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猪细小病毒VLPs供外源蛋白插入的候选位点发现及其重组PCV2-ORF2的病毒样颗粒构建 总被引:2,自引:0,他引:2
先将猪细小病毒(PPV)SC-1株VP2基因扩增产物克隆到pMD18-T载体构建质粒pMD-VP2;设计两对引物(分别引入Hind Ⅲ和Sac Ⅰ两个酶切位点)扩增猪圆环病毒二型(PCV2)SC株ORF2基因,构建了pMD-ORF2.A和pMD-ORF2.B两质粒;经相应内切酶酶切后回收目的片段,插入PPV SC-1株VP2基因的Hind Ⅲ和Sac Ⅰ两个特异限制酶切位点处(分别对应于PPV VP2蛋白N端和C端1/3处),得到重组质粒pPVP2-ORF2.A和pPVP2-ORF2.B.经鉴定后的质粒pPVP2-ORF2.A和pPVP2-ORF2.B用Kpn Ⅰ、BamH Ⅰ和ApaL Ⅰ三酶切,回收含VP2和ORF2基因的目的片段克隆至真核表达载体(pEGFP-C1),得到重组质粒pEGFP.VO.A和pEGFP.VO.B.脂质体法转染重组质粒于Cos7细胞后,采用荧光显微镜和电镜观察基因表达情况,结果仅在转染pEGFP.VO.A的样品中观察到了病毒样颗粒(VLPs).纯化VLPs免疫小鼠,结果显不能产生较好的细胞免疫和针对PPV和PCV2的特异性体液免疫,该结果表明研究中获得了PCV VP1-PCV2ORF2重组VLPs,同时也揭示PPV VPLs的N端1/3适于外源蛋白插入构建重组VLPs 相似文献
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53.
种好青饲料
青饲料选择产量高、营养价值高、适合猪食用的青饲料品种.并且多品种搭配,使各种青饲料的营养互补,同时也有利于青贮时达到最佳效果。种植的品种有俄菜、串叶松香草、紫花苜蓿、白三叶草、牛皮菜等品种。这些品种混播1亩,可满足40头猪全年青饲料的需要.可替代50%-60%的精饲料。 相似文献
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枣树幼树整形修剪技术赵玲爱(渭南地区林科所,陕西渭南714000)对枣树进行整形和修剪能培养良好的树体骨架,提高枣的产量和品质。对生长状况不同的幼树可采取不同的修剪办法。修剪在冬季和夏季各进行一次。冬剪:对单枝延伸强(抽生枣头长达10cm)的幼树采取... 相似文献
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茶花是人们喜爱的南方花卉之一,它具有很好的观赏价值和经济价值。但由于观赏类茶花很少结籽,所以应采用无性繁殖的方法进行繁殖。无性繁殖中以短枝扦插最为适宜,成活率可达95%以上。具体操作方法如下:一、枝条选择与处理1、枝条选择:选择枝条必须恰当,过老过嫩都不合适。枝条过老,生活力过弱;过嫩,生理机能尚未发育成熟,不宜生根。最适宜的枝条是刚刚木质化,表皮呈黄腊色的半年生健壮枝条。2、枝条的处理:将采回的枝条剪成3.5~5.0cm长,顶部留一片叶,其余的叶片均剪掉。然后将剪好的插穗扎成小捆,基部对齐,浸泡在浓度为200ppm的萘乙酸溶液… 相似文献
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1、播前准备①做床:在温室内做好播种床,宽度以1.2m为宜,长度视温室宽度而定。为充分提高床土温度,降低燃料成本,提高种子发芽率,也可采用做高床或使用电加温线。②床土配置及消毒床土一般可选择富含营养、无侵染病虫害的田园土。配置时,先将田园土、充分腐熟的马粪和炉灰过筛, 相似文献
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