PCR方法检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征(Egg drop syndrome 1976 EDS-76)病毒DNA序列,设计合成了1对能扩增300 bp DNA片段的引物,建立了EDS-76病毒的聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法对EDS-76病毒标准株AV-127扩增结果为阳性;对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性。结果表明该方法特异且敏感,检测的最低病毒DNA含量达到2.5×10-2pg,PCR检测表明,从试验感染鸡的心脏中不能检测出病毒,肝脏和肾脏只有在感染后7~15 d检出,在试验感染后4~21 d的子宫、血液和4~17 d的脾中均能检测到病毒。     

鸡传染性法氏囊病毒超强毒新型疫苗的研究进展

<正> 传染性法氏囊病毒(IBDV)可引起鸡急性、高度接触传染性的免疫抑制性疾病,即传染性法氏囊病(IBD),该病是由Gosegrove(1957年)在美国首次发现的,现已遍及全世界主要养禽地区,给世界养禽业造成了巨大的损失,被国际公认为鸡的三大疫病之一。1962年 Gosegrove 正式报道了该病在美国特拉华州甘布罗镇的肉鸡群中发生,因此又称"甘布罗病"。本病毒首先攻破宿主机体免疫屏障后,在机体内繁殖。病毒感染鸡体后,常引起鸡的免疫抑制现象。八十年代以后,IBDV 的流行出现了新的特点。首先在美国发现了 IBDV 血清Ⅰ型变异株,其抗原性发生了变异,能引起经典Ⅰ型疫苗毒免疫的鸡群发病,常呈亚临床感染,多见于3周龄之前的雏鸡,其法氏囊未见炎症而仅见萎缩,实验感染 SPF 鸡后也未见死亡。1987年,在比利时首先报道了以高死亡率为特征的 IBD.其病原被称     

兽医生物制品学课程建设与改革

"兽医生物制品学"是面向动物药学与动物医学专业开设的必修课程之一。根据教育部精品课程建设意见,课程组从教学素材库、教学基地、教学方法及考核制度4个方面进行了课程建设的探索与实践。开发多媒体课件,建成教学素材库与教学实习基地。开放实验室,开展网络教学与创新能力训练,提出了"选择主题-实施项目-展示交流-评价完善"的"四步"教学模式,同时摸索出了创新能力训练、实验测评、期末考试相结合的综合考核方法。     

禽腺病毒4型hexon基因克隆与原核表达分析

应用PCR方法扩增禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAd V-4) Hexon基因,将其克隆至原核表达载体p QE1中,获得重组质粒p QE1-hexon。将重组质粒经诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果,Hexon蛋白在25℃经诱导4 h、IPTG浓度为0. 8 mmol/L时可获得最大诱导表达量,表达蛋白的相对分子质量约为107 k D,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可得到浓度为5. 165 mg/m L及纯度为97%的Hexon蛋白。本研究获得的重组菌p QE1-hexon以及高纯度的Hexon蛋白,为进一步研究FAd V-4检测方法和新型疫苗奠定了基础。     

产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子及其疫苗的研究进展

产肠毒素性大肠杆菌的毒力因子很多,包括黏附素,肠毒素,溶血素等,其中黏附素与肠毒素在发病学和免疫学方面都扮演着重要角色。本文对产肠毒素性大肠杆菌的主要毒力因子作一综述,并介绍产肠毒素性大肠杆菌各类黏附素疫苗的研究现状。     

PRRSV高致病性毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

根据GenBank中已发表的PRRSV的NSP2基因序列,设计一对特异性引物。针对经典型毒株与高致病性毒株,采用RT-PCR方法扩增,可分别扩增出相应的576bp,486bp的目的片段。从而在检测PRRSV的基础上,进一步区分PRRSV的经典型和高致病性毒株。通过对扩增条件的筛选,成功地建立了猪繁殖与呼吸综合征经典型与高致病性毒株的RT-PCR鉴别诊断方法,且为PRRSV分离株的鉴定分型及NSP2功能研究奠定了基础。     

复方四君子可溶性粉对肉用仔鸡免疫效果的影响

1日龄肉用仔鸡300只,随机分成3组,分别为对照组、2‰组和4‰组即试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组5个重复,每个重复20只鸡,观察肉用仔鸡在常规免疫情况下,饲料中添加复方四君子可溶性粉后,对肉用仔鸡机体免疫力和体重的影响。试验结果表明,使用复方四君子可溶粉后,肉用仔鸡在第14、21天的鸡新城疫抗体水平上试验Ⅱ组与试验Ⅰ组差异显著（P<0.05）,第28、35天各组间差异不显著（P>0.05）,说明本方剂对低日龄肉用仔鸡新城疫的免疫有较好作用;第21天的试验Ⅱ组与试验Ⅰ组在鸡传染性法氏囊病抗体水平上差异显著（P<0.05）,第28、35天差异不显著（P>0.05）;免疫指数结果表明试验组的体液免疫效果均高于对照组（P<0.05）,说明通过饲喂复方四君子可溶粉,提高了机体的体液免疫。     

双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究

应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。     

牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立

建立一种适用于牛轮状病毒(BRV)的反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。根据GenBank中登录的BRV VP7基因序列,针对其保守区设计了4条引物,利用RT-LAMP方法进行检测,并优化了反应体系与反应时间,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需要50min就能检测出结果,与普通RT-PCR相比,具有较短的检测时间、良好的特异性和较高的灵敏度。论文针对BRV建立的RT-LAMP快速检测方法操作简便、无需昂贵设备、结果可视,适用于BRV在基层的快速检测。     

猪博卡病毒NP1基因的克隆及其生物信息学分析

根据Gen Bank发表的猪博卡病毒主要抗原基因NP1基因设计1对引物,采用降落PCR方法进行扩增,克隆后测序,并对该基因进行生物信息学分析。结果表明:成功克隆到猪博卡病毒NP1基因;NP1蛋白的二级结构中自由卷曲含量最高(51.77%),无跨膜蛋白,含有1个糖基化位点、30个磷酸化位点,有6个线性B细胞优势抗原表位,分别位于NP1蛋白的7—14位、27—50位、59—73位、85—94位、102—108位、151—155位。