靶向食蟹猴NTCP基因的CRISPR/Cas9系统gRNA筛选

本研究旨在通过CRISPR/Cas9体外酶切法及细胞水平上的PCR扩增测序筛选出靶向食蟹猴NTCP基因具有高敲除活性的gRNA。首先通过比对食蟹猴与人类NTCP氨基酸序列,选择差异位点,即第84-87位和第157-165位氨基酸作为基因靶点序列区;利用gRNA软件设计针对上述基因靶点序列的gRNA,每个靶点设计3~4条候选gRNA序列;然后利用gRNA体外检测试剂盒,筛选出靶向NTCP基因的体外敲除活性较高的两条gRNA序列：gRNA1.2和gRNA2.1。将gRNA1.2和gRNA2.1分别插入pLV hUbC-Cas9-T2A-GFP载体中,转染食蟹猴原代肝细胞。提取转染后细胞基因组DNA,通过PCR扩增NTCP基因并将其克隆到T载体中进行测序分析。结果表明,gRNA1.2和gRNA2.1均可使NTCP基因产生移码突变,但gRNA2.1比gRNA1.2具有更高的敲除活性。本研究为下一步编辑食蟹猴NTCP基因及研究其在乙型肝炎病毒（HBV）感染中的功能奠定了基础。     

乳酸环丙沙星温度敏感型原位凝胶的制备及其体外释药评价

以泊洛沙姆407(P407)和泊洛沙姆188(P188)为温敏材料,采用冷溶法制备乳酸环丙沙星(CPFL)温度敏感型原位凝胶,用试管倒转法考察泊洛沙姆溶液的胶凝温度,用紫外分光光度法测定释放介质中的药物含量,经无膜溶出法考察原位凝胶体外释药特性,以胶凝温度和缓释时间为指标筛选组合物。结果显示:最佳组合为0.024 g.mL-1P407+0.02 g.mL-1P188+0.08 g.mL-1 CPFL+0.000 3 g.mL-1 EDTA-2Na+0.001 5 g.mL-1 NaHSO3+0.000 1 g.mL-1苯扎溴铵,对应的胶凝温度为32.5℃;该原位凝胶在室温下为流体,在体温下发生相转变形成凝胶;药物在11 h释放了84.23%,无突释现象,释药规律符合Higuchi动力学方程。结论:乳酸环丙沙星温度敏感型原位凝胶制备工艺简便,载药量高,具有良好的药物缓释作用。     

精播条件下氮肥调节对小麦生长发育及产量的影响

精播条件下追氮方式对小麦的群体发育和产量具有明显影响。冬春 2次追肥比冬季或春季 1次追肥增产 15 .7% ,叶面喷肥的效果仅为 2 .0 % ;2次追肥的以越冬期追肥 93 .75kg/hm2 +返青期追肥 93 .75kg/hm2 产量最高     

棉花品种资源枯萎病抗性的研究

加速棉花品种资源的抗病性鉴定,是当前选择杂交亲本开展抗病育种的迫切需要,也是培育抗病、丰产、优质新品种的主要物质基础。我国现保存的品种资源约3,675份,其中陆地棉3,044个,海岛棉289个,亚洲棉316个,非洲棉14个,野生棉12个。大量的品种资源过去均未作过系统的抗病性鉴定,因为缺乏快速准确的测定方法,仅依靠田间病圃进行鉴定,所以进展缓慢,数量有限。我国在开展棉花枯萎病菌生理型研究时,     

多熟制地区带距与套作玉米生长、产量分析

1996－1998年不同带距与玉米产量、群体动态指标结果分析表明：4m带距是丘陵区套作春夏玉米的高产稳产带距,夏季套栽玉米4m比中带增产9．7％,比窄带平均增产12．0％,春季套栽玉米4m比1．67m增产5．9％,迟春套栽玉米4m比1．67m减产9．99％;并建立了带距与产量的回归方程。4m带距在发挥边行优势基础上,有利于春季套栽玉米建立中行优势,迟春、夏季套栽玉米中行劣势的显著下降;促进玉米苗期叶面积指数的提高,喇叭口期叶日积达高值期,穗叶供长期（七叶展）干物质积累增长,穗五叶的生长,吐丝前形成壮苗健株,吐丝后光合势占总光合势的百分率和生物产量显著增加。     

亚硫酸氢钠影响脐橙叶片光合作用的原因

经浓度低于8mmol·L-1的NaHSO3溶液处理的脐橙叶片净光合速率(Pn)、电子传递速率ETR和叶绿体光合放O2活性升高,光合色素含量、初始荧光Fo和PS 的光化学效率Fv/Fm变化不明显;而12mmol·L-1的NaHSO3溶液处理后,Pn、光合色素含量、Fv/Fm、ETR和光合放O2活性显著下降,Fo则明显升高。与对照相比,处理组叶绿体内·O2-、H2O2的含量显著降低。结果显示,低浓度NaHSO3溶液能通过清除·O2-、H2O2等有害物质而促进光合作用。高浓度NaHSO3溶液因过量的HSO3-以及由它产生的SO2均具有漂白作用,最终导致脐橙发生光合作用的光抑制。     

蒋卫杰博士:聚焦生产一线(十) 三水露地黑皮冬瓜生产栽培技术

<正>三水是广东种植黑皮冬瓜较早、种植质量较高的地区,目前春茬种植面积约2 600hm2(3.9万亩),每667 m2收入1.5万元以上。"三水黑皮冬瓜"除长期以来形成的优良品种外,其栽培技术也有独到之处。黑皮冬瓜是广东省佛山市三水区的传统蔬菜品种,在20世纪60年代末由当时的三水县供销社引进广东东莞冬瓜与三水原产黑皮冬瓜杂交,经过几     

豫东黄泛区棉花配方施肥初探

棉花一生中对氮、磷、钾元素的吸收数量受气候、土壤栽培条件及品种产量水平的影响,大致每生产100kg皮棉需氮(N)15.5kg,磷(P2O5)6.3kg,钾(K2O)15.5kg。据中国农业科学院棉花研究所对中棉所12研究表明,苗期棉花对氮、磷、钾的吸收量分别占一生总吸收量的4.5%、3.0%～3.4%、3.7%～4.0%;蕾期分别为27.8%～30.4%、25.3%～28.7%和28.3%～31.6%;花铃期最高分别为59.8%～62.4%、64.4%～67.1%和61.6%～63.2%;吐絮期分别为2.7%～7.8%、1.1%～6.9%和1.2%～6.3%。1配方施肥公式及计算配方施肥即是根据目标产量和土壤供肥能力及土壤养分利用率,计算出…     

小麦新品种泛麦5号播期播量研究

对泛麦5号播期播量的研究表明:10月2日至11月6日,随播期推迟,苗高、叶龄、分蘖、次生根、单株鲜重都明显减少,有效穗略减少,但穗粒数和千粒重明显增加,产量三要素协调能力明显增强,产量差异不明显。在150~450万/hm2播量范围内,随播量增加,苗高、叶龄变化不大,分蘖、次生根和单株鲜重变化比较明显,有效穗明显增加,穗粒数和千粒重明显减少,但产量差异不显著,最佳播量为75~225万/hm2基本苗。不同播期的最佳播量为:10月上旬75万/hm2,10月中旬150~225万/hm2,10月下旬150~300万/hm2,11月上旬375~450万/hm2基本苗。     

三种家野杂交鸭体尺性状比较

利用最小二乘法对以绿头野鸭为父本的不同杂交组合的体尺性状进行了对比分析,结果表明:LBY鸭和LBLY鸭之间在体尺性状上无显著差异,LBY鸭与LBLJ鸭之间在与产肉率紧密相关的性状上存在(极)显著差异。公鸭主要体尺性状都较母鸭大,且与杂交组合存在互作效应。考虑潜在的皮脂率改良目标,含1/2绿头野鸭血统、1/4北京鸭血统和1/4樱桃谷鸭血统的LBLY组合杂交效果最好。