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[目的]克隆猪生长激素启动子,确定其启动子核心序列和主要的顺式作用元件。[方法]根据NCBI上公布的序列设计引物,PCR扩增了猪生长激素5’端-1821~+61bp的序列,并通过移步缺失的方法,获得9段长短不一的启动子序列,将其分别构建到双荧光素酶表达载体pGL3-basic上。通过重组质粒瞬时转染大鼠垂体瘤细胞(GH3)、猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)和猪肾细胞(PK15)和转染后细胞荧光素酶活性的测定,检测这些5’末端缺失质粒在垂体及非垂体细胞中的相对转录活性。[结果]成功扩增了猪GH基因5’上游启动区1882bp的片段并构建了9个pGL3-mGHpromoter报告基因载体;双荧光素酶报告基因检测系统证实插入报告基因载体中的启动子具有非常强的细胞特异性。[结论]猪生长激素特异性在垂体细胞中表达,其最小启动子位于-110bp以内,启动子区-218~-110bp和-429~-218bp间存在正向调控元件。 相似文献
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利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330–Inhba–sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率。结果表明:转染pX330–Inbha–sgRNA载体后,Inhba基因的编辑区域的PCR产物能被T7E1酶切割预期条带;T载体克隆测序显示,随机选取的20个单克隆中有5个克隆在预期切割位点附近出现不同长度的碱基缺失,估测编辑效率为25%。可见,本研究设计的sgRNA能够有效利用CRISPR/Cas9系统对Inhba基因进行编辑。 相似文献
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玉米的缺素表现与识别 总被引:1,自引:0,他引:1
在玉米的整个生育期中,经常由于缺乏某一种营养元素,造成玉米的生长发育不良,影响其品质和产量。1缺氧玉米苗期缺氮生长缓慢,矮瘦,叶色黄绿,抽雄迟。生长盛期缺氮,老叶从叶尖沿着中脉向叶片基部枯黄,枯黄部分呈“V”型。叶缘仍保持绿色而略卷曲,最后呈焦灼状而死亡。防治措施:中等肥力的玉米田一般施165~195kg/hm2纯氮。在夏玉米上主要分3次施用:第1次在苗期进行追施,施用量占玉米施用氮肥总量的20%;第2次在大喇叭口期限追施,施用量70%;第3次在抽雄开花期追施,占施用氮肥总量的10%。2缺磷缺磷的主要症状是根系发育差,苗期生长缓慢,五叶期… 相似文献
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本试验旨在研究日粮中不同粗纤维水平对育肥后期苏山猪生长性能和胴体性能的影响。选用45头60kg左右苏山猪,随机分成A、B、C组,每组15头,分别采用8.35%,9.10%,11.39%粗纤维水平日粮进行饲喂。试验结束后,每组随机选取5头猪屠宰。结果表明:(1)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪生长速度。B组平均日增重高于A组、C组,B组与A组间差异显著(P0.05)。(2)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪血液生化指标。B组尿素氮、总胆固醇、高密度脂蛋白显著高于C组(P0.05);C组尿素氮显著高于A组(P0.05)。(3)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪屠宰性能。粗纤维水平升高,脂率呈下降趋势;B组、C组肉脂比均显著高于A组(P0.05);B组小肠重量显著低于A组、C组(P0.05);C组的大肠重量显著高于A组、B组(P0.05)。心脏重量A组最高,B组最低,组间差异显著(P0.05);A组肺重量显著高于B组(P0.05)。本试验结果提示,适量提高日粮中粗纤维水平可提高苏山猪生长速度,降低育肥后期苏山猪的脂率,提高肉脂比;同时可影响育肥后期苏山猪小肠、大肠、心脏和肺的发育。 相似文献
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花生藤粉是花生收获后形成的一种农副产品,含有丰富的粗蛋白质、粗脂肪、碳水化合物、粗纤维等营养物质。花生藤粉不仅营养丰富,而且质地松软,可以作为一种优质的畜禽饲料原料。花生藤粉主要用于牛、兔、羊、鹅等草食动物生产中,通过合理的调制、微生物发酵等,可以提高饲料利用率,有利于草食动物生长发育和肌肉品质的改善。近年来生产中发现,花生藤粉也可作为一种粗纤维饲料应用于养猪生产中,但添加比例和应用范围尚不明确,需要进行深入研究。 相似文献
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