应用Y—DNA特异片段的PCR技术鉴定牛和绵羊胚胎性别及应用研究

本研究采用国际八十年代中后期研究成功的特定ＤＮＡ片段扩增技术—聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，进行牛和绵羊胚胎性别鉴定。采用删除富集法，构建富含牛和绵羊Ｙ—ＤＮＡ文库，筛选出特异克隆，并根据其序列，分别设计合成引物，用ＰＣＲ技术分别扩增牛Ｙ染色体上约１４０ｂｐ的片段，绵羊Ｙ染色体上约１３０ｂｐ的片段。对已知性别的牛和绵羊血液样品进行检测，准确率均为１００％（１０／１０；１１／１１）。应用已建立的简易、快速胚胎取样方法及防污染措施，以及设计合成的引物和ＰＣＲ检测胚胎性别的技术方法，奶牛胚胎经性别鉴定后移植，产犊牛７头（４头公犊，３头母犊），准确率为１００％（７／７）。在内蒙牧区生产现场，对绵羊胚胎经性别鉴定后移植，共移植成功１８只受体母羊（每只母羊移植２－４枚同性别胚胎），产羔２５只（８只公羔，１７只母羔），准确率为８０％（２０／２５）。     

“Y—DNA特异片段的PCR技术鉴定牛和绵羊胚胎性别及生产应用”课题成果通过鉴定

中国农业科学院畜牧研究所繁殖室与农业部动物检疫所生物技术室合作,经过3年研究,已完成“应用 Y—DNA 特异片段的PCR 技术鉴定牛和绵羊胚胎性别及生产应用”课题。经农业部核准并委托北京农业大学主持,于1992年7月22日,通过了成果鉴定。该研究应用删除富集法构建富含牛和绵羊 Y—DNA 文库。筛选出特异克隆,并根据其序列,设计和合成引物。在实验室,用已建立的 PCR 检测技术,分别对已知性别的11只绵羊和10头牛的血样进行了检测,检测结果与实际性别完全一致。在生产现场,建立了简易、可行胚胎细胞取样技术和防止污染的措施。经性别鉴定的奶牛胚胎,移植     

高活性保滤泡素的研制及其应用试验

<正> 一、前言 超数排卵是家畜胚胎移植的基础技术,采用外源促性腺激素诱导母畜超数排卵已广泛在家畜胚胎移植技术上应用。由于母畜个体的差异及激素质量的影响,使超排效果稳定性较差。因此,超排效果已在一定程度上限制了胚胎移植技术在生产上的广泛应用。 影响超排效果的主要因素之一是FSH中的LH/FSH比值高低。目前,商品FSH含有FSH和LH两种激素的生物活性,而且不同厂家或同一厂家的不同     

KF-1型牛胚胎移植器的研制及移植

我国自1975年开展牛胚胎移植技术的研究以来,虽已先后获得新鲜胚胎及冷冻胚胎移植成功,但移植成功事均偏低。据1985年全国牛胚胎移植试验材料统计,新鲜胚胎移植成功率平均为23.8%(32/160),冷冻胚胎的移植成功率平均仅为9.6%(5/52)。移植成功率低的主要原因之一,是我国还没有定型的配套牛胚胎移植器械,非手术移植胚胎时,很难将胚胎放置在子宫最适部位,并易造成胚胎丢失和子宫环境的感染。因而,移植后可能造成部份胚胎的早期死亡。     

简易胚胎冷冻器的应用试验

根据液氮罐内汽相区存在的温度梯度,可逐渐达到降温的原理而研制成功的简易冷冻器,已在全国17个省、市、自治区推广应用。采用该仪器及与其配套的胚胎冷冻—解冻技术方法,对小鼠、绵羊、奶牛、黄牛胚胎进行冷冻试验,取得小鼠冷冻胚胎解冻后培养成活率率为90.7％,孵化膨胀率为77.2％;绵羊和奶牛冷冻胚胎解冻后,形态恢复正常的胚胎比例分别为76.2％和69.4％,移植成功率分别为50％和30％。     

奶牛性控胶囊与性别控制效果试验研究

试验对性控胶囊的成分进行了测定，证实为中（草）药提取物，内含黄酮类化合物78．83％及黄酮类同分异构体化合物，每克药物含镉2．3mg。溶液pH值2．48-2．49（2mL稀释）和pH值3．5（4mL稀释）；渗透压为540—663mmol／L之间（4mL稀释），使用后经组织切片标本观察未见对子宫粘膜产生损害，情期受胎率正常。通过B超性别鉴定，雌性比为70％-71．4％，平均为70．7％。超排后以LAMP法对胚胎作性别鉴定，雌性比为67％～71．4％，平均为69．2％。对345头已产犊牛性别确认统计，母犊率为73．33％（253／345）。     

奶牛胚胎生物工程技术

性控体外受精胚胎技术是指利用奶牛胚胎生物工程在现代奶牛生殖生理和遗传繁育理论的基础上,以精子细胞、卵母细胞和受精卵为主要研究对象的遗传操作技术,主要包括超数排卵、胚胎移植、胚胎冷冻、胚胎性别鉴定和控制、体外受精、胚胎核移植和胚胎干细胞系建立等多种技术,除胚胎核移植和胚胎干细胎系的建立二项技术还处于实验室试验研究之外,其他均已达到奶牛生产的实际应用阶段。奶牛胚胎移植技术在国内外已达到大规模应用及商业化阶段,奶牛胚胎移植技术的应用,可使每头良种奶牛的繁育速度比自然繁殖提高7~10倍左右。近两年,我国每年移植国…     

牛胚胎性别鉴定技术的研究与应用前景

本文综述了牛胚胎性别鉴定技术的研究，并对哺乳动物性别决定基因研究与性别控制中Ｘ，Ｙ精子分离方法的研究作了介绍，还对今后应用提出了意见。