添加外源核苷酸和氨基酸对雏鸡生产性能的影响

以密码子使用频率为指导进行日粮氨基酸生物配比。在增加外源核苷酸的条件下 ,雏鸡的日增重明显增加。 34日龄对照组与实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的日增重分别为 (9.5 2± 0 .4 94 )、(10 .4 9± 0 .2 0 4 )、(10 .2 1± 0 .5 4 7)、(11.4 1± 0 .716 )和 (11.2 1± 0 .2 31) g。肝脏中总RNA含量分别为 (3996 .2± 16 1.5 7)、(44 39.4± 174 .96 )、(42 39.6± 91.12 )、(475 8.4±12 2 .93)、(486 4 .6± 172 .0 4 ) μg/g。结果表明 ,外源核苷酸在家禽体内能被利用 ,且在氨基酸比例趋于平衡时日增重及RNA和DNA总量均有所增加     

一株肠炎沙门氏菌鞭毛基因FliC的克隆及生物信息学分析

本研究旨在对肠炎沙门氏菌（Salmonella Enteritidis）鞭毛蛋白FliC基因进行克隆,并对所获序列进行生物信息学分析。提取该菌基因组DNA作为模板,参考GenBank中肠炎沙门氏菌FliC基因序列设计1对引物,利用PCR克隆获得FliC基因,将其插入到克隆载体中进行测序,应用生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,利用BLAST进行同源性比对,并构建系统进化树,同时对该基因编码蛋白的理化性质、亲水性、信号肽、跨膜结构域、糖基化位点和B细胞抗原表位、二级结构、三级结构等进行分析。结果显示,试验成功克隆了1 518 bp的目的基因,编码505个氨基酸。同源性比对发现,FliC基因相对保守,与大肠杆菌属有较高的同源性。该蛋白的化学分子式为C₂₂₅₄H₃₇₀₁N₆₅₇O₈₀₃S₄,理论分子质量为52.981 ku,理论等电点为4.91;不稳定指数为16.86,是稳定存在的亲水蛋白质。结构分析结果显示,该蛋白没有信号肽或跨膜结构域,但具有8个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和60个磷酸化位点,同时还含有26个B细胞线性结合位点和5个T细胞结合位点。二级结构分析显示,α-螺旋、β-转角、延伸链和无规卷曲分别占43.76%、3.76%、20.99%和31.49%。本试验成功克隆了肠炎沙门氏菌鞭毛基因FliC,并对其序列结构进行了分析,为进一步研究鞭毛在肠炎沙门致病过程中的作用及基因工程疫苗的研制提供理论依据。     

减蛋综合征病毒PVⅢ蛋白基因的扩增克隆与鉴定

应用降落PCR法对减蛋综合征病毒PVⅢ蛋白基因进行了扩增，结果得到1．1kb的扩增产物。将该扩增产物克隆至pMDl8-T载体中，经酶切和PCR鉴定后，证明了目的片段的正确性，从而实现了EDSV-gDNA PVⅢ基因的克隆，这不仅为进一步阐明EDSV PVⅢ结构与功能的关系打下了基础，而且为PVⅢ基因的表达及EDS基因工程苗的研究也奠定了良好的基础。     

鼠伤寒沙门菌cya基因的克隆表达及生物信息学分析

研究旨在克隆鼠伤寒沙门菌cya基因并对其进行生物信息学分析。以鼠伤寒沙门菌SL1344株为模板PCR扩增并克隆了鼠伤寒沙门菌cya基因,构建原核表达质粒pET-32a-cya,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,用1 mmol/L IPTG对其进行诱导表达、纯化,同时利用相关的生物信息学软件对其进行生物信息学分析。结果显示,鼠伤寒沙门菌cya基因大小为1 185 bp。经SDS-PAGE和Western blotting分析显示,在原核表达系统中主要以包涵体形式存在,蛋白分子质量大小约为58 ku。生物信息学分析表明,Cya蛋白由394个氨基酸组成,理论分子质量为44.97 ku,分子式为C₂₀₂₆H₃₁₄₆N₅₆₂O₅₇₈S₁₁,等电点（pI）为7.01,其中带负电荷残基总数（Asp+Glu）43个,带正电荷残基总数（Arg+Lys）42个。Cya蛋白无信号肽与跨膜区,为膜内蛋白,含有4个N-糖基化位点、1个O-糖基化位点、27个磷酸化位点、13个线性B细胞结合位点、11个T细胞结合位点。二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲所占比例分别为38.07%、19.80%、5.58%和36.55%。本试验结果为进一步研究鼠伤寒沙门菌Cya蛋白的功能及建立以Cya蛋白为抗原的免疫鉴别检测方法奠定了基础。     

河南省蛋鸡产蛋下降的原因调查

一调查时间、地点与方法 　　于 1999年 7月～ 2001年 1月调查了河南省 17个地市共 52个县的蛋鸡饲养户 1004户 (场 )，涉及养鸡数量 192.23万只。先对调查员 (主要是我校 98级、 99级牧医专业学生 )集中培训，然后深入各地养鸡场、养鸡专业户实地询问、记录或让养鸡户书面填写调查表，了解近年来本鸡场是否出现过蛋鸡产蛋下降、下降的幅度、下降的原因、采取的防制措施等，如果正好遇到鸡产蛋下降，要帮助查找原因，必要时将病鸡或怀疑的饲料、饮水等带回学校进行实验室化验。 二调查结果 　　1饲养管理方面 1.1突发的应激因素 惊吓、…     

密码子指导下拮抗氨基酸之间生物配比的研究

以猪117个蛋白基因中各种氨基酸密码子的使用频率的比率为指导,进行饲料中拮抗氨基酸之间的生物配比。研究结果表明,密码子的使用频率可以作为氨基酸生物配比的参考依据。     

雏鸡新城疫母源抗体水平与首免日龄关系的再探讨

对初生雏鸡的ND母源抗体进行了动态观察 ,并在HI抗体效价为 6log2 、4log2 时 ,分别应用ND强毒流行株和F48E9标准株进行了攻毒。结果显示 ,对于流行株的攻击 ,母源抗体HI效价为 6log2 和 4log2 时的雏鸡 ,均 1 0 0 %不能被保护而发病死亡 ;对F48E9毒株 ,虽然在HI效价为 6log2 时可完全保护 ,但在HI效价为 4log2 时无任何保护力。说明传统的能使鸡只获得保护的临界值 ( 4log2 )已受到了严重的挑战 ,尤其是对于ND强毒流行株 ,其HI临界值更是远远地高于传统的临界值 ( >6log2 )。雏鸡首免日龄的确定已不能再按传统的公式来推算 ,必须提前免疫 ,且要活苗、死苗同时应用 ,才有可能避免ND野毒的侵袭     

人工感染MDV雏鸡免疫器官中巨噬细胞的动态观察

应用酸性一ｄ一醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）组化染色法，对健康和免疫后接种ＭＤＶ雏鸡免疫器官中ＡＮＡＥ￣＋巨噬细胞的动态变化观察结果表明：两个攻毒组免疫器官中的巨噬细胞数，在接毒后１５天内明显高于健康对照组，并在４０天左右法氏囊中的ＡＮＡＥ￣＋巨噬细胞数再次出现一明显的峰值；免疫攻毒组在接毒后前１０天的增殖较健康攻毒组更加明显。     

鸡卵清溶菌酶5’端激素受体结合位点的克隆与序列分析

应用PCR技术从鸡输卵管组织基因组中扩增出0．35kb的鸡卵清溶菌酶5，端激素受体结合位点的基因片段。序列分析表明，该区域含有2个睾酮激素受体识别位点和2个皮质酮激素受体识别位点，具备输卵管定位表达调控增强能力，为构建融合定位表达启动子调控外源基因在鸡输卵管定位表达奠定了基础。     

金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性研究

为研究金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,本研究复苏培养金黄色葡萄球菌后取培养上清液,采用透析得到金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白,结果显示获得的该蛋白浓度为48.5μg/mL。采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白表现出降解λDNA的核酸酶活性,且最适温度和pH值分别为50℃和9.0,在低温和酸性条件下核酸酶的活性较弱,但胞外核酸酶对70℃以上的耐受性较差。不同浓度的Ba^2+、Mg^2+和Zn^2+对胞外分泌蛋白的核酸酶活性无影响;低浓度(0.01 mmol/L^1 mmol/L)的Ca^2+、Ni^2+、Cu^2+和Mn^4+可以促进胞外核酸酶切割λDNA的活性;高浓度的Na^+、K^+和Fe^3+可以提高胞外核酸酶切割λDNA的活性;添加Co^2+(0.01 mmol/L^10 mmol/L)可以促进胞外分泌蛋白的核酸酶活性。本研究证实了金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,为进一步研究胞外分泌蛋白在金黄色葡萄球菌和宿主互作中的确切作用奠定了基础。