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禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定 总被引:4,自引:1,他引:4
参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物,经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段,再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中,转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明,融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应,而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。 相似文献
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microRNAs(miRNAs)是长度为18~25 nt的非蛋白质编码小RNA分子,可以通过抑制有关基因mRNA的翻译从而调控机体的生长发育、疾病发生等过程。在很多病毒中发现有miRNA的存在,这些miRNA可能在病毒基因的表达以及与宿主的相互作用中发挥作用。利用vMir软件预测家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组可能编码的miRNA前体序列,对BmNPV基因组扫描分析后,得到7条能形成发夹结构的可能是miRNA的候选前体序列。以BmNPV添食感染5龄起蚕,72 h后取幼虫血淋巴提取总RNA,对这7条序列进行反转录PCR验证,其中扩增出的5条序列在BmNPV基因组中有相同的序列,推测这5条序列为BmNPV基因组编码的miRNA前体序列。进一步分析5条miRNA前体序列的发夹结构,并用反转录PCR的方法验证其成熟体序列,结果在5条miRNA前体序列共扩增出6条在BmNPV基因组中有相同序列的成熟体序列,它们分别位于不同的ORF之间,是BmNPV基因组编码的miRNA。利用在线靶基因预测程序RNAhybrid和RNA22预测到6条miRNA在BmNPV中的13个可能的靶基因,其中有6个靶基因是病毒的结构蛋白基因,2个为晚期表达因子基因,5个为未知功能基因。推测这些BmNPV基因组编码的miRNA可能与病毒感染宿主有关。 相似文献
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近年来,随着农业产业结构的不断调整,我国肉鸡生产发展极为迅速,从过去几百只散养式的农户模式发展到目前存栏量几万甚至几十万只的规模化鸡场,尤其是近两年在国家有关政策的引导下,标准化肉鸡场更是遍地开花。但是各种疫病的爆发让人头疼不已,不但令新养殖户束手 相似文献
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采集ICR小鼠骨髓单核细胞在体外培养过程中加入25.0 μg/L M-CSF+50.0 μg/L RANKL诱导形成破骨细胞,同时选择RAW264.7细胞培养过程中添加100.0 μg/L RANKL诱导分化为破骨细胞.通过检测抗酒石酸碱性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性数及骨吸收陷窝,比较小鼠骨髓单核细胞和RAW264.7细胞株诱导形成的破骨细胞活性.结果显示,小鼠骨髓诱导的细胞TRAP阳性数显著低于RAW264.7细胞株(P<0.05),而小鼠骨髓诱导的破骨细胞所形成骨吸收陷窝的面积显著大于RAW264.7细胞株(P<0.05).结果表明,2种方法均可诱导形成具有典型特征的破骨细胞,骨髓单核细胞诱导形成的破骨细胞活性更强,但破骨细胞的数量和纯度明显低于RAW264.7细胞株. 相似文献
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藏香猪是藏区的古老猪种,因皮薄肉香而得名,是世界上少有的高原型猪种。藏香猪肉质好、耐粗饲、抗病力强,可以在高寒缺氧地区饲养,经过过渡饲养和适应性培育后,也可以在平原地区饲养,既可以放牧,又可以圈养。迪庆藏香猪属青藏高原品系, 相似文献
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