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为阐明KLF5在山羊不同组织和不同诱导分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达特性,利用降落PCR克隆山羊KLF5基因cDNA序列,通过各种在线工具分析山羊KLF5基因的生物学特征,利用实时荧光定量PCR技术分析KLF5基因在山羊不同组织和不同诱导分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达水平。结果表明,克隆获得山羊KLF5基因序列1 735 bp,其中包括1 365 bp完整的开放阅读框(ORF)、8 bp的5′非翻译区(UTR)和362 bp的3′UTR。蛋白预测显示,山羊KLF5编码454个氨基酸,合成不具有跨膜结构和信号肽的不稳定的亲水性蛋白。组织表达谱显示KLF5基因在山羊心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、皮下脂肪和腹间脂肪等组织中均有表达,但在肺组织中的表达量较高,显著高于除腹间脂肪外的其他组织中的表达(P<0.05)。同时,细胞时序表达谱表明KLF5在分化的山羊肌内脂肪细胞中的表达水平均高于肌内前体脂肪细胞中的表达水平,且在诱导分化第5天时的表达量最高,显著高于第0天的表达量(P<0.05)。研究结果发现,具有3个锌指结构域等复杂结构的KLF5蛋白可能在山羊肌内脂肪细胞分化后期发挥正向... 相似文献
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多粘芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价 总被引:3,自引:0,他引:3
为了探讨多粘芽孢杆菌的抗逆性与益生特性,通过5个试验评定多粘芽孢杆菌的抗热、抗酸、耐胆盐、抑菌性能和粘附性。85℃水浴对多粘芽孢杆菌分别处理2.5,5.0,7.5 min模拟制粒条件;利用pH分别为2、3、4的人工胃液模拟胃液环境;0.3%胆盐模拟肠液环境;抑菌试验测定多粘芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力;以蛋鸡肠道上皮细胞为模型测定多粘芽孢杆菌的粘附能力。结果表明:多粘芽孢杆菌高温处理7.5min活菌数较对照组减少1.17%(P0.05)。在耐酸性试验中,pH3的试验组较对照组活菌数降低0.37%(P0.05)。在耐胆盐试验中,试验组活菌数较对照组降低了0.74%(P0.05)。多粘芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0,17.46 mm。粘附性试验结果显示,在每100个蛋鸡肠道黏膜上皮细胞上可以粘附30个多粘芽孢杆菌。因此,制粒温度、人工胃液、人工肠液不影响多粘芽孢杆菌活菌数;多粘芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有显著的抑制能力,基本不能在蛋鸡消化道内定植。 相似文献
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旨在克隆山羊Smad3的基础上,明确其组织和细胞表达谱,最终阐明干扰Smad3基因对山羊肌内和皮下脂肪细胞分化的影响。本研究选用5只体况良好的1周龄简州大耳羊,空腹24 h后屠宰并采集相应组织和细胞进行试验。利用RT-PCR技术克隆山羊Smad3基因cDNA区序列并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术检测Smad3基因的组织和细胞时序表达水平;并且合成靶向Smad3的siRNA,采用油红O染色从形态学上明确干扰Smad3对山羊前体脂肪细胞成脂分化的影响,利用qPCR检测干扰Smad3对脂肪细胞分化标志基因C/EBPα、C/EBPβ、LPL、SREBP1、AP2、PPARγ、Pref-1、KLF3、KLF4、KLF6、KLF7、KLF8、KLF9、KLF10和KLF15以及Smads相关基因Smad2、Smad4、Smad7和TGF-β1基因mRNA表达水平的影响,探讨可能的作用机制。结果,获得山羊Smad3基因1 449 bp,其中CDS区序列为1 278 bp,编码425个氨基酸;Smad3在山羊各组织中具有广泛表达特性,且在肾脏中的表达水平最高(P<0.01);Smad3均在山羊肌内和皮下两种脂肪细胞诱导分化的36 h表达量最低,极显著低于在未分化前体脂肪细胞中的表达丰度(P<0.01);干扰Smad3后发现显著促进了山羊肌内和皮下脂肪细胞中脂滴的聚集,且脂肪细胞分化标志基因、KLF3、KLF4、KLF8、KLF9、KLF10和KLF15的表达水平显著上升(P<0.05),Pref-1的相对表达水平极显著下降(P<0.01),同时干扰Smad3基因下调了Smad2、Smad4和Smad7基因的相对表达水平(P<0.05)。研究结果指出,干扰Smad3促进山羊脂肪细胞分化,且可能通过调控脂肪细胞分化标志基因C/EBPα、C/EBPβ、LPL、SREBP1、AP2、Pref-1、KLF3、KLF4、KLF8、KLF9、KLF10和KLF15等及协同Smad2、Smad4和Smad7的表达来实现的。 相似文献
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旨在获得藏鸡GEM基因序列,阐明其组织表达和时序表达谱,同时分析基因表达与肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)沉积的关系,为进一步研究藏鸡肉质和脂肪沉积奠定基础。选取1,81,119,154,210日龄健康藏鸡为试验材料,屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腿肌和皮下脂肪组织,提取组织总RNA,利用RT-PCR技术克隆藏鸡GEM基因序列,利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在藏鸡不同组织以及不同发育时期胸肌和腿肌的表达情况。结果表明,克隆获得藏鸡GEM基因序列940 bp(Gen Bank登录号:KY747399),其中,CDS为894 bp,5'UTR 24 bp和3'UTR22 bp,编码297个氨基酸,与原鸡、绿头鸭、人和小鼠GEM氨基酸序列相似性较高(83.50%~98.32%);组织表达结果显示,GEM在藏鸡肺组织中的表达水平最高,极显著高于其他组织(P0.01),在脂肪组织和脾组织中也存在较高水平的表达;时序表达结果显示,GEM基因在不同发育阶段藏鸡胸肌和腿肌中的表达模式存在差异,在胸肌中的表达水平随日龄的增加呈下降趋势,而在腿肌中随日龄的增加呈先上升后下降的表达趋势,且在119日龄达到峰值;GEM基因表达水平与不同发育阶段藏鸡胸肌和腿肌中IMF含量呈不同程度的相关,存在性别差异,且在公藏鸡腿肌中达到显著水平(r=0.414,P0.05)。结果表明,GEM基因可能在藏鸡脂质代谢中起重要调控作用。 相似文献
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为探讨饲料中添加脂肪对蛋鸡生产性能的影响,选择300日龄褐壳蛋鸡720只,随机分为3个处理,每个处理分为6个重复;试验组分别添加1%、2%脂肪粉,观测其对蛋鸡生产性能、生理变化及经济效益的影响。结果表明:添加脂肪,可以明显提高(P〈0.05)蛋鸡产蛋率(3.51~5.23%)和蛋重(6.03~8.69%),降低采食量(3.63~3.67%),改善饲料报酬(13.08~16.03%);生理指标检测结果显示,试验组血清T3、T4含量显著提高(P〈0.05),并且有提高GH、IGF-1含量趋势(P〉0.05);综合经济效益分析,添加脂肪可以提高蛋鸡养殖效益(16.67~26.98%)。因此,杂粕型蛋鸡饲料中添加脂肪有实际意义。 相似文献
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本试验通过添加植酸酶、有机酸(柠檬酸、抗坏血酸)和维生素D3、木聚糖酶来减少无机磷的添加量,提高饲料中植酸磷的利用率,降低磷的排泄量。选择30 kg左右的"斯格"纯种猪70头,随机分成7组:常磷组、低磷日粮组(NC)、NC+600 U/kg植酸酶组、NC+600 U/kg植酸酶+10 g/kg的柠檬酸、NC+600 U/kg植酸酶+10 g/kg的柠檬酸+200 mg/kg抗坏血酸、NC+600 U/kg植酸酶+10 g/kg的柠檬酸+200 mg/kg抗坏血酸+100μg/kg的维生素D3、不添加磷酸氢钙。所有日粮中都添加50 mg/kg木聚糖酶。结果表明:低磷日粮添加植酸酶、有机酸(柠檬酸、抗坏血酸)和维生素D3,平均日采食量无显著影响(P0.05),日增重显著提高(P0.05),料重比显著降低(P0.05);养分消化率均显著提高;血液指标着中,白蛋白显著降低(P0.05),碱性磷酸酶、总蛋白、谷草、谷丙转氨酶无影响(P0.05)。 相似文献
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植酸酶对獭兔生产性能和矿物质排泄量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
试验研究了低磷日粮中添加植酸酶对獭兔生产性能和矿物质排泄量的影响。选用 3月龄左右体重相近的健康獭兔 5 0只 ,随机分为 5组。Ⅰ组为基础日粮组 (负对照 ) ,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为添加 4 0 0、6 0 0、80 0U kg植酸酶组 ,Ⅴ组为添加 1 8%磷酸氢钙组 (正对照 )。结果表明 :(1)添加植酸酶可以提高獭兔的日增重 (P <0 0 5 ) ,对日采食量和料肉比无显著影响 (P >0 0 5 )。(2 )添加植酸酶可显著降低獭兔粪中磷的排泄量 ,对粪中钙、铜、铁、锌、锰的排泄量均无显著影响 (P >0 0 5 )。但随着植酸酶水平的升高 ,粪铜含量呈上升趋势 ;粪钙、锌、锰的含量有所降低 ;粪铁含量无规律性变化趋势。 相似文献