RAPD技术及其在动物医学中的应用

RAPD技术即随机扩增多态性DNA技术，是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术，其主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，通过凝胶电泳分析其指纹图谱特征。该技术具有快速灵敏，程序简便等优点，现已经广泛应用于多个领域，此文综述了RAPD技术的原理、优缺点、影响因素及其在动物医学中的应用。     

鸭疫里默氏杆菌血清7型的病原特性

1994年1月-2000年10月，从全国23个省(市、自治区)不同代次(原种、祖代、父母代和商品代)的5—90日龄患有典型鸭传染性浆膜炎的病死鸭分离到87株血清7型的鸭疫里默氏杆菌(Riemerell anatipestifer，RA)。对其病原学特性研究的结果表明，血清7型RA在我国鸭群感染分布的范围极广，分离菌株对雏鸡具有很强的致病性，对小鼠无致病性，各地分离菌株表现出一致的形态特征和非常相似的生化特性；各地分离菌株耐药谱很广，但对头孢类药物(如头孢拉啶、头孢克洛等)和利福平却普遍高度敏感。用分离菌株制备的灭活疫苗免疫雏鸡具有良好的免疫原性。     

间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清2型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer，RA)感染是危害养鸭业的最重要传染病之一，该病主要呈急性败血症或慢性过程，以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎和干酪性输卵管炎为特征。RA的血清型很多，其中血清2型在我国的发生频率很高，危害非常严重。目前已建立的用于检测RA抗体的方法有琼脂扩散试验、凝集试验、ELISA等，这些检测方法或是灵敏度不高，或是由于使用抗原成分的不同而存在一些不足，在我国仅仅建立了用于血清1型RA抗体的检测。为能有效对血清2型RA抗体进行血清流行病学调查以及其疫苗的免疫效果进行监测和评价，开展本项研究。     

基因枪与肌肉注射猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠体液及细胞免疫的比较研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗（pcDNA—PRRSV—ORF5）以不同免疫途径（基因枪和肌肉注射）免疫BALB／c小鼠，以PBS和空载质粒pcDNA3．1（＋）为对照，采用流式细胞仪（FACS）、淋巴细胞增殖试验（MTT法）及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测。结果表明，pcDNA—PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血对ConA有明显的反应性，试验组与对照组比较差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05），CD4^＋T淋巴细胞数在免疫后7d高于对照组（P〈0．01），CD8^＋T淋巴细胞在免疫后28d高于对照组，不同途径基因疫苗接种小鼠后均诱导小鼠产生PRRSV特异性IgG。在诱导细胞免疫方面，基因枪和肌肉注射各组间无明显差异；在诱导体液免疫方面，基因枪法优于肌肉注射。研究表明制备的pcDNA—PRRSV—ORF5基因疫苗免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的体液和细胞免疫应答，基因枪法较肌肉注射更能诱导体液免疫应答的产生。     

病原微生物感染对呼吸道正常菌群影响的研究进展

呼吸道是动物机体的一个开放性管道,在动物出生后不久就会有正常菌群定植.呼吸道菌群在正常情况下处于一种动态平衡状态,一旦该平衡被打破,则易引起正常菌群比例的失衡,导致动物发病.本文对病原微生物感染呼吸道正常菌群的研究进展进行了综述.     

规模化鸭场鸭源致病性沙门氏菌的药物敏感性检测及耐药性分析

鸭沙门氏菌病是由一种或几种沙门氏菌引起的鸭的常见多发性传染病，严重影响雏鸭存活率，尤其是与大肠杆菌或鸭疫里默氏杆菌混合感染时，其发病率和死亡率都会更高，给养鸭业构成很大的威胁；成年鸭多为慢性或隐性感染，多不表现明显的临床症状而是导致生产性能下降。一般能致使鸭发病的沙门氏菌主要是鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、鸭沙门氏菌和其他沙门氏菌（如猪霍乱沙门氏菌、都柏林沙门氏菌等）。沙门氏菌具有广泛的宿主性，     

FQ-PCR检测肌注小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在雏鹅体内的动态分布

将30日龄四川白鹅分别肌肉注射接种50μg、100μg和200μg的GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3),以生理盐水和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,于免疫接种后1h、12h、1d、3d、7d、21d、35d、63d、105d和217d采集全血以及各组织器官,用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测pcDNA-GPV-VP3在雏鹅体内的动态分布。结果表明:①pcDNA-GPV-VP3各剂量免疫雏鹅1h即可在各组织中被检测到,其中注射部位含量最高,肝、淋巴器官(脾、法氏囊、胸腺、哈氏腺)含量较高;②到217d时,50μg组免疫雏鹅各个组织器官内仍检测到pcDNA-GPV-VP3的存在,但多数组织器官中的含量比1h时约少了103～104;③血液中pcDNA-GPV-VP3的含量较少,且1h～217d各时间点的差异不显著(P≥0.05);④不同剂量pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅各组织中的含量呈现的总体规律为200μg组>100μg组>50μg组,但差异不显著(P≥0.05)。因此,pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅后1h时可分布至雏鹅体内各组织器官中并持续存在217d以上。