荷斯坦公牛PRNP多态性与精子活力相关性及抗病性评估

为分析荷斯坦公牛朊蛋白基因(PRNP)多态性与精子活力的关系,并对其抗病性进行评估,选育抗病公牛,本实验以公牛精液为样品,研究脚基因中12bp、23 bp和24 bp 3个片段的插入/缺失多样性、基因mRNA转录水平及其与精子活力等指标的关系.结果表明,12bp和23 bp在群体中均得到3种基因型,24 bp只有2种基因型.不同基因型群体的mRNA转录水平存在显著差异,而基因型与精液产量和活力等指标存在相关性,抗病力和精子活力指标存在负相关.本研究中3个片段的插入-缺失多样性可以作为公牛选育的辅助标记.     

精原干细胞体外培养研究进展

精原干细胞（SSCs）是指位于睾丸生精小管基膜上既能自我更新维持自身群体数量恒定,又能定向分化形成精母细胞,最终形成精子的一类原始干细胞。其体外培养以及近年来兴起的移植、基因转染的深入研究,为探讨精子的发生机制、重建不育个体的精子发生、生产转基因动物提供了新的途径。文章综述了精原干细胞体外培养的研究现状,并对其体外的纯化、鉴定,以及未来的应用进行了介绍,旨在为精原干细胞的研究提供借鉴。     

生长抑素基因疫苗pcS/SS构建及其在HeLa细胞中的表达

将 PCR扩增得到的 pc MV- S中的乙肝表面抗原 (HBs Ag) S基因亚克隆到 p UC18中 ,构建成 p U S质粒 ,再将化学合成的生长抑素 (somatostatin,SS)基因单链复性 ,融合到 S基因编码区的第 2 2 5个氨基酸位点之后 ,构建成 p US/SS质粒 ,然后将 S/ SS融合基因亚克隆到 pc DNA3.1(- )中 ,构建成 S/ SS融合表达质粒 pc S/ SS。采用脂质体包裹法将 pc S/ SS质粒转染 He L a细胞 ,用 SDS- PAGE和 EL ISA分析表明 ,S/ SS融合基因在转染后 72 h和 G4 18选择 2周后的细胞中均获得表达 ,融合蛋白具有 SS的反应原性。     

绵羊BMPR-IB基因多态性及其与中国美利奴肉用多胎品系产羔数和生长发育的相关性

以绵羊BMPRIB基因为候选基因,采用PCRRFLP方法分析湖羊、夏洛来、陶赛特、萨福克、罗米丽、中国美利奴羊以及中国美利奴肉用多胎品系共553只个体的基因单核苷酸多态性,以及BMPRIB基因多态性与产羔数和生长发育的关系。实验结果显示,BMPRIB基因在不同绵羊品种(系)中共有3种基因型(BB、B 和 ),但基因型频率分布在各品种(系)间差异极显著(P<0.01)。在湖羊中仅有BB基因型;在中国美利奴肉用多胎品系中BB、B 和 基因型频率分别为51%、30%和19%;而其他品种(系)羊中则仅有 基因型。对中国美利奴羊肉用多胎品系的研究发现:BB、B 和 基因型群体第一胎产羔数分别为2.0、1.5和1.1,三者之间差异显著(BB和B ,P<0.05;BB和 ,P<0.01);BB和B 基因型群体总体平均产羔数分别为2.8和2.3,极显著高于 基因型群体(1.2)的产羔数(P<0.01)。在90日龄时,BB和B 基因型群体的体重分别为(18.6±3.70)kg和(18.0±3.31)kg,显著高于 基因型群体((15.6±2.22)kg,P<0.05);两群体胸围、胸宽也显著大于 基因型群体(P<0.05);但这些差异在120日龄时消失。以上结果表明,BMPRIB基因是影响中国美利奴肉用多胎品系产羔数的主效基因,并在一定时期内影响羔羊的生长发育。     

基于AMEL基因的绵羊性别鉴定技术

[目的]探讨将牙釉蛋白(AMEL)基因用于绵羊性别鉴定的可行性。[方法]采用酚-氯仿法从湖羊的耳皮肤组织中提取基因组DNA。分别以公羊和母羊的DNA为模板,以AMEL引物和SRY引物进行PCR扩增。[结果]经扩增后母羊得到一条来自X染色体的270bp条带,而公羊则得到270和210 bp的两条带。两种方法对10份已知DNA样品检测结果与实际性别完全一致。PCR产物的电泳条带较为清晰,相同性别电泳条带数完全一致,而不同性别间电泳条带数和片段大小差异显著。AMEL引物扩增雌性个体DNA实际电泳条带数和理论条带数一致,而来自雄性结果却不一致,这可能与非特异性扩增有关。[结论]AMEL基因比SRY基因具有更高的灵敏性,可用于判定XY染色体动物的性别。     

长毛兔产毛量与兔毛物理性状的通径分析

[目的]研究长毛兔产毛量与兔毛物理性状的关系,建立长毛兔110日龄产毛量的最优回归方程。[方法]以2004～2006年200只长毛兔的不同日龄产毛量的测定数据为基础参数,运用SPSS统计软件对长毛兔的产毛量、粗毛率、粗毛长度、细毛长度、粗毛细度、细毛细度等进行通径分析。[结果]对长毛兔110日龄产毛量（Y）关于粗毛率（X1,％）、细毛长度（X2,mm）、粗毛长度（X3,mm）、粗毛细度（X4,μm）、细毛细度（X5,μm）的通径系数分别为：Py1=-0．002,Py2=0．079,Py3=-0．203,Py4=0．160,Py5=0．240。剔除粗毛率、粗毛长度、细毛长度等相关性状后,回归方程的复相关系数为0．411。经方差分析,F=10．921,P〈0．01,并建立了长毛兔110日龄产毛量的最优回归方程。[结论]细毛细度对长毛兔110日龄产毛量的直接影响最大,粗毛细度次之;粗毛长度对110日龄产毛量是负的直接影响。     

BMPRI-B基因及其突变对绵羊排卵率的影响

近年来发现骨形态发生蛋白受体Ⅰ型基因(BonemorphogeneticproteinreceptorIB, BMPR IB) 突变和Booroola羊多羔表型完全一致, 从而认定BMPR IB基因为控制绵羊多胎性状的主效基因。本文从BMPR类型和信号传导机制及突变体对排卵率的影响等方面详述了BMPR的研究进展,旨在为研究和进一步利用该多胎基因提供参考。     

BMPR-IB和BMP15基因作为湖羊多胎性候选基因的研究

以绵羊BMPR-IB和BMP15基因作为候选基因,以湖羊为研究对象,采用PCR-RFLP方法分析两个基因在湖羊中的多态性。结果发现,湖羊均是BMPR-IB基因突变纯合体(BB),而不带有BMP15突变基因,说明BMPR-IB和BMP15基因并非湖羊多胎性能的主基因。但是,选育后的湖羊总产羔率和第一、第二胎平均产羔数显著高于未经选育的群体,湖羊多胎性状客观存在,其分子机制还需进一步研究。     

应用6个STR基因座进行奶牛亲子鉴定

运用PCR技术用BM2113、BM1862、BMc701、BM2934、TGLA122、BM720共6个STR(短串联重复序列)基因座对7头奶牛DNA进行扩增，扩增产物分两组混合后经聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测，扩增片段互不干扰。采用已确定母女关系的2头奶牛血液样本和5个嫌疑父亲的精液样本，对一头母本已知的奶牛在嫌疑父本中找出父本，并计算父权概率为99．993％。结果证明，银染法检测STR基因座扩增产物可用于奶牛亲子鉴定。