鸡减蛋综合征病毒Hexon基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

用PCR方法扩增出鸡减蛋综合征病毒（EDSV）Hexon基因保守片段,经琼脂糖凝胶电泳及序列测定分析扩增产物的特异性。以构建的阳性重组质粒作为标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应的扩增曲线和溶解曲线,并绘制标准曲线。结果表明,建立的EDSV荧光定量PCR标准曲线Ct值与1×10^1～1×10^6拷贝/μL的基因拷贝数呈现良好线性关系,灵敏度可达10拷贝,且特异性及重复性良好;说明本试验建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法可用于EDSV的诊断及病原的定量分析。     

羊支原体性肺炎两标准株对抗菌药物敏感性的研究

本实验测定了环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙星、红霉素、罗红霉素、泰勒菌素、泰妙菌素、四环素等8种药物对羊肺炎支原体两个标准株Y98和Y-goat的体外抑菌浓度以及红霉素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y-goat和四环素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y98的联合药敏作用。对羊肺炎支原体两个标准株对抗菌药物的敏感性进行了分析。     

中药对腹水症肉鸡血液理化指标的影响

肉鸡腹水症是临床上以腹水为主的循环、呼吸系统发生障碍综合征 ,发病集中于 4～ 5周龄 ,发病率高达 85 % ,死亡率为 0 %～ 30 %。肉鸡腹水症造成的经济损失巨大 ,成为影响肉鸡业发展的主要疾病之一。不少兽医工作者在防治本病上做了大量工作 ,但未有利用祖国医学研究肉鸡腹水症血液理化指标及心包液、腹水量变化方面的报道。我们根据肉鸡腹水症的发病机理和中医理论筛选中药治疗本病 ,取得较好效果。现报道如下。1　材料与方法1 .1　试验动物　经临床检查 ,A超探测 ,确诊 30日龄患腹水症的艾维茵肉鸡 1 0 0只 ,另选 5 0只 30日龄健康肉鸡…     

鸡新城疫病毒地方株的分离鉴定及其遗传变异分析

从河北省保定地区发病鸡群中分离到2个具有血凝性的病毒株分别命名为HBA和HBB,其血凝作用可被NDV阳性血清抑制,而不能被AIV(H9亚型)、EDS76阳性血清抑制,表明2个分离株均为新城疫病毒。通过测定MDT、ICPI和IVPI等方法鉴定分离株的毒力符合强毒标准。利用RT-PCR技术成功扩增了2株分离株的F基因片段(约540bp),通过测序及遗传变异分析表明两毒株之间的核苷酸同源性为87.7%,氨基酸同源性为91.6%,结合系统发育进化树分析表明HBA为基因Ⅵ型,HBB为基因Ⅶ型。     

2株鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株的分离鉴定

用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)超强毒株 (vv IBDV) He B- lf和 He B- bd接种 SPF鸡 ,36 h后接种鸡开始发病 ,发病率为 10 0 %,死亡率为 5 0 %以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化 ,如肌肉、心脏、腺胃出血 ,法氏囊水肿或呈“紫葡萄”样外观。经血清学试验、毒力试验、鸡胚接种试验、分子生物学和电镜形态学观察均证明该两分离物为超强毒株 ,从而证明河北省鸡群中存在不同于经典 IBDV的超强毒株。     

中药复方制剂抗猪流感病毒作用的研究

[目的]探讨中药复方制剂(金银花、连翘、薄荷、牛蒡子、桔梗、甘草、淡竹叶、淡豆豉)对感染猪流感病毒小鼠的保护作用。[方法]猪流感病毒感染小鼠4 h后给药,以死亡率、平均存活时间、肺指数、肺指数抑制率、血凝滴度、脾脏指数、胸腺指数为评价指标,观察中药复方制剂在小鼠体内的抗流感病毒作用。[结果]中药复方制剂能降低流感病毒感染小鼠的死亡率(P0.01),延长小鼠的存活时间(P0.01),降低肺指数(P0.01),降低血凝滴度(P0.01),增加胸腺指数(P0.01)。[结论]该中药复方制剂具有良好的抗猪流感病毒作用。     

河北猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3(cz)株N基因变异分析及原核表达

为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征提供理论数据。应用RT-PCR方法特异性扩增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,将扩增片段克隆入pMD-T载体后测序,应用DNAstar分析软件对序列进行分析,并与GenBank中发表的PRRSV毒株序列进行比较。结果显示:HB-3(cz)株与高热病毒株JXA1、HUB2等及传统河北分离株HB-1(sh)氨基酸同源性高达97.6%,属美洲型毒株。将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,重组质粒pGEX-N转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达,经Western-blot-ting分析表明:表达的融合蛋白分子量约为39.5 kDa,能与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV血清学诊断方法的建立奠定了基础。     

大肠杆菌引起肉鸡腹水症的流行调查与实验研究

大肠杆菌是在１８８５年发现的，在相当长的时期内一直被当作是正常肠道菌群的一部分而非致病菌。直到２０世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有致病性，尤其是对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症。随着大型集约化养鸡业的发展，病原性大肠杆菌的危害越来越大。近年来，大肠杆菌对肉鸡业的危害见于许多报道。本研究对肉用仔鸡腹水征的传染性因素进行了调查和实验，包括肉鸡腹水症患鸡大肠杆菌的分离，大肠杆菌复制肉用仔鸡腹水症实验，对死亡鸡的主要症状进行了分析，对结果进行了讨论。 一、材料与方法 １．方…     

高致病性PRRSV河北地方株的分离鉴定及部分Nsp2基因变异分析

从唐山某猪场患高热病病料中分离到1株病毒,该病毒能在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型PRRSV,将其命名为TS02。应用设计的特异性引物扩增TS02株的Nsp2基因,并与国内外PRRSV分离株的Nsp2基因序列进行了比较。结果表明,TS02株Nsp2基因推导的氨基酸序列出现30个不连续的缺失,与PRRSV高致病性毒株JXA1、GD、WUH1、Jiangxi-3的核苷酸序列同源性分别为97.7%、97.7%、96.5%和97.1%。     

山羊传染性胸膜肺炎支原体和绵羊肺炎支原体对抗菌药物敏感性的研究

测定了环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙星、红霉素、罗红霉素、泰乐菌素、泰妙菌素、四环素等8种药物对羊肺炎支原体两个标准株Y-98和Y-goat的体外抑菌浓度以及红霉素与氧氟沙星、泰乐菌素对Y-goat和四环素与氧氟沙星、泰乐菌素对Y-98的联合药敏作用.结果表明,这8种抗菌药物对Y-goat和Y-98的MIC(μg/mL)分别为:环丙沙星0.223、0.002 23,氧氟沙星0.281、0.014 0,单诺沙星0.136、0.014 0,红霉素0.021 8、无效,罗红霉素0.032 7、无效,泰乐菌素0.042 2、0.039 0,泰妙菌素0.021 7、0.052 0,四环素0.195、0.052 0.红霉素与氧氟沙星的联合药敏指数为1,是相加作用;红霉素与泰乐菌素对Y-goat的联合药敏指数为1.5,是无关作用;四环素与氧氟沙星、泰乐菌素对Y-98的联合药敏试验指数均为0.375,是协同作用.