胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗免疫仔猪前后差异表达基因的鉴定与分析

为获得胸膜肺炎放线杆菌(APP)菌影诱导的仔猪淋巴细胞差异表达基因,本研究应用代表性差异分析技术构建APP菌影免疫前后正、反两个外周血淋巴细胞cDNA差减文库,并对文库中的差异基因进行克隆、测序和生物信息学分析.试验结果表明,正向文库中获得11个表达丰度上调的基因,其中7个基因与已知基因具有相似性,4个为未知新基因,经进一步功能注解发现,正向文库功能基因包括免疫信号传导相关蛋白RhoE、防御相关蛋白糖基转移样酶-1、上皮膜蛋白2、白介素-17和肿瘤免疫相关的周期素依赖性蛋白激酶抑制因子3等,这些功能基因表达丰度升高,可能有助于机体建立抗APP的免疫应答.     

猪营养代谢病综合防治(二)

(接上期) 4.1.1 病因 4.1.1.1 原发性缺乏日粮中维生素A原或维生素A含量不足.如含维生素A原的青绿饲料供应不足,或长期饲喂含维生素A原极少的饲料,如棉籽饼、亚麻籽饼、甜菜渣、萝卜等:饲料加工贮存不当,使饲料中的维生素A被氧化破坏;     

黄瓜CsDREB1的克隆及其在霜霉威胁迫下的表达分析

以高农药残留黄瓜品系‘D9320’和低农药残留黄瓜品系‘D0351’为试材,采用PCR技术克隆获得响应霜霉威(propamocarb)的黄瓜CsDREB1基因的全长,并对其进行生物信息学分析及表达分析,以期为低农残黄瓜品种的选育提供参考依据。结果表明:黄瓜CsDREB1基因全长603bp,与同属葫芦科的甜瓜CmDREB1D为同一个进化小分支,亲缘关系最近。启动子序列分析结果表明,CsDREB1的启动子区域含有5UTR Py-rich stretch高转录水平调节、O2-site蛋白代谢调节和CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件等。实时荧光定量PCR结果表明在农药霜霉威胁迫下,低农残品系‘D0351’中CsDREB1的表达量显著下降;而在高农残品系‘D9320’中的CsDREB1的表达量与对照无显著差异。组织特异性表达分析表明,CsDREB1主要在果实表达;CsDREB1编码的蛋白质定位于细胞核上,属于核蛋白。黄瓜CsDREB1负响应霜霉威胁迫,过表达CsDREB1转基因拟南芥植株抵抗霜霉威胁迫能力明显下降。CsDREB1不能响应ABA、干旱和高盐类非生物胁迫及多主棒孢霉菌生物胁迫,能够响应JA胁迫。     

猪营养代谢病综合防治(六)

(接上期) 5.6 铜缺乏 5.6.1 有机铜的作用机理有机铜可改进铜的利用率,50mg/kg的铜的促生长作用优于240mg/kg硫酸铜.螯合物矿物质外面形成氨基酸保护膜,其不受外界因素的影响,形态与体内的天然形态基本相似,且其吸收速度快,沉积量大,生物利用率高.     

猪营养代谢病综合防治(四)

(接上期) 5.1.2.3 成年猪硒缺乏症其临床症状与仔猪硒缺乏症相似,但其病情较缓和,呈慢性经过,其治愈率也较高.患病母猪大多出现繁殖障碍,表现为屡配不上,早产、流产、死胎,产弱仔等.     

猪营养代谢病综合防治(一)

1 引发营养代谢疾病的主要原因 营养代谢病是营养紊乱与代谢失调的总称. 营养性疾病多由三种原因引起:大部分情况下由某些营养物质供应量不足所引发:第二种情况为某些营养物质供应过量而干扰了另一些营养物质的消化、吸收与利用:第三种情况是营养过剩引起的代谢疾病,如肥胖、动脉粥样硬化、部分糖尿病等.     

猪常见中毒疾病诊治(五)

1.10.3治疗发现猪食酒糟中毒后,应立即停喂酒糟,并用1%小苏打水灌肠,同时灌服30～50g泻剂硫酸钠溶液。中毒严重的病猪用25%葡萄糖60mL配合10%氢化钙10mL静脉注射,同时辅以抗生素,以防继发感染。兴奋不安的猪可用药物镇静。     

浅谈红景天的研究方向

红景天（RhodiolaL）是为景天科,属多年生草本或亚灌木野生植物。红景天具有很高的经济价值和药用价值,在我国的资源丰富,发展前景十分广阔,已经进行了大量的药理作用研究,其作为保健品上市的较多,尚需进一步开发。     

胸膜肺炎放线杆菌血清8型自转运黏附素基因的克隆测序及功能预测分析

为研究胸膜肺炎放线杆菌(APP)三聚体自转运黏附素(TAAs)的功能,以GenBank登录的APP血清5b型自转运黏附素基因5'端的3875bp序列设计引物,通过PCR的方法首次获得APP血清8型运黏附素N端的基因序列片段,测序结果与已知血清型的基因序列和氨基酸推导序列分别进行比对,结果表明与血清7型自转运黏附素N端同源性达到93%,氨基酸推导序列同源性达到97%;与血清5b型自转运黏附素N端同源性达到92%,氨基酸推导序列同源达到100%.经软件分析获得的序列含有与细菌的黏附、聚集和侵入密切相关的Hep_Hag基序,应用马克斯-普朗克研究所的在线分析TAAs的基序和蛋白域的软件daTAA,进行预测并证明所得序列为TAAs,并且具有完整的N段头部序列,有重要功能区具有良好的抗原性.比对的结果为寻找研究APP的定植基序和毒力因素提供了重要基础.     

鹿血双抗体夹心间接ELISA检测方法的建立

通过制备兔抗鹿血和小鼠抗鹿血多克隆抗体,建立了以兔抗为包被抗体,鼠抗为检测抗体的鹿血双抗体夹心间接ELISA检测方法。采用方阵滴定法确定了抗原、抗体的最佳反应浓度,并对ELISA各反应条件进行优化。结果表明:兔抗最佳包被浓度为1∶8 000,鼠抗的最佳反应浓度为1∶2 000,最佳封闭时间为60 min。该方法对鹿血检测灵敏,可达3×10-4倍稀释度,且对马血、牛血、羊血、猪血的检测结果均为阴性,说明该方法特异性良好。