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211.
提取禽流感病毒液中RNA,根据GenBank中收录的禽流感病毒(AIV)H5N1亚型的血凝素(HA)基因序列设计并合成了1对引物。RT-PCR扩增出HA全基因,并克隆到pMD18-T载体,对重组质粒进行酶切鉴定及序列测定。与GenBank收录的其他AIV H5N1亚型的HA基因进行序列比较分析,同源性达96%~99%。从HA基因序列中截取HA1基因,亚克隆到表达质粒pET-28a中构建HA1基因原核表达质粒,转化E.coliBL21(DE3)细胞,在IPTG诱导下表达出HA1蛋白,所表达的蛋白质分子质量约为37~40ku。该研究为进一步开发用于禽流感抗体检测的抗原蛋白打下了基础。 相似文献
212.
213.
鸡腺胃型传染性支气管炎(综述) 总被引:15,自引:0,他引:15
1996年9月份以来,中国青岛及附近地区养鸡场20-90日龄蛋用育成鸡连续发生了一种以流泪,肿眼,伴有呼吸道症状,极度消瘦,拉稀,死亡为特征的一种新的呼吸道传染病。主要剖检表现为腺胃肿大如球状,腺胃壁增厚,腺胃粘膜出血溃疡,腺胃乳头平整融合,轮廓不清,可挤出脓性分泌物的腺胃炎症变化。本病病原通过鸡胚盲传5-6代,电镜观察到典型的冠状病毒。因为引起腺胃的特征性的病理变化,因此将此病暂定名为腺胃型传染性支气管炎。我们青岛地区鸡场的分离株定为QXIBV株。本篇从病原学、临床症状、发病机理和流行病学、免疫学、实验诊断和疾病控制方面进行综合论述。本病与肠型传支在理化特性、形态和毒力上相似,可能是同一种新的IBV变异株。 相似文献
214.
分别用绿猴肾细胞和鸡胚成纤维细胞殖鸡传染性鼻气管炎病毒NL7784株,提纯抗原建立了检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),试验的最佳反应条件为:抗原最佳稀释度为1:160,酶标抗体为1:1000稀释,待检血清为1:160稀释,包被液为pH9.0的碳酸盐缓冲兴,6%犊牛血清(CS)作封闭液,稀释液用含10%CS的Tween-20磷酸盐缓冲液,洗涤液用含0.5%Tween-20的磷酸盐缓冲液,抗原与抗体的最佳反应时间为30分钟,底物的反应时间为15分钟。与中和试验进行了比较,证明所产方法具有很好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性。 相似文献
215.
216.
217.
218.
经半固体诱导,用M-肉汤培养沙门氏菌,离心收集细菌,将其悬浮于PH2.0溶液中,室温缓慢振荡30分钟.再经差速离心取上清液用1NNaOH溶液调pH至7.2左右。经硫酸铵沉淀,过SephacrylS-300柱,收集第一峰。电镜观察、SDS-PAGE、等电聚焦试验及ELISA试验结果均表明提纯的鞭毛蛋白纯度高。 相似文献
219.