水牛唾液蛋白胃蛋白酶解产物中总阿片样生物活性的测定

研究唾液中的生物活性物质是受人注目的领域。许多研究表明 ,唾液中除含有多种激素和细胞因子外 ,还含有丰富的蛋白质。这些蛋白质(特别是粘蛋白)含有脯氨酸富集片段 ,这些片断抵抗蛋白酶的水解。因而推测 ,唾液进入消化道后有可能解放一些活性肽段。本试验旨在探讨唾液蛋白经胃蛋白酶水解是否有阿片样活性物质产生。自5头体重(450±50kg)公水牛口腔采集混合唾液 ,测定蛋白含量。加入胃蛋白酶 ,在 pH1.4 ,39℃孵育2小时后 ,将酶灭活。以孵育前将酶灭活作对照。调 pH7.2,8500×g离心30分钟。取上清液和1640培养液各5ml与生长旺盛的NG108 -15细胞一起在37℃孵育15分钟。收集细胞 ,提取细胞内cAMP,放免测定cAMP的含量。发现NG108 -15细胞膜上有丰富的阿片受体 ,受体激活后可引起细胞内cAMP减少 ,这种作用可被特异性的阿片受体阻断剂纳洛酮(Nal)反转。因此 ,本试验对照组与试验组分别作加Nal和不加Nal2种处理 ,以细胞cAMP与胞浆蛋白比值变化判定酶解液是否具有阿片样生物活性。试验结果表明 ,试验组细胞cAMP含量 :不加Nal显著低于加Nal(20.103±2.473)ng/mg蛋白质vs(25.850±2.461)ng/mg 蛋白质(P<0.01) ;对照组不加Nal差异不显著(27.177±3.738)ng/mg 蛋白质vs(27.337±3.461)ng/mg 蛋白质(P>0.05)。结果表     

二花脸猪与大白猪肝脏生长激素受体基因表达的发育性变化

 选刚出生的雄性纯种二花脸猪和雄性纯种大白猪各 2 8头 ,前者按中国地方猪种饲养标准饲养 ,后者按美国NRC标准饲养。测定不同发育阶段平均日增重 (BWG) ,并分别于 0、3、2 0、30、90、12 0、180日龄宰杀取样 ,用相对定量RT PCR方法 ,以 18SrRNA作内标 ,测肝脏生长激素受体 (GHR)mRNA丰度。结果发现 ,(1)从出生到 180日龄大白猪体重和BWG均显著高于二花脸猪。 (2 )大白猪和二花脸猪肝脏GHR基因表达发育性变化趋势相同 ,肝脏中GHR基因表达在出生时较低 ,随后表达逐渐增加 ,12 0日龄时达峰值 ,随后维持在较高水平 ,其发育性变化与BWG显著相关 (二花脸猪R =0 .6 8,P <0 .0 1,大白猪R =0 .96 ,P <0 .0 1)。双因子分析表明 ,大白猪肝脏GHR的表达极显著高于二花脸猪 (P <0 .0 1) ,其中从初生到 30日龄品种间差异不明显 ,在 90日龄到 180日龄大白猪肝脏GHR表达明显高于二花脸猪。提示 ,肝脏中GHR基因表达具有显著的年龄依赖性和明显的品种特征 ,肝脏中GHR基因表达对动物的生长有重要影响。     

外源性半胱胺对山羊门静脉和肝脏中激素和营养物流量的影响

采用6只体重(18.97±1.80)kg、健康雄性去势山羊,同时安装颈静脉、门静脉、肝静脉、肠系膜静脉以及股动脉慢性血管瘘。采用自身对照试验,研究半胱胺对山羊血流量、激素流量和碳氮化合物吸收及在肝脏代谢的影响。试验结果显示,从颈静脉一次注入半胱胺(50 mg/kg BW)后,3 d门静脉、肝静脉全血流量分别比对照(-2d)提高21.81%(P<0.01)、10.21%(P<0.05);血浆流量相应提高23.08%(P<0.05)、15.05%(P<0.05);6 d与-2 d血液流量接近。在-2 d、3 d、6 d 3个采样日,肝脏IGF-1净生成量相应为47.57,67.58(P<0.05)和44.76μg/min;肝脏胰岛素净利用量相应为2.32,3.17和2.23 mU/min,无显著差异;胰高血糖素肝脏净利用量分别为1.71,3.25(P<0.05)和1.02 ng/min。结果表明,从颈静脉注入半胱胺后,肝脏有净乙酸和葡萄糖生成,分别较对照提高12.71%和50.59%(P<0.05);3 d6、d比-2 d在门静脉的NEFA净流量分别提高32.25%和9.67%;肝脏NEFA净流量在试验期3 d和6 d分别比对照提高4.57倍(P<0.01)和4.14倍(P<0.01),表明经CS处理后,山羊肝脏有NEFA合成。门静脉α-氨基氮、NH3-N净流量在第3天分别高于对照36.36%和27.23%,尿素氮净流量也有增高趋势,但差异均未达到显著水平。