应用PCR方法对广西公猪精液的伪狂犬病、圆环病毒2型和细小病毒混合感染情况的检测

应用PCR技术,2006年对广西11个猪场的公猪精液235头份进行猪伪狂犬病(PRV)、圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)混合感染情况的检测。结果,235份样品中PRV阳性率为5.53%,PCV2阳性率为17.02%,PPV阳性率为13.62%;PRV与PCV2、PPV均存在不同的混合感染现象。结果表明,我区公猪精液PRV、PCV2和PRV带毒情况比较严重,成为当前造成母猪繁殖障碍和规模场猪群发病的主要原因,这将为今后种猪场对PRV、PCV2和PRV的控制与净化工作提供了依据。     

广西猪链球菌2型的分离及PCR鉴定

无菌操作采取疑似猪链球菌病的仔猪组织,接种血平板,对染色镜检为链球菌的菌落分纯、液体培养后进行DNA抽提,用荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白基因、胞外蛋白因子基因的特异性引物分别扩增出236bp、572bp和867bp大小的目的片段,鉴定确认该菌株为猪链球菌2型。     

广西家畜猝死症病因调查报告

近年,家畜"猝死症"在我区各地市不同程度地存在,严重威胁着我区家畜养殖业的健康发展.1994年至1997年4月,我区先后有10个地市、20个县、40个乡镇、116个自然村发生疫情,病死家畜2596头.     

鸭疫里氏杆菌病的防治试验

鸭疫里氏杆菌病又称传染性浆膜炎,以心包炎、肝周炎、气囊炎为特征性病变。它严重危害１～８周龄的小鸭,引起较高的死亡率和生长障碍,给养鸭业造成较大的损失。本病的药物预防效果不明显,病原对一些抗菌素不敏感。污染的场地很难净化,几乎同一场地的每一批鸭都在差不...     

广西某猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是20世纪80年代后期发现的一种新的高度传染性的疾病,临床上以母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸道症状、死亡率高为主要特征.该病自1987年在美国发现以来,至今已蔓延至世界所有养猪国家,给养猪业带来巨大的经济损失.     

广西部分种猪场公猪精液中猪瘟和PRRS带毒情况的调查

应用RT-PCR技术,对广西部分种猪场的公猪精液328份进行猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)带毒情况的调查。结果,328份猪瘟病料中检出CSFV阳性样品55份,阳性率16.76%,PRRSV阳性样品38份,阳性率11.59%;其中有14份样品同时检出CSFV和PRRSV,混合感染阳性率达4.27%。结果表明,我区公猪精液CSFV和PRRSV带毒情况比较严重,提示近年来CSFV和PRRSV的发生与日趋复杂化可能与公猪精液带毒传播有关,为今后猪场对CSFV和PRRSV的控制与净化工作提供了科学依据。     

鹅源H9N2亚型禽流感病毒PB2和PB1基因序列分析

采用RT-PCR方法对1株鹅源H9N2亚型禽流感病毒(GS/GX/01/07)RNA聚合酶基因PB2和PB1分别进行了扩增,将其克隆到pMD18-T载体后进行序列测定与分析.结果表明,该株病毒的PB2、PB1开放阅读框(ORF)分别由2 280和2 277个碱基组成,分别编码759和758个氨基酸.经同源性和系统进化树...     

小鼠IL-6、iNOS TaqMan荧光定量PCR 检测方法的建立及应用

为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后IL-6、iNOS基因的表达水平,从分子水平深入研究EMCV的致病机制,分别针对小鼠IL-6、iNOS及管家基因β-actin 的基因序列设计特异性引物和探针,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-6、iNOS和β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法。该方法线性关系好,IL-6、iNOS和β-actin标准曲线的相关系数均达到0.998;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×10¹拷贝/μL;特异性强,只有以总RNA反转录成的cDNA为模板,并加入特异性引物和探针的反应才检测到荧光信号;重复性好,组内与组间的变异系数均小于2%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株感染小鼠的脑、心脏中IL-6、iNOS mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,本研究建立的TaqMan real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于小鼠IL-6、iNOS基因的检测及定量分析。     

广西出现猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染

2004年4月以来,广西的桂林、玉林、南宁、崇左、贵港、来宾6市共8个规模化猪场均发生以肺部严重病变、淋巴结肿大出血为主要特征的疫病。在流行病学调查、临床症状、病理剖检的基础上,采用已建立的诊断猪繁殖与呼吸综合征病毒的RTPCR技术和诊断猪圆环病毒2型的PCR技术,从这几个规模化猪场的病料中均扩增出特异的目的基因片段,证实为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染。     

猪链球菌2型多重PCR检测方法的建立及应用

设计3对引物,分别扩增链球菌属特异性gdh、猪链球菌种特异性16S rRNA和猪链球菌2型特异性cps2J等基因,目的片段大小分别为725bp、523bp和387bp。利用合成的3对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了多重PCR。应用该多重PCR检测了分离到的链球菌1105株,检出猪链球菌667株,猪链球菌2型33株。研究结果表明,该方法特异性高、敏感性强,可广泛应用于猪链球菌病的快速诊断及流行病学调查。