MMPs及其在胚胎着床中作用的研究进展

20世纪70年代以来,基因的体外重组和克隆技术的诞生,使以DNA重组技术为核心的现代生物技术蓬勃发展,从而推动了农业现代化的发展.传统的农业生产技术被高新的生物技术取代,基因药物、具有优良性状的转基因动物、克隆动物等出现使农业进入前所未有的现代化时代.作为克隆动物技术手段--胚胎移植技术是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大.通过此技术,不仅可以生产克隆动物,而且对于研究动物胚胎的发育机理也具有重要的作用.     

猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外培养卵丘细胞凋亡检测

为了验证猪COCs在体外成熟过程中是否存在细胞凋亡的现象及其生物学特征,筛选快速、准确的检测卵丘细胞凋亡的方法,本试验将体外培养的猪COCs采用电子显微镜(EM)技术、苏木素-伊红(HE)染色技术、Hoechst33342-PI荧光染色技术、原位末端标记(TUNEL)法检测猪卵丘细胞凋亡,并对3种定量检测方法进行了比较与分析.试验结果表明:猪COCs在体外成熟过程中存在细胞凋亡的现象,TUNEL法检测卵丘细胞凋亡灵敏度最高,与Hoechst33342-PI荧光染色法、HE染色检测法相关系数分别为0.93、0.85.在本试验中Hoechst33342-PI荧光染色法可代替TUNEL法检测卵丘细胞凋亡.     

高地下水位弧底梯形混凝土衬砌渠道冻胀断裂破坏力学模型及应用

【目的】在线弹性断裂力学的基础上,对高地下水位弧底梯形混凝土衬砌渠道冻胀断裂破坏力学模型进行研究,为弧底梯形衬砌渠道的设计提供依据。【方法】将高地下水位弧底梯形渠道混凝土衬砌简化为简支梁结构并建立其冻胀力学模型,在考虑材料本身缺陷的基础上结合断裂力学理论,提出了高地下水位弧底梯形渠道冻胀断裂破坏力学模型。运用断裂力学及结构力学等相关理论,考虑法向冻结力的作用,通过适当的简化计算弧底梯形渠道衬砌的相关内力,并提出适用于弧底梯形渠道衬砌的断裂力学破坏准则,利用计算实例对所建立的渠道冻胀断裂破坏力学模型进行验证。【结果】渠道衬砌板的冻胀断裂符合Ⅰ-Ⅱ复合型裂纹的特点,通过建立的弧底梯形渠道混凝土冻胀断裂力学模型,可以计算出渠道阴坡、阳坡、渠底的衬砌板厚度。计算实例证明,所建立的高地下水位弧底梯形渠道冻胀断裂破坏力学模型正确可行、简单实用。【结论】弧底梯形混凝土衬砌渠道优于梯形渠道,是一种冻胀力及冻胀变形较小的结构形式。     

谷氨酰胺对早期断奶仔猪生长性能和免疫性能的影响

研究了不同水平的谷氨酰胺对断奶仔猪生产性能、免疫功能的影响。试验选用80头28±1d断奶、体重为6.16±0.13 kg的长白×约克夏仔猪,按单因素完全随机化设计随机分为5个处理,日粮中谷氨酰胺的添加量分别为0、0.3%、0.6%、0.9%和1.2%。试验期21 d。在断奶后7 d1、4 d2、1 d测定生产性能和淋巴细胞转化率,同时在断奶后7 d,每处理选4头仔猪免疫卵清白蛋白(OVA),于免疫前和免疫后第7天和第14天前腔静脉采血测定血清OVA抗体水平。结果表明:①随着谷氨酰胺添加量的增加,早期断奶仔猪日增重、日采食量提高(P≤0.05),料肉比下降(P>0.05);②谷氨酰胺能提高早期断奶仔猪淋巴细胞转化率和特异OVA抗体效价,提高仔猪的免疫性能;③综合生长性能与免疫性能,谷氨酰胺的最佳添加剂量为1.2%。     

大骨鸡血清淀粉酶同工酶谱及其活性的测定

以纯种大骨鸡为研究对象，采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法对大骨鸡血清淀粉酶同工酶谱进行分析，并利用比色法对淀粉酶活性进行测定。结果表明：①大骨鸡血清淀粉酶有2种同工酶Amy-1和Amy-3，其中Amy-1有AA、AB和BB3种表型而呈现多态性，表型频率分别为10.42％，80.21％，9．37％，AB为优势表型，Amy-1^A和Amy-1^B基因型频率分别为50.53％。49．47％。（多大骨鸡血清淀粉酶活性平均为（690．48±98．35）U／L，AB型大骨鸡血清淀粉酶活性高于AA和BB型。     

RNA干扰的实验方法及应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)就是把与内源mRNA编码区同源的长度为19~23 bp的外源双链RNA(double stranded RNA,dsR-NA)导入细胞中,通过一系列细胞内反应引发细胞中相应mRNA的降解,从而导致特定基因表达沉默的一种技术。是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵,抑制转座子活性及基因表达的监控机制。由于RNAi可以作为一种简单、有效代替基因敲除的遗传工具,在功能基因组学领域掀起一场真正的革命,并彻底改变这个领域的研究步伐。本文从RNAi的发现着手,对其原理、实验方法及应用作了系统介绍。     

从欧洲畜牧业现状浅谈中国的畜牧业发展趋势

2000年分别暴发于比利时的二恶英事件和英国的疯牛病等，在欧洲大陆引起强烈震动，消费者对畜产品的消费信心出现严重危机，消费意向表现出难以逆转的重大转变。于是提出“用健康饲料创建健康食品”、“饲料是人类的直接食物”等口号，以唤起人们对畜牧业发展趋势的关注。欧洲正全面兴起自然畜牧业浪潮，并着手从以下几个方面生产健康畜产品。     

感染非典型新城疫蛋鸡组织中HSP70抗原肽复合物提取与纯化

为建立从患有非典型新城疫的蛋鸡组织细胞中提取、纯化热休克蛋白HSP70抗原肽复合物的方法,采取三步蛋白纯化法从非典型新城疫蛋鸡肝脏组织中提取、纯化HSP70抗原肽复合物.经分级硫酸铵盐析后,依次用ConA-Sepharose亲和层析和DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化.所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting进行蛋白分子量及性质鉴定,Bradford法测定蛋白浓度.分离、纯化得到的蛋白经SDS-PAGE、银染鉴定为单一带,分子量为70ku;Western blotting结果证实为HSP70.每克新鲜肝脏细胞最终获得90～110 μg HSP70.使用本分离纯化方法可获得高纯度HSP70抗原肽复合物.     

饲喂脱毒蓖麻粕对肉鸡生产性能的影响

试验选用1日龄艾维因肉鸡雏500只,随机分成5个处理组。各试验组鸡的基础日粮组成和营养水平相同。试验各组在日粮中分别添加0、5%、10%、15%、20%的脱毒蓖麻粕。结果表明:日粮中添加5%和10%脱毒蓖麻粕能提高4～7周龄肉鸡增重,但差异不显著,而且Ⅱ组(10%)优于Ⅰ组(5%),高剂量的脱毒蓖麻粕(大于15%)对肉仔鸡的生长性能有明显的抑制作用。日粮中添加脱毒蓖麻粕各组与对照组相比,对肉仔鸡的屠宰率、胸肌率和腿肌率均无显著影响(P>0.05);在日粮中加入5%和10%的脱毒蓖麻粕后,肉鸡的采食量、健康状况良好,屠宰观察组织结构正常。     

急性热应激条件下肉鸡组织器官中HSP70表达定位

通过观察热应激条件下肉鸡各组织中的HSP70阳性表达部位分布特点,探讨HSP70对不同组织器官的保护作用。分别在肉鸡40日龄时(选择体重差异不显著健康鸡)进行急性热应激处理,温度处理如下33℃±0.5℃、35℃±0.5℃、38℃±0.5℃各30min,修复2h分别取各处理组鸡只的法式囊、胸腺、心脏、肝脏作HSP70的免疫组织化学染色。各组织的HSP70表达时间及强度为(由强到弱):肝脏、心脏、胸腺、法氏囊。结果表明HSP70具有同源性,抗兔、抗鼠的HSP抗体可以抗肉鸡的抗原。HSP70在各组织器官中的表达定位有时间差异,不同的细胞具有不同的反应性,反应面积由大到小:肝脏、心脏、法氏囊、胸腺。HSP70的定位:肝脏、心脏定位在细胞质中。法式囊、胸腺定位在细胞质与细胞核中。