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近年来,real-tim e PCR技术作为一种敏感、快速、简便、重复性好的检测技术已广泛出现在生物学研究领域。real-tim e polym erase chain reaction(RT-PCR)是Kary M ullis在二十世纪八十年代在PCR的基础上发展革新的一项新技术,它能使小量DN A片段扩增一百万倍。这项技术推动了分子生物学技术的发展,简便的操作不仅可应用于普通实验,还可用于人类基因组工程。根据2003年调查的406位科学工作者,48%的研究人员近年来正在使用这项技术。随着使用这项技术的人数增多,各类相关的论文也相继增多。real-tim e PCR将会影响PCR技术的发展,并… 相似文献
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禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是病毒粒子表面抗原,是亚型划分的重要依据。从云南分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经RT-PCR分别扩增云南毒株10个HA和9个NA基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:云南H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为95.0%~99.7%;NA基因核苷酸序列同源性为86.2%~99.6%。在进化分枝中HA基因均属于欧亚分枝的类CBJ194亚分枝,与CBJ194的核苷酸序列同源性为92.0%~99.1%,NA基因属于CK/BJ/1/94和QaHKG1/97两个分枝。云南毒株HA裂解位点结构具有低致病性病毒分子特征;HA受体结合位点143、145、198和234位氨基酸存在变异,尤其234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性。NA糖基化位点61~63、86~88部分毒株存在缺失,部分毒株在143~145位出现新的糖基化位点。 相似文献
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