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为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)提供理论数据,根据GenBank公布的PRRSV CH-la株和JXAl株的核苷酸序列,设计并合成三对特异性引物.应用RT-PCR方法分别扩增PRRSV HB-4(hs)株的ORF5,ORF6,ORF7基因片段.分别将片段克隆入pGM-T载体后进行测序,并与多株GenBank中发表的PRRSV毒株ORF5-7基因的核苷酸序列进行比较和变异分析.结果表明,PRRSV HB-4(hs)株属于美洲型,其与近两年流行的毒株群相似性高达98.8%~99.5%;与早年流行毒株群相似性较低.为91.9%~92.6%.系统进化树表明:HB-4(hs)株及近两年流行的毒株可能均由早期分离的河北HB-1(sh)株进化化而来. 相似文献
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应用PCR方法扩增新型鸭细小病毒(NDPV)VP3基因,将其克隆至原核表达载体pQE1中,获得重组质粒pQE1-VP3。重组质粒pQE1-VP3经优化诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析并利用His标签抗体对表达的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,NDPV VP3蛋白在25℃、IPTG浓度为1.0mmol/L经诱导5h,可获得最大诱导表达量,表达蛋白的分子质量约为60ku,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可获得浓度为5.165 mg/mL及纯度为97%的VP3蛋白。获得的重组菌pQE1-VP3以及高纯度的VP3蛋白,为进一步研究NDPV检测方法和新型疫苗奠定了基础。 相似文献
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猪的繁殖障碍性疾病在国内外都有严重的发生,可以说凡是养猪的地方都有此症候群的发生。据一些国家报道,母猪流产、死产等所造成的损失约占哺乳仔猪的四分之一。我国在不同地区、不同猪场、不同年份造成的损失不完全一致,但损失仔猪在四分之一左右的较为常见,而个别地方仔猪损失率达到40%,甚至80%以上者也有发生,往往造成了一个时期的仔猪断层。由此可见因繁殖障碍疾病对养猪业所造成的损失是非常大的。母猪的繁殖一般经过发情,配种受精,妊娠,分娩等几个过程,彼此顺序协调,从生殖细胞开始,经过配种、受精、胚泡着床、妊娠、分娩以至泌乳,其… 相似文献
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双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。 相似文献
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健康鸡与病鸡大肠杆菌某些生物特性的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从健康肉鸡和蛋鸡分离到大肠杆菌180株,已鉴定的血清型为01,O2,O7,O8,O36,O78,O111,其中O2,O78为致病性大肠杆菌所常见的血清型;从大肠杆菌病病鸡分离到70株,已鉴定的血清型有O2,O78,O36。用9种抗生素进行了药敏试验。结果表明:绝大多数菌株对庆大霉素、痢特灵和卡那霉素有较高敏感性;一些菌株对氯霉素、链霉素和环丙沙星也有较高的敏感性;部分菌株对四环素和新诺明有耐药性。 相似文献
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传染性法氏囊病病毒HB株VP2蛋白的表达及免疫原性测定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究传染性法氏囊病病毒河北分离株(HB株)VP2蛋白的免疫原性,对VP2基因进行了表达及免疫原性测定。将传染性法氏囊病病毒HB株VP2基因亚克隆到原核表达载体pET-32a-c(+)中并对其进行了诱导表达。SDS-PAGE电泳和Western blot分析表明,表达的重组蛋白约55ku,以包涵体形式存在。重组蛋白纯化后,免疫接种6周龄Balb/c小鼠,制备的血清ELISA效价在1∶6 400以上,说明所表达的HB株VP2蛋白免疫原性良好。 相似文献
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应用PCR方法扩增禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAd V-4) Hexon基因,将其克隆至原核表达载体p QE1中,获得重组质粒p QE1-hexon。将重组质粒经诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果,Hexon蛋白在25℃经诱导4 h、IPTG浓度为0. 8 mmol/L时可获得最大诱导表达量,表达蛋白的相对分子质量约为107 k D,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可得到浓度为5. 165 mg/m L及纯度为97%的Hexon蛋白。本研究获得的重组菌p QE1-hexon以及高纯度的Hexon蛋白,为进一步研究FAd V-4检测方法和新型疫苗奠定了基础。 相似文献
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羊支原体性肺炎两标准株对抗菌药物敏感性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本实验测定了环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙星、红霉素、罗红霉素、泰勒菌素、泰妙菌素、四环素等8种药物对羊肺炎支原体两个标准株Y98和Y-goat的体外抑菌浓度以及红霉素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y-goat和四环素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y98的联合药敏作用。对羊肺炎支原体两个标准株对抗菌药物的敏感性进行了分析。 相似文献
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胶体金快速诊断方法对鸡减蛋综合征病毒的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
选择15nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,与鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应。表明,该试纸条用于检测EDSV具有快速、操作简便、特异性强等优点,可用于大批量抗原样本的检测。 相似文献