体细胞核移植技术生产转基因猪胚胎的研究

以转染绿色荧光蛋白基因的猪胎儿成纤维阳性细胞作为体细胞核移植的核供体,体外成熟卵母细胞为核移植受体构建绿色荧光蛋白转基因克隆猪胚胎,研究供核细胞的处理、注核部位及重构胚融合/激活时间对转GFP克隆胚早期发育的影响.结果显示,胎儿成纤维细胞血清饥饿与非饥饿培养10 d处理组,采用卵周间隙核移植重构胚的卵裂率（82.35%和79.07%）差异不显著(P >0.05);体外培养42~44 h 卵母细胞进行胞质内和卵周间隙注核的重构胚胎,其卵裂率（81.11%和76.80%）差异不显著（P >0.05）;将卵周间隙注射法构建重构胚在0~1 h,2~4 h 和6~8 h 进行融合/激活操作,前2组重构胚卵裂率（75.61%和83.07%）无显著差异(P >0.05),但显著高于第3组（60.00%）的卵裂率(P <0.05).     

农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究

对金钗石斛 Dendrobium nobile 进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60 d分别将工程化根癌农杆菌 Agrobacterium tumefaciens EHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150 d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶（GUS）染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明：子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10~30 d进行子房注射后,果实脱落;在授粉后45 d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18%;无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应;随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法.     

小麦籽粒镉元素含量全基因组关联分析及候选基因预测

以国内外207份小麦种质为材料,利用660K SNP芯片对其进行基因型检测,并结合不同环境下表型数据和最佳线性无偏预测值 (BLUP,Best linear unbiased prediction) 对小麦籽粒镉元素含量进行全基因组关联分析。结果表明：与小麦籽粒镉元素含量显著关联的SNP 310个,这些SNP分布于除3D和4D外的19条染色体上,单个SNP解释变异率为10.95%～14.66%。不同环境下检测到的关联SNP结果存在差异,其中在原阳地区检测到186个SNP,开封地区检测到71个SNP。基于BLUP值分析获得53个SNP。基于SNP物理位置,将距离较近的SNP进行整合,共获得有效QTL位点52个。同时发现了7个在多环境下表现稳定的SNP,并对其进行单标记效应分析。最后对基于获得的关联SNP进行了候选基因预测,共获得7个与小麦籽粒镉元素含量相关的候选基因,其中 TraesCS1B01G321700和TraesCS1B01G320200可能与镉元素调控相关基因转录有关,而TraesCS7B01G459000和TraesCS7B01G456900可能与镉元素的吸收和转运等代谢过程有关。还筛选出了对镉具有良好避性的部分小麦优异种质,如‘云麦51’‘郑麦379’‘白穗白’‘云麦53’‘双丰收’。     

青海沙棘原汁中微量元素含量的测定及其聚类分析

【目的】测定青海不同地方沙棘原汁中微量元素的含量,并进行聚类分析,为沙棘资源的开发提供依据。【方法】采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,测定青海东部地区21个采样点沙棘原汁中的Fe、Zn、Mn、Cu、Cr、Ni、Pb和Cd 8种微量元素的含量,并采用SPSS 16.0统计软件对其样品进行聚类分析。【结果】青海沙棘原汁中Fe、Zn、Mn、Cu、Ni和Cr的平均含量分别为14.94,2.06,1.88,0.69,0.19和0.14mg/L,Pb和Cd的含量分别是28.97和4.76μg/L。产地是影响21个沙棘样品聚类结果的主要因素,相同产地的样品多聚为一类;但由于沙棘原汁中的微量元素含量受多种因素影响,仅靠微量元素含量不能对其样品进行合理归类。【结论】青海沙棘原汁中的Fe含量丰富,重金属含量低,具有较好的开发利用价值。     

排球多元组合训练的生理生化监控及实施研究——以四川省男子排球队为例

目的：对四川男子排球队备战2014-2015联赛的多元组合训练方案进行生理生化监控和实施研究,为提高我国男子排球训练水平提供数据参考。方法：以四川男子排球队员为研究对象,对比分析两个赛前训练周期的训练安排,并监测其血液Hb、CK、BUN、T和C变化。结果：队员的Hb、CK、BUN、T和C值随着训练安排不同而出现变化,2014-2015排球联赛赛前训练安排要优于2013-2014排球联赛赛前训练,且成绩大幅提升。结论：综合运用Hb、CK、BUN、T和C指标能监控运动员机能状态,合理安排训练计划和评价训练效果;四川男排2014-2015赛季独特的多元组合训练具有多系统刺激、训练持续时间长且不宜疲劳等优点,可在短期内提高运动员成绩;从四川男排训练效果来看,生理生化监控下的多元组合训练法或对提高我国排球训练的整体水平有借鉴意义。     

我国体育非营利组织治理障碍与能力提升路径研究*

体育非营利组织的存在与发展依赖于自身的治理能力,其受到属性、责任、关系、战略等要素的驱动,成为组织能否科学、持续发展的关键。我国体育非营利组织发展时间较短,内部条件严重不足,且受外部环境的干预较大,具有浓重的政治色彩与失调的市场运行机制,颠覆了组织的本质属性。提升体育非营利组织的治理能力,要基于组织自身、政府、市场及社会其它因素四个维度采取相应举措。     

刚竹属3种重要散生竹光系统Ⅰ基因（Lhca1）的克隆、序列分析和蛋白结构预测

光系统Ⅰ(PSⅠ)在植物光合系统中具有重要功能,Lhca1是编码PSⅠ复合物中最主要的捕光色素蛋白LHCⅠ的基因。该研究采用RT-PCR法,从毛竹中克隆了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因Lhca-Pe01(GenBank EU035496)的全长,从红壳竹和角竹中克隆了长度分别为616、613 bp的捕光叶绿素a/b结合蛋白基因片段LhcaH01(GenBank EU513200、 LhcaJ01(GenBank EU513201)。运用生物信息学方法对其核苷酸序列、编码的氨基酸序列以及蛋白结构进行预测。结果表明,LhcaPe01基因序列从第39 bp开始到第779 bp含有1个开放阅读框和一个中止密码子,该基因全长1 051 bp,在5′端有38 bp的非编码区,在3′端含有242 bp的非编码区和Poly(A) 30 bp。对这3个基因的保守片段的序列分析表明,刚竹属3种竹种毛竹、红壳竹和角竹保守区内核酸序列同源性非常高,在禾本科内不同属之间毛竹与大麦序列同源性最高,玉米次之。编码的氨基酸序列同源性与核酸序列同源性一致,最高是毛竹与大麦,水稻次之。经推测LhcaPe01编码的蛋白质等电点和分子量分别为5.400 0和22 107.34 D。蛋白质结构预测表明,毛竹、大麦、水稻、玉米的LHCⅠ蛋白结构非常相似。      

Engine crankshaft static strength analysis based on the finite element method

Focusing on the fracture issue of single cylinder engine crankshafts, a three dimensional solid model was built in CATIA. Pre treatments, such as plotting grids, were carried out through Hypermesh, and finite element analysis was done using MSC. Patran/Nastran. The results show that the fatigue safety coefficient cannot meet demand when nodular iron is the crankshaft material. This finding verifies the theoretical possibility of crankshaft fracture. A crankshaft using 40Cr theoretically would not fracture because the fatigue safety coefficient could meet the demand. Simulation correctness was verified by a 400 hour engine reliability test.     

镶嵌式仿生耦合功能表面流体介质控制机制研究

模拟海豚镶嵌式皮肤结构,设计一种仿生耦合功能表面。利用ANSYS-Workbench软件对镶嵌式仿生耦合功能表面进行双向流固耦合计算,流体计算采用CFX下的标准k-ε湍流模型,固体计算采用Transient structural。模拟结果表明,耦合功能表面湍动能、表面速度明显降低,表面柔性材料产生位移变形。模拟结果表明,表面柔性材料通过变形与基底刚性材料耦合,通过对流体介质的顺应实现对流体介质的控制;通过表面材料的弹性变形吸收部分能量,有效降低了流体介质的湍动能,避免了流固交界面能量过分交换而带来的能量损失。