犬实验感染CDV的病理学研究

对实验感染犬瘟热病毒的病犬进行了系统的病理学观察,并用酶标ＳＰＡ法对病犬脏器组织中ＣＤＶ抗原进行了定位检查,结果表明淋巴系统各器官组织是ＣＤＶ急性感染早期首先侵犯的靶器官,脏器组织的病理改变与ＣＤＶ抗原出呈正相关,脏器组织中包涵体的检出与形态结构具有一定的特征性和示病意义,但采用免疫组化方法检查ＣＤＶ抗原,更具优越性,作者认为：ＣＤＶ９３０３９株和ＣＤＶ９３０４１株是致病力很强的泛嗜性ＣＤＶ。     

犬瘟热病毒的分离鉴定、致病特点和单克隆抗体的研究

犬瘟热是由犬瘟热病毒（ Ｃａｎｉｎｅ Ｄｉｓｔｅｍ ｐｅｒ Ｖｉｒｕｓ, Ｃ Ｄ Ｖ）引起的犬的一种高度接触传染性疾病。近年来,随着我国军、警犬、实验用犬和宠物犬饲养量的大幅度增加,以及异地交流的增多,犬瘟热在我国犬群中的发病率和致死率均有升高的趋势,而且临床表现也与以往有所不同。分析原因,除母源抗体干扰、疫苗效价低及使用不当外,犬群中是否出现了 Ｃ Ｄ Ｖ 新毒株亟待研究证实。本研究在从国内病犬分离到 Ｃ Ｄ Ｖ 的基础上,进行了 Ｃ Ｄ Ｖ 理化特性、致病特点、回归动物试验以及研制成功分泌抗 Ｃ Ｄ Ｖ 单克隆抗体,并进行了初步应用,取得了较为满意的研究结果。在研究中应用免疫组化方法进行病原检查,证实可很好地解决以往病理观察中无法进行病毒性疾病的特异性诊断的问题。１）采用免疫组化间接 Ｂ Ａ 法,对临诊疑似犬瘟热病犬脏器组织进行了 Ｃ Ｄ Ｖ 抗原定位检查及系统病理学观察。结果表明：发病犬大脑、小脑、心、肺、肝、脾、肠、肾、肾上腺、淋巴结、膀胱等组织细胞及血管内皮、支气管上皮细胞胞浆内均可见抗原阳性反应。同时,抗原阳性反应组织、器官均可见不同程度的病理变化。２）从病死犬肺、肝和淋巴结分离到 ２株 Ｃ Ｄ Ｖ,即 Ｃ Ｄ Ｖ９３０３９ 和      

用限制性内切酶技术区别B病毒与单纯疱疹病毒1型和2型

进一步从基因组水平鉴定B病毒147株的实质。采用Hirt上清法从BV147、HSV－1、HSV－2感染细胞中提取病毒基因组并用BamHI进行酶切，电泳。结果所获得的BV147的BamHI图谱与国外报道的基本一致。进一步证实了新分离的病毒是B病毒，并为克隆B病毒的基因组、构建其物理图谱奠定了基础。     

犬瘟热病毒(CDV)93039与CDV MD-77株感染Vero细胞的电镜观察

采用电镜技术对犬瘟热病毒（ＣＤＶ）９３０３９株和ＣＤＶ ＭＤ－７７株在体外培养细胞中的增殖过程和所致病变特点进行了比较研究。结果表明,２株病毒的形态发生过程与文献报道相符。ＣＤＶ９３０３９株与ＣＤＶＭＤ－７７株相比,少见长丝状核衣壳聚集及曲型的胞膜上出芽病毒粒子,涵体以电子致密小体为主,与文献报道的ＣＤＶond株较为相似 ;ＣＤＶ ＭＤ－７７株可见成堆存在的核衣壳结构,胞膜上出芽增殖明显可见,早期包涵     

犬流感的研究进展

犬流感是犬的一种新发传染病,2004年美国首次出现了H3N8亚型犬流感病毒,对犬的致死率高达36%,该病毒随后出现在美国的不同地区;2006—2007年韩国和我国先后在严重呼吸道感染犬中分离到H3N2亚型流感病毒,研究发现该病毒可以在犬之间进行直接传播,表明H3N2亚型犬流感病毒已经进入到韩国和我国的犬群中。犬作为人类主要的伴侣动物之一,与人和野生动物都有亲密接触,犬流感给流感病毒的跨宿主传播提供了更多的机会,因此引起了人们的广泛关注。本文将从犬感染流感病毒的情况、犬流感的临床症状、诊断、治疗和预防几个方面进行综述。     

猪内源性反转录病毒5＇非编码区启动子活性的分析

[目的]构建以缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒（PERV）5＇＇非编码区（5＇＇UTR）为启动子的萤光素酶表达载体,分析5＇＇UTR的转录调控规律.[方法]将含有不同功能域的PERV的UTR克隆至萤光素酶表达载体上,转染瞬时表达细胞Cos-7,检测萤光素酶的表达.[结果]缺失R区的5＇＇UTR显示出很强的启动子活性,U3重复区序列缺失的5＇＇UTR启动子活性显著下降.UTR显示出较之LTR强的启动子活性.缺失整个U3区的UTR比仅缺失U3重复区的UTR启动子活性强.[结论]在R区有转录因子的结合位点可引起转录活性下降;U3重复区序列表现出增强子的活性.在5＇＇UTR的下游序列中,包括引物结合区（PBS）和前导序列（Leader）可能有某些转录因子的结合位点引起转录增强,同时在U3重复区的上游和下游序列可能存在某些转录因子的结合位点可减少5＇＇UTR的转录活性.     

鸡传染性法氏囊病病毒rVP2蛋白高效组装亚病毒颗粒的鉴定

为获得高纯度的鸡传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）VP2蛋白自组装的亚病毒颗粒（subviral particles,SVPs）,并对重组VP2蛋白（rVP2）SVPs的组装效率和均一性进行评价,本试验利用大肠杆菌表达IBDV rVP2,通过SDS-PAGE和Western blotting对蛋白表达情况和免疫反应性进行鉴定,通过阴离子交换层析和切向流超滤浓缩系统纯化rVP2蛋白,并通过透射电镜（TEM）、高效液相尺寸排阻色谱（HPSEC）、蔗糖密度梯度离心及粒径和表面电位（Zeta potential）等多种检测技术对单个SVP组装形态和整体组装情况进行分析检测,初步建立了IBDV rVP2 SVPs组装效率的系统性检测方法。结果显示,在大肠杆菌中实现IBDV rVP2的大部分可溶性表达,且能与鸡IBDV阳性血清有明显的免疫反应性,纯化后rVP2纯度提高66.9倍,回收率达到93.3%。TEM观察rVP2自组装成直径约25 nm的SVPs,视野内SVPs大小均一,均匀分散。HPSEC检测结果显示,rVP2 SVPs的分子质量约为2 482 ku,与20个VP2三聚体形成的T=1二十面体SVPs分子质量一致。蔗糖密度梯度离心检测结果显示,rVP2 SVPs体积分布均一,组装效率高。粒径和Zeta电位检测结果表明,rVP2 SVPs颗粒分散度较好、体系稳定,有利于rVP2 SVPs的长期保存。本试验通过多种检测技术对rVP2 SVPs的组装情况进行检测分析,实现了rVP2 SVPs的高效组装,为IBDV SVPs疫苗的质量控制提供了有力支撑。     

规模猪场猪瘟免疫失败调查及免疫程序优化

为调查规模猪场猪瘟的免疫效果,选取北京市3个规模猪场,每场随机抽取10头仔猪分别在25、60日龄和90日龄采血分离血清,检测猪瘟抗体.A、B、C3个猪场的母源抗体阳性率分别为100％,50％,0％;2次免疫后抗体阳性率分别为10％,90％,90％.由于猪场A猪瘟免疫失败,对其免疫程序进行了优化,将首免时间推迟至50日龄.优化免疫程序后2次免疫后抗体阳性率达到70％.结果表明,母源抗体阳性率直接影响猪瘟疫苗对仔猪的免疫效果,仔猪母源抗体降至50％左右进行猪瘟免疫可取得比较理想的结果.本研究为规模猪场结合仔猪母源抗体水平制定合理猪瘟免疫方案提供了较好的参考.