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本研究旨在克隆微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21开放阅读框,构建其原核表达质粒,并对获得的融合蛋白进行鉴定。从含CP21基因的噬菌体中提取模板DNA,PCR扩增基因片段,构建pET-28a-CP21原核表达质粒,转化至埃希氏大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。用原核表达蛋白免疫小鼠,制备抗重组蛋白多抗,对蛋白进行定位。结果表明成功扩增出CP21基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量为25 ku的融合蛋白,Western blotting证明表达的CP21融合蛋白能与抗C.parvum多克隆抗体产生特异性反应。免疫荧光结果表明:CP21基因在子孢子和卵囊期均表达,且表达产物位于子孢子表膜和卵囊壁表面。CP21是一种与侵入机制有关的黏附相关蛋白。研究结果为微小隐孢子虫的免疫学诊断及疫苗研制奠定了基础。 相似文献
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汤旺河是我国冷水性鱼类栖息繁衍的主要水域之一,现有20多种鱼类,该水域的特产鱼类——哲罗,是最近国内外兴起的游钓渔业的主要品种。1990年夏季,一林业工人在汤旺河干流五营辖区水域捕到一条重达30.5公斤的哲罗。 相似文献
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六个鲫鱼品系线粒体Cytb基因PCR-RFLP分析 总被引:3,自引:1,他引:3
从6个鲫鱼品系肝组织中提取总DNA,采用特异引物扩增细胞色素b基因。利用5种限制性内切酶(HinfI,HaeIII,MspI,TaqI,HindIII)对细胞色素b基因进行单酶切,结果显示HinfI和MspI2种酶在品系间存在限制性片段长度多态性,同时在红鲫、金鲫这2个品系内也存在限制性片段长度多态性,在6个品系的120个个体中,共检测到4种组合单倍型。经数据统计分析,这6个鲫鱼品系的细胞色素b基因大小基本在1260bp左右,根据限制性片段长度共享度,分别计算出4种单倍型和6个品系的群体遗传距离,并进行聚类分析,结果表明野鲫和黑龙睛的遗传距离为0,高背鲫与彭泽鲫的为0,野鲫与红鲫为0 00039,其次是金鲫,然后是高背鲫、彭泽鲫。 相似文献
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通过对河南三门峡居住区绿地的实地调研,对三门峡居住区绿地绿化现状进行调查分析,总结出三门峡市居住区绿地园林植物常用的种类、应用特点和存在的问题,并针对园林植物应用存在的问题提出建议。 相似文献
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以沙棘籽为材料,利用有机溶剂法,研究了乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间等单因素对沙棘籽总黄酮提取率的影响,再以D-100、D-500、D-700 3种大孔吸附树脂为材料,筛选适宜于黄酮纯化的树脂类型,并利用正交试验优化了沙棘籽中总黄酮的提取及纯化工艺.结果表明:提取最佳工艺参数为乙醇浓度70%,料液比1∶25(g∶mL),温度60℃,提取时间4h/次.该条件下总黄酮提取率可达4.23%;最佳纯化工艺为以6mg/mL的沙棘籽粗提液上柱,流速为2mL/min,用80%乙醇洗脱,流速1mL/min,在树脂与洗脱液的比例为1∶3的条件下洗脱时可达到最佳纯化效果,采用该工艺可使类黄酮的纯度由0.5%提高到88.46%. 相似文献
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【目的】探讨广西热带、亚热带花生种植区适合施肥技术。【方法】设置不施肥、施化肥、化肥配施鸡粪、化肥配施猪粪、化肥配施牛粪5个处理,研究化肥基施和追施条件下对不同品种花生的生长、养分吸收及产量、品质的影响。【结果】粪肥的施用促进了磷钾养分向果实转化;追施化肥会让花生徒长,最终增产不明显或导致减产。在基施和追施化肥前提下,配施鸡粪能促进花生前期生长并显著提高花生生物鲜重,其效果最好,但配施牛粪的花生产量、品质综合表现最佳。桂花771的花生干荚果和干仁产量稍低于桂花30,但出仁率、脂肪含量更高,两者理论产油量相当。【结论】广西花生生产中施肥应全部用作基肥。 相似文献
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