奶牛性别鉴定的研究与应用

选取牛雄性性别决定基因SRY (sex region of Y chromosome),根据基因序列设计特异引物,应用PCR技术对5头荷斯坦奶牛DNA样品进行扩增,鉴定其性别;并对设计的引物灵敏度进行检测;对已有的公、母各20头荷斯坦奶牛DNA样品进行PCR盲检,获取奶牛高灵敏度特异性引物,用于奶牛性别鉴定。结果表明,4头公牛DNA样品可以扩增出目标条带(66 bp),1头母牛DNA样品无法扩增出条带,阴性对照扩增无条带;最佳引物灵敏度为1.6 pg/μL,可以很好地满足性别鉴定需要。40头个体中,20头个体DNA样品可以扩增出条带,其余20头个体DNA样品无法扩增出条带,检测结果与实际性别对比准确率为100%。试验结果表明,设计的引物灵敏度比较好,能够满足奶牛性别鉴定的需要。     

山羊卵巢组织繁殖力相关差异表达基因片段的生物信息学分析

为考察山羊多羔性的遗传基础,以不同繁殖力的河北中部本地固有山羊为研究对象,在发情期卵巢组织用差异表达PCR方法筛查到4条基因差异片段作为山羊繁殖力性状候选基因。对这些候选基因进行同源性和转录因子结合位点分析,发现4个差异片段中2条为新发现的表达片段。1条与野猪中获得的克隆片段THY010003E05的同源性为81%,但功能未知。另1条差异片段的序列与牛pcnp的mRNA序列的同源性为94%,并据此对山羊pcnp基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学的相关软件和方法,对山羊PC-NP蛋白的理化性质、二级结构、信号肽、核定位序列、磷酸化位点、跨膜区域以及蛋白质功能域等进行预测。结果,山羊pcnp基因完整CDS序列与牛的pcnp基因完整CDS序列同源性为100%,编码区为537bp,编码179个氨基酸;推测与其他已报道的物种一样,山羊PCNP蛋白也是主要位于细胞核中的亲水蛋白,二级结构以无规则卷曲和α螺旋为主,局部为延伸链和β转角;预测出与PCNP蛋白相互作用的5种蛋白,另外还发现了3个LCR(Lowcomplexity region)区域。由此推测,PCNP在物种间相对保守,而且其最可能在细胞核中行使功能,对细胞周期或某些基因的表达产生影响,进而影响山羊繁殖力。     

精子分离技术的研究进展

控制家畜性别一直是人们所感兴趣的话题 ,通过性别控制可以大幅度提高生产力 ,为人类提供更多更好的畜产品。分离Ｘ精子和Ｙ精子是最简单、最经济的性别控制途径 ,这种方法主要依据Ｘ精子和Ｙ精子不同的物理特性 (体积、密度、电荷、运动性 )和化学特性 (ＤＮＡ含量、特异性抗原 )进行分离。1　性别控制技术简介1 1　性别控制的意义动物性别控制技术是通过对动物的正常生殖过程进行人为干预 ,使雌性动物产出人们期望性别后代的一门生物技术。家畜性别控制在畜牧生产中有着重要的意义。首先 ,可以充分发挥受性别限制的生产现状 (如泌乳 )和受…     

基因打靶用于哺乳动物体细胞核移植技术研究进展

哺乳动物体细胞核移植技术以其供核效率高而在动物克隆技术中占有明显的优势；基因打靶技术通过外源DNA与染色体DNA间的重组可达到定点修饰，改造基因组的目的，它与体细胞核移植技术相结合具有巨大的技术优势和广阔的应用前景。将为畜牧生产和医学生物学的研究带来前所未有的价值。     

大通牦牛4种血清激素浓度变化规律研究

首次对生长牦牛3个年龄段(5～15、17～27、29～39月龄)的4种血清激素生长激素、胰岛素、甲状腺素和三碘甲腺原氨酸(GH、INS、T4和T3)浓度进行了1年6次的跟踪测定.结果表明,生长牦牛的4种血清激素浓度在性别间没有明显差异(P＞0.05).5～39月龄牦牛血清GH、INS、T4和T3平均浓度分别为(1.635±0.914)ng·mL-1、(261.916±85.987)μg·mL-1、(46.775±17.74)ng·mL-1和(1.190±0.707)ng·mL-1.血清4种激素浓度在3个年龄段间和月份-季节间的变化十分明显.GH、INS和T4浓度从1月份到3月份都有所下降,特别是GH浓度迅速由1月份的2.913ng·mL-1下降至3月份的0.793 ng·mL-1,是此时生长牦牛在严寒(通常低于-20℃)和饥饿双重打击下,机体动员体组织贮备以适应环境的变化、维持基本生命活动的结果.INS、T4和T3浓度在暖季表现出与牧草营养供应基本同步一致的变化规律,与机体加强合成代谢有关.GH在暖季维持相对稳定或稍高水平,但这一时期生长牦牛日增重达到600～700g,证明改善机体营养状况,有提高激素受体的敏感性、促进家畜生长之作用.血清INS和T4平均浓度与平均日增重的相关系数分别达到0.738和0.805(P＜0.01),说明血清INS和T4浓度是相对重要的经济性状,可用以监控生长牦牛的营养状况和生长发育速度.     

非传染病因素对母猪死胎与木乃伊胎发生的Logistic回归分析

目的:探讨除疾病以外对母猪死胎,木乃伊胎的影响因素。方法,用Logistic回归分析对胎次,配种月份、产仔月份、产活仔数、总产仔数、木乃伊胎率和死胎率进行回归分析。结果表明,在死胎的回归分析中,产活仔数、木乃伊胎率和总产仔数3个因素被选入多因素Logistic回归模型中,其OR值分别为:36.266、0.030和0.002。在木乃伊胎进行回归分析中,分娩月份、产活仔数、死胎率和总产仔数4个因素被选入多因素Logistic回归模型中,其OR值分别为:1.092,0.404,0.227,2.561。结论:死胎的发生与环境温度、胎次无回归关系,木乃伊胎与分娩时环境温度或临近分娩时的环境温度有正回归关系,死胎和木乃伊胎都与产活仔数有负回归关系,与总产仔数有正回归关系,互相进入对方的回归方程。     

动物克隆的机理及其潜在问题

目前动物克隆技术因应用低效和后代生长发育异常等缺陷而受到限制,问题的根源在于对动物克隆机理缺乏了解。本文对此进行了简要阐述,其中包括细胞周期、线粒体命运、X染色体失活以及供体核的基因组再程序化,并对克隆技术潜在的问题做出了说明。     

4个主效基因与英系长白猪繁殖性能的相关性分析

为寻找有效的分子标记用于英系长白猪辅助育种进而提高其繁殖性能,在英系长白猪群（169头）中采用PCR-RFLP技术,进行雌激素受体（estrogen receptor,ESR）、视黄醛结合蛋白（retinol binding protein 4,RBP4）、瘦素（leptin,LEP）和促卵泡素亚基β（follicle-stimulating hormone β,FSHβ） 4种与繁殖性状相关基因的基因型频率检测,利用SPSS 19.0统计软件,采用最小二乘法将各基因不同基因型与总产仔数、产活仔数、断奶窝重、断奶头数进行了相关分析。结果显示,ESR、RBP4、LEP基因均以A为优势等位基因,FSHβ基因以B为优势等位基因,其中LEP、FSHβ基因多态位点符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）,而ESR、RBP4基因多态位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态（P<0.01）;LEP基因在长白猪母猪中表现为BB基因型为有利基因型,其总产仔数、产活仔数、断奶头数分别比AB基因型高1.3219、1.6855、1.1710头（P<0.05）;FSHβ基因中AA基因型为不利基因型,BB基因型断奶窝重比AA基因型高5.1129 kg（P<0.05）;ESR、RBP4基因对长白母猪繁殖性能均无显著影响（P>0.05）,而LEP、FSHβ基因可能作为有价值的候选基因应用于英系长白猪的分子标记辅助选择。     

深县猪保种群遗传多样性简化监测方法研究

为建立深县猪种群多样性监测的简化指标体系,试验采集河北省深县猪4个世代179头猪样本,采用联合国粮农组织和国际动物遗传协会联合推荐的27个微卫星标记进行群体遗传多样性分析,对27个微卫星标记进行两阶段、多梯度抽样,并根据抽样群体和总群体的多态信息含量（PIC）值的变化确定适宜抽样微卫星位点数,再以4个世代样本进行验证。结果表明,选取8个微卫星位点时与全部位点的比较相对偏差可控制在5%以内,且以各分世代的验证比较相对偏差在10%左右,通过比较确定以S0155、S0228、SW632、S0090、CGA、S0101、S0227、SW122这8个微卫星位点构成的简化指标体系可较好地反映深县猪种群遗传多样性的变化。因此,深县猪的保种群群体遗传多样性监测可以简化为检测这8个微卫星位点,同时本研究采用的方法也可为其他保种群的遗传多样性监测方法的简化处理提供参考。     

杜洛克、长白和大约克夏纯种猪微卫星多态性分析

利用8个微卫星标记对杜洛克、长白、大约克夏、长大、杜长大5个种群的等位基因的频率、基因杂合度、平均杂合度、多态信息含量,F-统计量、迁移率以及3个纯种之间的遗传距离进行分析.研究结果表明:各群体的平均基因杂合度存在一定差异,杜长大猪群的平均杂合度高于长大猪群,高于3个纯种群的平均杂合度;3个纯种猪群中,杜洛克平均基因杂合度最低,为0.648 8,大约克夏平均基因杂合度最高,为0.723 3;平均多态信息含量也出现了相同的结果.聚类结果显示:长白、大约克夏间的距离最大,长白、杜洛克间的距离最小,表明长白与大约克夏交配后与杜洛克杂交产生的杂种优势最大,这与实际的杂交组合一致, 遗传距离可以预测杂种优势.Fst衡量等位基因频率群体间方差,显示群体总变异的约有3.9%～11.4%来自种群间,而剩余的88.6%～96.1%则来自种群内, Fst可以作为选育程度的一个指标.