鸭瘟弱毒疫苗诱导IgA、IgM和IgG产生规律的研究

【目的】探讨鸭瘟弱毒苗诱导鸭局部黏膜和系统免疫中抗体发生的规律。【方法】将DPV弱毒苗Cha株经皮下、口服和滴鼻途径免疫20日龄樱桃谷鸭后60 d内定时随机剖杀5只鸭,采集血清、气管和消化道（食道、十二指肠、空肠和直肠）分泌液,应用间接ELISA检测抗DPV的IgA、IgM和IgG抗体滴度（以lg表示）。【结果】所有免疫鸭检测样品中均可检测到DPV特异性IgG、IgM和IgA抗体。血清中抗体滴度由高到低均为IgG、IgM和IgA,其中IgM检出时间最早,IgG存留时间最长。皮下免疫DPV弱毒苗可更早诱导鸭血清中生成特异性IgG,且抗体滴度最高;气管和消化道分泌液中抗体滴度由高到低均为IgA、IgM和IgG,其中IgA和IgM检出时间最早,IgA存留时间最长。口服和滴鼻途径免疫鸭消化道和气管分泌液中IgA滴度较皮下免疫鸭高。【结论】不同途径免疫鸭瘟弱毒疫苗均可迅速诱导免疫鸭体液免疫介导的黏膜免疫和系统免疫。以DPV特异性IgA为主要抗体的黏膜免疫在预防DPV强毒早期对鸭消化道和呼吸道等局部黏膜的感染中具有十分重要的作用,使DPV弱毒疫苗快速产生免疫保护的机制从黏膜免疫的角度得到一定程度解释。     

鸭病毒性肿头出血症病毒培养特性与形态观察

试验对鸭病毒性肿头出血症病毒在鸭胚上的培养特性、毒力、病毒的纯化及其形态进行了研究。结果表明:该病毒不能感染鸡胚,能在鸭胚上繁殖并传代,在鸭胚上的半数致死量为1×10~(-7.24)/0.2mL;氯化铯超速离心纯化的病毒效果优于蔗糖离心法,电镜观察病毒粒子呈球形或椭圆形,大小为60～80nm,无囊膜。     

小鹅瘟GPV-CHa15弱毒株培育及其特性研究

小鹅瘟（GP）是由小鹅瘟病毒（GPV）引起的雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。本病主要侵害出壳后4～20日龄的雏鹅，具有传播快、发病率和致死率高的特点，死亡率可达90％～100％。随着雏鹅日龄增长而发病率和致死率下降。方定一（1956）首先在我国发现本病，1965年后，匈牙利、德国、荷兰、前苏联、意大利、英国、法国、南斯拉夫、越南、以色列等国家先后报道了该病的存在，目前世界许多饲养鹅及番鸭地区都有本病的发生。     

爆发流行传染性法氏囊病的诊断及防治

1991年3—8月,四川部分地区爆发流行传染性法氏囊病(IBD),报告如下。一、流行情况乐山、成都、雅安等地区的许多鸡场及专业户饲养的伊沙和罗曼蛋用鸡爆发流行一种传染病,20—50日龄发病,死亡集中在28—40日龄,病程5—8天,     

银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征病毒的研究

本研究首镒报道应用银加强胶体金探针检测减蛋综合征病毒获得成功。经初步提纯后的ＥＤＳ７６病毒免疫制备高免血清，按常规方法提取兔抗ＥＤＳ７６病毒的ＩｇＧ，成功地建立了检测ＥＤＳ７６病毒抗原的银加强胶体金探针法，并确定了操作程序的最佳试验条件为；兔抗ＥＤＳＶＩｇＧ工作浓度为１：４００，金标记羊抗兔ＩｇＧ的工作浓度为１：２０，银染色的时间为１５ｍｉｎ。用该法对提纯的ＥＤＳ７６病毒抗原的最低检出一为０．１１     

鸭病毒性肝炎的研究——弱毒在雏鸭和成年鸭体内分布和排泄

本文首次报道了将鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）弱毒株接种鸭（成年鸭和雏鸭）后，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测不同时间病毒在鸭体各组织器官的分布和由粪便排出的情况，以及同群饲养但不接种ＤＨＶ的雏鸭和成年鸭感染ＤＨＶ弱毒后在体内分布及排泄情况。结果表明，ＤＨＶ弱毒接种１日龄雏鸭后２０小时、接种成年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出ＤＨＶ的时间顺序是：心、肝、肾、脾、肺、肾和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ，同居感染雏鸭检出ＤＨＶ的时间顺序是：肺、肾、心、肝、脾和粪便，同样在胸肌和脑中未检出ＤＨＶ；成年鸭接种弱毒后检出ＤＨＶ的时间顺序为：心、肝、脾、肺和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ，同居感染成年鸭检出ＤＨＶ的时间顺序是：肺、肾、心、肝、脾和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ。本试验为临床上更好地应用ＤＶＨ弱毒疫苗预防ＤＶＨ提供了理论依据     

免疫组化检测鸭疫里默氏杆菌(RA)方法的建立

本文建立了间接免疫组化法(HRP-间接法)检测组织中的鸭疫里默氏杆菌,并从固定液、抗原修饰方法、洗涤液和洗涤方法、复染液、粘片剂几个方面进行了优化,其结果为以PLP为固定液,以APES为粘片剂,以0.3%的甲醇-H2O2在湿盒中室温下孵育20min消除组织中的过氧化物酶及假过氧化物酶活性,兔抗RAIgG与羊抗兔-HRP的稀释比例均为1∶25,以4℃过夜作兔抗RAIgG的孵育条件,以10%白蛋白0.05%Tween-20pH7.4的PBS湿盒内室温孵育60min处理组织中非特异性染色因素;以TBST为洗涤液,空气振荡器70转/min摇洗2次,每次10min洗涤切片;以0.5%甲苯胺蓝作为复染液。此方法具有特异性强,无假阳性,经济,无需特殊仪器,简单易行的优点。     

天府肉鹅IFN-α成熟肽基因的原核表达及抗病毒活性

参照已克隆的天府肉鹅IFN-α完整ORF基因序列设计引物,克隆成熟肽基因,与载体pET32a连接,构建原核表达载体,并在表达菌Rosetta中表达,SDS-PAGE分析鉴定,通过Ni-IMAC亲和层析纯化和稀释透析复性后,采用微量细胞病变抑制法分析测定IFN的抗病毒活性.结果显示,IFN-α成熟肽基因全长486 bp,...