种鸭大肠杆茵性生殖器官病的研究——6.氢氧化铝甲醛灭活菌苗免疫原性的研究

本文对大肠杆菌灭活菌苗的免疫原性、免疫鸭的外周血液免疫动态及卵黄凝集抗体的测定进行了研究。结果表明,菌苗对小白鼠、可疑感染鸭和健康鸭具有良好免疫原性,鸭的免疫期达4—5个月,可提高种鸭产蛋率和种蛋孵化率。鸭只免疫后45天平均凝集抗体滴度达270.4和313.6,免疫后5个月仍有62.5％鸭只的凝集抗体滴度≥40。免疫鸭血清r-球蛋白含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),高于非免疫鸭。     

鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒疫苗的研究 Ⅱ、稳症性、保存条件及保存期的测定

本文报道了鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒疫苗的稳定性、保存条件和保存期。稳定性的测定是采用了不同保存条件、不同保存期（月）的二联苗，用抗鸭瘟高免血清或抗鸭病毒性肝炎高免血清中和掉二联苗中的相应弱毒后，测定剩下的鸭病毒性肝炎弱毒和鸭瘟弱毒（满度）分别对9日龄鸡压的半数致死置（LD60）和对鸡胚成纤维细胞（CEF）的半数感染量（TCID60）来判定二联苗的稳定性．保存期的测定是采用不同保存条件（℃）不同保存期（月）的二联苗免疫成年鸭，10天后采血测定抗鸭肝炎病毒中和抗体效价及抵抗1万倍最小致死量鸭瘟强毒攻击的能力．试验结果表明：非冻干二联苗子－15—25℃条件下可保存18个月，0℃冻冻结态下可保存1年，4－10℃可保存半年，15－25℃保存10天。疫苗冻干后，－15—25℃条件下可保存20个月，0℃保存问个月，4－10℃保存12个月，15－25℃保存20天．     

伪狂犬病病毒Fa株gp63（gI） 基因核苷酸序列测定及分析

对我国最早分离的伪犬病病毒（pseudorabies virus,PRV)Fa株糖蛋白gp63(gI)基因核苷酸序列及的氨基酸序列作了测定与分析，完整的gp63(gI)结构基因从起始密码子ATG到终止密码子TGA共有1050个核苷酸残基，编码由439个氨基酸残基构成的多肽链，4种核苷酸残基的构成比分别为：G35．9％，11.33%,T11.81%,C40.95%,G C含量达76．85％，PRV Fa株gp63基因核苷酸序列与Nice株的相比，两者同源性达98．13％，仅存在3个核苷酸残基的缺失变异，氨基酸推导序列分析表明，糖蛋白gp63具有典型膜蛋白特征，与Nice株相比，同源性为97．42％，gp63基因起始密码子由3个连续的ATG组成，ATG上游区域内无启动子调控区序列。     

鸭腺病毒感染的研究：病毒分离鉴定及病原特性

一樱桃谷鸭父母代种鸭群产蛋率由７９．８９％降到１５．１４％，减蛋综合征血清抗体阳性率。由鸭群的血液白细胞及卵巢中分离到两株病毒，该病毒能够凝集鸡，鸭，鹅，鸽等动物的红细胞，这种凝集能力能够被ＥＤＳ－７６病毒阳性血清所抑制，鉴定为鸭腺病毒。感染鸭的输卵管及卵巢经组织学切片观察，在卵巢的组织切片中滤泡数量减少，且只看到初级及次级卵母细胞等未成熟卵泡而不见成熟卵泡，未成熟的卵泡泡常见退化与吸收现象。     

SA38蜡样芽孢杆菌在体外对几种致病菌的生物拮抗试验

ＳＡ_（３８）蜡样芽孢杆菌在体外对几种致病菌的生物拮抗试验程安春，何明清，陈孝跃（四川农业大学动物科技学院，雅安６２５０１４）ＳＡ_（３８）菌系由健康动物体内分离到的一种蜡样芽孢杆菌，用该菌制成的生态制剂（调痢生），对多种动物无毒无害而有益，且对多种动...     

雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒在感染鸭胚体内形态发生学和宿主细胞超微病理学研究

将雏鹅新型病毒性肠炎病毒（NGVEV）强毒CH株经尿囊腔途径人工感染10日龄鸭胚,应用透射电镜和超薄切片技术研究病毒在宿主细胞内的形态发生及各组织器官的超微结构变化。结果表明：感染后不同时间剖杀及死亡鸭胚的尿囊膜、肠、心、肝、脑和肌胃组织中,均观察到60～70nm的病毒粒子。病毒粒子主要通过与细胞膜融合而进入细胞质内,然后在细胞核内进行复制和装配。最后病毒粒子通过核膜和细胞膜破裂的方式被释放。病毒侵害的主要靶细胞包括鸭胚尿囊膜上皮细胞、肠上皮细胞、肠道平滑肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、肌胃黏膜上皮细胞和心肌细胞等,表现为细胞核内外膜间隙严重扩张,细胞质整体结构严重空化。病毒侵害的主要靶细胞器包括粗面内质网和线粒体,表现为粗面内质网扩张呈囊状;尿囊膜上皮细胞的线粒体出现固缩和异常聚集变化,而其他组织细胞的线粒体均表现为肿胀和嵴断裂、消失。本试验还发现NGVEV可诱导宿主细胞发生严重的细胞凋亡现象,表现为细胞皱缩,胞核内染色质密度增高,核固缩成一个或数个团块凝聚在核膜周边,胞质浓缩深染并形成凋亡小体。     

鸭瘟病毒dUTPase基因克隆、原核表达及在病毒感染宿主亚细胞中的定位分析

根据笔者实验室新发现的鸭瘟病毒（DPV）dUTPase基因（GenBank登录号DQ486149）序列设计1对引物,PCR扩增后将产物亚克隆至pET32a（＋）原核表达载体,获得表达质粒pET32a-DU。然后将其转化至E．coliBL21（DE3）进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测显示诱导表达蛋白约66．8ku,与预期表达蛋白大小一致。薄层扫描分析表明重组蛋白占菌体总蛋白的36．2％,主要以包涵体的形式存在。重组蛋白纯化后制备兔抗血清,间接EUSA效价为1：409600。通过免疫荧光技术进行DPVdUTPase亚细胞定位检测,结果显示最早可在感染后4h的胞质中检测到特异性荧光,12h大量点状绿色荧光聚集于胞核;24h后胞核内点状荧光减弱,而胞质点状荧光增强;48h胞核和胞质荧光均显著减弱。本研究为DPVdUTPase基因功能和DPV致病机理的研究提供了重要数据。     

鸭干扰素成熟片段基因的原核表达及其表达产物抗鸭瘟强毒活性检测

干扰素(interferion,IFN)是在特定的诱导剂作用下由细胞产生的一种具有高度生物学活性的糖蛋白,能使机体迅速获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的功能[1].我国是世界上养鸭数量最多的国家,许多病毒性疾病(如鸭瘟)仍严重危害养鸭业,因此研究安全有效的鸭广谱抗病毒制剂有重要意义.目前对鸭IFN-α研究相对较少,对人IFN-α的研究表明[1-2],IFN-α除具有抗病毒活性外,还具免疫调节作用;近年,有学者[3-4]将其作为佐剂使用可显著提高疫苗效果.     

蛋白质B细胞抗原表位测定方法的研究进展

随着免疫学的发展和化学合成多肽技术的成熟,有选择地合成蛋白质中具有免疫原性的肽段,可有效刺激机体的细胞免疫和体液免疫.通过理论预测及试验测定等方法,可推测蛋白质B细胞的抗原表位.文章总结了近年来蛋白质B细胞抗原表位的常分析方法,现介绍如下.