9株绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113基因克隆及蛋白序列分析

[目的]克隆绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113基因,比对、分析不同菌株P113蛋白序列,为研究绵羊肺炎支原体P113蛋白的生物学功能提供参考。[方法]设计绵羊肺炎支原体P113基因特异性引物,采用PCR方法扩增9株绵羊肺炎支原体内蒙古分离株的P113基因片段;对获得的9株绵羊肺炎支原体P113基因片段进行测序分析,将DNA序列翻译为氨基酸序列,对不同菌株的P113氨基酸序列进行比对。[结果]不同分离株P113基因片段扩增产物大小不同。氨基酸序列分析显示,C末端序列重复区域长度存在差异,以KKAEGA（S）QNQG为主要重复序列单元。不同菌株重复序列单元数量不同,NM01-MO株和CK-MO株的重复序列单元数量最多,为16个;LK-MO株重复序列单元数量最少,为3个;多数菌株之间重复序列单元数量差异较大。[结论]绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113氨基酸序列的C末端重复序列单元数量不同,这些不同数量的重复序列影响P113蛋白结构,进而可能影响其生物学功能。     

奶山羊羔羊山羊痘的病理学、血清学及分子生物学诊断

目的 确定内蒙古某规模化奶山羊养殖场部分引进羔羊发病死亡的原因,为该场加强重点疫病免疫防控提供科学依据。方法 对出现典型临床症状的发病羊只进行病理解剖学观察,无菌采集肺脏病变样本,制备病理组织切片;无菌采集发病羊只的血液制备血清,采用高敏荧光技术检测血清中的山羊痘病毒抗体;无菌采集发病羊只的肺组织、鼻拭子、眼拭子,利用PCR技术检测山羊痘病毒P32基因,对测序获得的序列进行BLAST比对并进行同源性分析。结果 剖检可见病羊口腔、鼻腔、喉头、气管黏膜有圆形疹痘;肺部明显水肿,表面存在红色疹痘,切开后呈不透明、灰白色胶冻样;瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃黏膜均出现疹痘。病理组织学检查可见肺泡红色深染,间质变宽,腔内存在脱落的上皮细胞,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,并化生为腺泡样状;支气管腔内存在大量的炎性细胞。发病山羊血清经高敏荧光技术检测,判定为山羊痘病毒抗体阳性。采集肺组织（GTPV-YP1）、鼻拭子（GTPV-YP2）、眼拭子（GTPV-YP3）样品各1份,3份样品经P32基因PCR检测均获得983 bp的扩增片段,与预期大小一致;GTPV-YP1、GTPV-YP2样品P32基因序列与山羊痘病毒中国分离株KC951854.1、Oman分离株 MN072621.1 P32基因的同源性为100%,GTPV-YP3与山羊痘病毒中国分离株EF514892.1、HM572329.1、JN596275.1、MG817382.1的同源性为99.0%。结论 经病理解剖学观察、病理组织学检查、血清学检测以及病原PCR鉴定,确定引起该场引进奶山羊羔羊发病的原因为山羊痘病毒感染。     

猪流行性腹泻病毒S2基因B细胞表位的筛选及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的 应用生物学软件与单克隆抗体技术相结合的方法鉴定PEDV S2基因B细胞表位肽。方法 利用CLC Sequence viewer 6.8软件及在线数据库IEDB筛选出PEDV S2基因B细胞表位,并人工合成表位肽。将表位肽与钥孔血蓝蛋白（KLH）耦联后作为抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,通过ELISA法筛选出抗体效价较高的小鼠进行1次加强免疫,3 d后取脾脏制备脾细胞悬液进行细胞融合。经HAT选择培养基培养筛选有效杂交瘤细胞,采用ELISA法筛选阳性克隆继续进行扩大培养。将部分阳性杂交瘤细胞进行小鼠腹腔注射,并收集腹水。通过ELISA方法分别检测小鼠腹水和单克隆细胞株培养上清液抗体效价,确定最高效价作为后备细胞株。结果 筛选出B细胞表位肽序列为:MQYVYTPTYYML;免疫多肽抗原后融合前血清抗体效价达到1:2 000;BALB/c小鼠腹水及单克隆细胞株培养物上清液ELISA检测结果显示抗体效价达到1:4 000。结论 筛选出了PEDV S2基因B细胞表位,为PEDV表位肽疫苗载体构建研究提供参考。     

毛竹种源地理变异规律及选择的研究

1995年春收集全国毛竹分区8省16个毛竹种源的母竹，在福建建瓯和华安县营造种源试验林，经过5年观测不同种源发笋成竹，春笋营养成份和叶生理生化等70多项性状，应用数量遗传学原理和方法，分析毛竹种源各种遗传参数，结果发现毛竹种源存在明显的地理变异趋势，南部种源发笋量较大，而北部种源的新竹胸径、竹高较大。通过多性状综合评价分析，初步选择出福建武夷山、建瓯、沙县、江西上饶4个优良种源，遗传增益显著。     

茶秆竹林叶面积指数与生物量关系的研究

为探索茶秆竹叶面积指数与生物量的关系，本文应用多种数学模型对茶秆竹林叶面积指数与年龄、胸径、立竹密度、留枝盘数等因子的相关性进行回归分析，结果表明，叶面积指数与生物量紧密相关，当叶面积指数为7．47时，茶秆竹生物量最大。本文同时建立了叶面积指数与胸径、立竹密度的关系表，以为生产提供一定的参考依据。     

茶秆竹生物量模型研究

在标准地调查的基础上，应用多种数学模型对茶秆竹各器官生物量进行相关性分析，建立了茶秆竹各器官间的咽归模型。可用于一定立地条件下的茶秆竹的生物量估测。     

矮牵牛快速繁殖技术

矮牵牛快速繁殖技术温春秀，及华，高延厅，冯长红（河北省林业科学研究所０５００６１）矮牵牛（ＰｅｔｕｎｉａｈｙｂｒｉｄａＶｉｌｍ），又名碧冬茄，属茄科，矮牵牛属。多年生草本花卉，植株有的直立，有的下垂，呈吊篮式；花型似牵牛花，漏斗状；花色繁多，有红、白...     

细柄阿丁枫人工混交林生长过程的研究

对华口16年生和二重山35年生细柄阿丁枫人工混交状态下生长过程的研究表明:由于树种组成、林分密度和树龄不同,两地细柄阿丁枫的生长过程有差异,但均表现出生长潜力大的特点。二重山由于长期受林分密度过大的影响,林木营养空间不足,长的细高,高径比失调,其胸径和材积连年、平均生长量小于华口,华口细柄阿丁枫早期速生特征明显。华口16年生和二重山35年生的细柄阿丁枫材积连年生长量与平均生长量尚未相交,说明具有培育大径材的潜力。     

人工-天然杉阔混交林种群生态位及竞争研究

对人工 -天然杉阔混交林中 4个主要种群进行生态位研究 ,定量测定混交林中主要种群生态位宽度、生态位相似比例、生态位重叠 ,并分析了各种群生态位的生态学意义 ;同时采用Lotka_Volterra竞争方程研究混交林中主要种群。结果表明 :通过定量的生态位分析 ,结果与自然规律相符合。平衡时 ,杉木和米槠相对优势度分别为87 4 5 %和 12 5 5 % ,即人工 -天然杉阔混交林仍将由杉木、米槠两种种群共优组成 ,杉木种群支配整个群落。     

杨树抗溃疡病选择育种研究

在辽宁７个县（市）小钻杨天然杂种后代的杨树林分中，溃疡病病率６０％以上的林分内，采取３株大树法优选出１０株优树，经离体、活体接种、诱发鉴定、自然感病及生长表现的评比测定，选择出辽选抗５号、辽选抗病１１号病个抗水泡型溃疡新无性系，接种测定在０－１４．８％之间，自然感病率５．６－１９．６％，对照北京杨为７５－１００％，９年生单村积分别超小美早、鞍杂杨、彰武小钻杨０－２６％，可在辽宁省北部地区栽植。