鸡新城疫病毒La Sota株F基因克隆及原核表达

参照NDVLa Sota株核酸序列(AF077761)设计1对引物,利用RT-PCR扩增F基因并得到了长为1 700 bp的片段,将其克隆到pGEM-T easy vector中,经酶切鉴定和测序后克隆进原核表达载体pET-32a,将重组表达质粒转化BL21(DE3),在IPTG诱导下表达约83 kd的融合蛋白,SDS-PAGE电泳和Western blotting检测证实该基因片段获得高效表达且表达产物具有免疫学活性。     

小檗碱对黄羽肉鸡器官指数、抗氧化能力和肠道免疫功能的影响

【目的】本试验旨在研究小檗碱对黄羽肉鸡器官指数、抗氧化能力和肠道免疫功能的影响。【方法】选用1日龄快大型岭南黄羽肉鸡360只,随机分为3组,每组6个重复,每重复20只。对照组(NC)饲喂基础饲粮;抗生素组(PC)饲喂基础饲粮+200 mg/kg土霉素钙+250 mg/kg那西肽;小檗碱组(BBR)饲喂基础饲粮+250 mg/kg小檗碱。在试验第21、42和63天,从每个重复中随机挑选1只接近平均体重的鸡,采集心脏、肝脏、脾脏和法氏囊分别称重,记录重量,计算其器官指数;刮取空肠黏膜,测定超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;提取空肠黏膜总RNA,合成cDNA,测定紧密连接蛋白与炎症因子相关基因的mRNA表达量。【结果】小檗碱对黄羽肉鸡器官指数无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,在饲粮中添加小檗碱显著提高了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的总抗氧化能力(T-AOC),显著降低了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。抗生素组21日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的闭合蛋白(Occludin...     

基因芯片技术及其应用

随着人们对生命活动本质认识的不断深入,特别是人类基因组计划的完成,生命科学领域的研究又面临着新的挑战,即开发出能同时大规模处理生物样品和解析生物信息的新技术-基因芯片技术。在学科交叉不断深入的基础上诞生的基因芯片技术目前已成为国际上的前沿研究领域和研究热点。生物芯片是Fodor等人于1991年在著名的Science上提出来的。而基因芯片是生物芯片的一种,也是当前应用最为广泛的一种生物芯片。随着对基因芯片技术及其功能研究的不断深入,人们已经意识到基因芯片技术将对生物界乃至整个医学界的疾病诊断及治疗具有重要的意义并将产…     

新生猪泻大肠杆菌病现状及其防制

新生猪腹泻大肠杆菌病又名仔猪早发性大肠杆菌病 ,俗称仔猪黄痢 ,是由特定血清型产肠毒素性大肠杆菌 (ＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃＥ .ｃｏｌｉ,ＥＴＥＣ)感染所引起的初生仔猪的一种急性、致死性传染病。主要发生于一周龄以内的新生仔猪 ,尤以 1～ 3日龄最为多见 ,临床则以腹泻、排黄色稀便为主要特征 ,发病率和死亡率均很高 ,自然发病率平均为 4 0 %～ 5 0 % ,高的可达 1 0 0 % ,死亡率在 30 %左右 ,高的达 70 %～ 80 %。是集约化养猪场及种猪场普遍存在的一种传染病。1　致病因子及发病机制新生猪腹泻大肠杆菌病是由肠杆菌科埃希氏菌…     

猪呼吸道疾病综合征

流行病学及现地调查表明,猪呼吸道病综合征(PRDC)是一种多因子性疾病,它是由病毒、细菌、不良的饲养管理条件及易感猪群等综合因素相互作用而引起的疾病综合征;实验研究从另一方面表明PRDC与猪呼吸与繁殖综合征病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体有紧密的相关性,这四种病毒是原发原因。因此,建立迅速的、多重的、高通量的检测方法是防止该病发展而造成严重危害的首要前提,完善诊断手段将成为它的有效防治措施。     

中国东北地区3株日本脑炎病毒株的分离鉴定及基因分型

从黑龙江省某3个猪场采集疑似为日本脑炎病毒感染的病、死猪的脏器以及全血,进行病毒的细胞培养,蚀斑纯化,间接免疫荧光试验,电镜下观察病毒粒子的形态,及RT—PCR检测。结果显示,盲传三代后,出现明显的细胞病变（CPE＋～CPE＋＋＋）;荧光显微镜下细胞胞质内呈现不同强度的绿色荧光信号;电镜下的病毒粒子为40-60nm的球型粒子;PCR检测为日本脑炎病毒阳性。通过对3株分离株腑扩增序列比较,此3株分离株为基因Ⅲ型。     

新城疫病毒D90株对肺癌A549细胞的抑制作用

本试验将不同浓度的新城疫D90病毒株感染肺癌A549细胞,光学显微镜下,分别在24h、48h、72h观察细胞形态,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法在不同感染时间,对不同浓度D90作用下的肺癌细胞A549进行细胞生长状况的检测。结果表明,在24h的时间内,不同浓度(1×10-1～1×10-4)的D90毒株作用下的细胞形态学变化具有一个共同的特征:小的气泡出现,且细胞发生圆缩,这是典型的凋亡形态学变化。在48h～72h时间段内,细胞迅速且大量崩解、坏死。在MTT试验中,新城疫病毒D90株对A549肺癌细胞产生了明显的抑制作用,不同浓度的D90毒株对A549肺癌细胞的作用差异较为明显,抑制率随着病毒浓度的增加而增大,即抑制率与病毒的浓度呈正相关。     

海南农垦西部香蕉发展思路

一、海南农垦西部香蕉发展现状 （一）香蕉产业发展滞后,规模偏小 从全国看,海南香蕉生产与广东、广西、福建相比,起步较晚,但发展迅猛。2001年全省香蕉收获面积为50多万亩,年产量90多万吨;2007年收获面积为62．42万亩,年产量142．13万吨。收获面积和产量分别增长了25％和58％,已成为我国第三产蕉大省,其产量与产值均居海南水果首位。但海南农垦香蕉产业发展未能跟上全省的步伐。     

黑龙江省部分地区散养畜禽流感病毒感染的血清学调查与分析

本研究应用血凝抑制试验（HI），在2005年初，于黑龙江省绥化、海林两地区散养的临床健康的猪、家禽中采集血清样品178份，对其进行了血清学检测，并将获得的血清学检测数据进行了统计学分析。分析结果显示，绥化地区采集的血清样品共计60份，其中家禽中抗H9亚型流感病毒抗体阳性样品24份，占家禽检测总样品数（45份）的53．3％；在海林市地区采集的血清样品共计118份，其中家禽中抗H9亚型流感病毒抗体阳性样品29份，占家禽被检测总样品数（88份）的32．9％。在两地猪群中的血清学检测结果发现，抗H9亚型流感病毒抗体阳性率较高，分别占猪血清检测样品（14／15，19／30）的93，3％和63．3％，两地的畜禽检测中均未检测到H5、H7亚型抗流感抗体。本次试验检测结果表明，在黑龙江省的畜禽养殖中，尤其是猪与家禽当中，存在抗H9亚型流感病毒的抗体，推断可能有该亚型流感病毒的传播；未检到H5、H7亚型流感病毒抗体，在本次检测中可以初步判定在被检测的畜禽当中不存在高致病性禽流感病毒感染与流行。