甘露寡糖脂质体纳米制剂对鸡白痢的预防试验

通过试验观察甘露寡糖脂质体纳米制剂对鸡白痢病的预防作用,评价甘露寡糖脂质体纳米制剂的临床应用效果,重点在研究其作为抗生素替代品在畜禽业应用的可行性。     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

马尾藻多糖对鸡脾脏淋巴细胞GSH和GSSG水平的影响

为观察马尾藻多糖(SP)对鸡脾脏淋巴细胞内氧化还原状态的影响,无菌分离鸡脾脏淋巴细胞,采用终浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的马尾藻多糖分别刺激培养鸡脾脏淋巴细胞4、8、12、24h,测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平。结果表明,各浓度SP与鸡脾脏淋巴细胞共同培养4、8、12h均能不同程度地升高细胞内GSH水平,降低鸡脾脏淋巴细胞内GSSG水平,升高鸡脾脏淋巴细胞内GSH/GSSG比值,与空白对照组相比差异显著或极显著(P0.05或P0.01)。说明SP可以通过调节鸡脾脏淋巴细胞内GSH和GSSG的水平来调节细胞内的氧化还原状态,从而发挥其抗氧化作用。     

西番莲多糖提取物对猪圆环病毒2型感染RAW264.7细胞氧化应激的影响

为研究西番莲多糖提取物（Passiflora edulis polysaccharide extract，PEPE）对猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）感染RAW264.7细胞氧化应激相关因子的影响，本试验探讨了PEPE对氧化应激的调节作用。在96孔细胞培养板中每孔加入100 μL浓度为1×10⁶个/mL的RAW264.7细胞，分别设细胞对照组、PEPE组（25、50、100、200、400、800和1 600 μg/mL），分别于培养箱培养24和48 h，用MTT法检测细胞活性，筛选PEPE的药物安全浓度范围。试验分为以下6个组：细胞对照组、病毒组、PEPE高（400 μg/mL）、中（200 μg/mL）、低（100 μg/mL）剂量组及维生素C组，其中细胞对照组加入含10% FBS的DMEM培养液，其余组加入PCV2病毒液，孵育2 h后在PEPE组加入对应浓度的PEPE溶液，VC组加入配制好的VC溶液，细胞对照组和病毒组加入含10% FBS的DMEM培养液，培养48 h，同样用MTT法检测细胞活性，以研究PEPE对PCV2感染RAW264.7细胞活性的影响。按照上述6个试验组分组，处理同上，将细胞培养12 h，收集样品用于检测氧化应激相关因子水平。用Griess法和DCFH-DA荧光探针分别检测RAW264.7细胞上清中NO含量和细胞内活性氧（ROS）水平、OPT荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量，化学发光法检测细胞内黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力。结果显示，PEPE对RAW264.7细胞的安全浓度范围为25~400 μg/mL。PCV2感染RAW264.7细胞后，细胞活性显著降低（P<0.05），而不同浓度PEPE处理组均能提高细胞活性。RAW264.7细胞被PCV2感染后，细胞分泌NO、ROS水平，GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性显著升高（P<0.05），感染细胞GSH含量显著降低（P<0.05）；PEPE作用于PCV2感染的RAW264.7细胞，显著降低感染细胞NO、ROS水平、GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性（P<0.05），100 μg/mL PEPE处理组细胞GSH水平显著升高（P<0.05）。本试验结果表明，PEPE能提高PCV2感染RAW264.7细胞的抗氧化能力，有利于缓解病毒感染所致氧化应激。     

多糖与畜禽疾病防治及保健

为了对近年来多糖研究有进一步地认识，本结合多糖自身的理化性质，从动物机体在细胞免疫、体液免疫、细胞因子生成等免疫学方面，以及在抗肿瘤、抗感染等临床应用方面，对多种多糖的不同的生理活性作用作了总结，从而看出，多糖作为安全、绿色免疫增强剂将有着广泛的研究和应用价值。     

水牛梭形住肉孢子虫抗原的薄层等电聚焦行为分析

应用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳（ＩＦＥ）对水牛梭形住肉孢子虫（Ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ）抗原进行了分析。结果表明，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００纯化的包囊抗原在电泳图谱上显示３条相距较近的带，等电点分别为６．３０，６．４５，６．６５；缓殖子纯化抗原仅出现１条带，等电点为６．４０     

柴茵护肝合剂保护南美白对虾肝胰腺的临床应用研究

本试验旨在观察柴茵护肝合剂在临床推荐剂量下对南美白对虾肝胰腺的保护效果,进一步评价其安全性.将6000只健康南美白对虾随机分为3组,每组2000只,分别为空白对照组、阳性药物(柴黄益肝散)对照组和柴茵护肝合剂推荐剂量给药组.在试验35天时对南美白对虾生长性能、血液生化指标、肝胰腺相关酶活性进行测定分析,并观察肝胰腺病理...     

用ZY-C法检测96例健康牛、羊、猪外周血B淋巴细胞值

为了解家畜在正常情况下体液免疫的功能状态,监测动物免疫应答和各种疾病的动态关系,以便防治各种与免疫有关的疾病,我们应用ZY-C法对96例健康牛、羊、猪外周血液B淋巴细胞进行了检测,现报告如下     

天门冬多糖对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响

试验旨在研究不同浓度的天门冬多糖(ASP),在ConA或LPS的协同刺激下对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响。猪脾淋巴细胞体外培养体系中加入不同浓度的天门冬多糖使其终浓度为400、200、100、50、25、12.5μg/ml,在ConA(5μg/ml)或者LPS(10μg/ml)的协同刺激作用下,细胞培养24、48、72 h时,观察猪脾淋巴细胞增殖情况。结果表明,天门冬多糖及其协同ConA或LPS能显著或极显著的促进猪脾淋巴细胞体外增殖(P<0.05或P<0.01)。