国分离株与国外株其基因无差异,特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法与常见的支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测到猪附红细胞体血液基因组DNA最低量为0．65ng／mL,该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪附红细胞体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。