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191.
影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素 总被引:7,自引:0,他引:7
探讨胚龄培养液、细胞因子、饲养层细胞等因素对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响。以4~13周龄流产胎儿生殖嵴或性腺为材料,小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、人胎儿成纤维细胞(hEF)、STO细胞和牛胎儿成纤维细胞(bEF)作饲养层,高糖DMEM(Dulbecco's minimum Eagle’s medium)为基础培养液,添加10^-4mol/L 2Me(2-巯基乙醇)、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、白血病抑制因子(LIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、干细胞冈子(SCF)等为培养液,探讨影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素。结果表明7~12周流产儿适于人类胚胎生殖细胞的分离克隆;人类胚胎生殖细胞体外培养以添加15%FBS为宜:添加4ng/mL LIF 4ng/mL bFGF 20ng/mL SCF能明显改善人类胚胎生殖细胞的分离克隆;MEF、STO、bEF和hEF可提高人原始生殖细胞(PGCs)的贴壁率,能促进PGCs源的人类胚胎干细胞(ES)的分离效率;以MEF作为饲养层效果较好。 相似文献
192.
自PGCs分离克隆哺乳动物ES细胞的研究进展 总被引:1,自引:1,他引:1
原始生殖细胞(PGCs)是哺乳动物各级生殖细胞的祖细胞。PGCs在体外合适的培养条件下,可自我更新,形成具有ES特征的多能干细胞系,称作胚胎生殖细胞(EG细胞)。EG细胞高度类似于ES细胞,PGCs可作为哺乳动物ES细胞分离克隆的一个有效替代途径,本研究对自PGCs分离克隆哺乳动物ES细胞的研究进展及其相关问题作一简述。 相似文献
193.
牛类胚胎干细胞的分离与克隆 总被引:6,自引:0,他引:6
选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎 ,以 PMOL/ L EF细胞为饲养层 ,以 DMEM+ 15 ml/ 10 0 m l NBS+ 0 .1μm ol/L Na2 Se O3+ 0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 + 10 ng/ ml IGF+ 10 0 0 IU/ m l L IF为培养液 ,用消化法 ( ICM用 0 .2 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 4 g/ 10 0 ml EDTA) ,ES细胞集落用 ( 0 .12 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 2 g/ 10 0 m l EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的 ES细胞集落为细胞小块 ,获得了 9个传至 6代的牛类 ES细胞系和 2 2个传至 9代的小鼠类 ES细胞系。从形态特征、组织化学染色、核型分析和 ES细胞分化能力等方面对所分离与克隆的细胞进行鉴定 ,证明其具有 ES细胞的诸多特性 相似文献
194.
采用改造的日本产FHK奶牛胚胎移植器械,用长针头穿过奶牛阴道穹窿将胚胎注入子宫角。此法移植2头受体,2头妊娠产犊。这种方法在受体牛子宫颈特别细小、紧缩,胚胎移植管不能插入,不能进行非手术方法移植时可采用。较开腹的外科手术方法简便、快速和安全,亦可无数次地反复采用。 相似文献
195.
用PMSG+PG,PMSG+PG+激光照射,FSH+PG和PSH+PG+促排卵3号四组药物组合,超排处理15头黑白花奶牛。各组获得可用胚胎头均数分别为1.50±2.52枚(n=2)。3.30±2.52枚(n=3),2.86±3.85枚(n=7)和6.00±5.29枚(n=3),四组总头均数为3.40±3.70枚(n=15)。鲜胚移植三批受体妊娠率平均为62.2%(28/45),前两批移植妊娠率高达78.3%(18/23),其中1头供体一次冲胚11枚,移植11头受体,有9头妊娠。15头供体牛冲胚后40d内人工授精全部妊娠。 相似文献
196.
奶牛胚胎一分为四分割移植试验 总被引:2,自引:0,他引:2
1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50%(9/18),胚胎移植妊娠率为150%(9/6)。得到同胚三犊一组,同胚二胎一组(其中一头产犊,一头流产)和单胎四个(其中两头产犊,两头流产)。 相似文献
197.
胚胎干细胞与胚胎生殖细胞同属于胚胎源的多潜能干细胞。胚胎干细胞是从附置前胚胎内细胞团分离而来的,而胚胎生殖细胞来自胎儿原始生殖细胞。二者在现代生命科学的各个领域都有着广阔的应用前景。对胚胎生殖细胞的特性,胚胎干细胞与胚胎生殖细胞的异同以及二者的应用前景作一综述。 相似文献
198.
199.
200.
根据小鼠SRY基因,设计并合成内外两对巢式PCR引物;同时。根据ZFY—ZFX基因的同源性,设计合成其共同的巢式PCR引物,对昆白小鼠组织DNA样品进行了性别鉴定。雄性样品可扩增262bp的SRY基因和137bp的ZFY—ZFX基因片断,而雌性样品只能扩增137bp的ZFY-ZFX基因片断,其鉴定结果与已知性别一致。将2-细胞、4-细胞、8-细胞和16细胞胚胎视为微量细胞样品进行PCR扩增,通过常规PCR与巢式PCR、复合PCR的比较。确立了巢式及复合PCR的扩增体系。结合核型分析和PCR法共鉴定21枚胚胎,其中雄性12枚,雌性8枚,鉴定准确率为95.2%。 相似文献