EMA与PCR结合检测大肠杆菌O157方法的研究

为了建立1种快速检测样品中大肠杆菌O157并能区分死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR结合,以O157特有的抗原基因rfbE为靶基因,以O157的纯培养物为模板扩增,进行灵敏度、特异性、曝光时间及最佳EMA浓度筛选实验。结果显示:该检测方法的灵敏度为1.2×102CFU/mL,最佳曝光时间为1 min。终浓度≥1μg/mL的EMA,能有效抑制O157死菌的扩增,而当EMA终浓度≤16μg/mL时对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制作用。EMA-PCR能有效减少O157活菌检测过程中假阳性结果的出现。     

HPLC-ELSD法测定硫酸安普霉素含量的研究

建立了HPLC-ELSD法测定硫酸安普霉素、硫酸安普霉素可溶性粉和硫酸安普霉素预混剂中安普霉素的含量.采用XBridge C18柱(4.6×150 mm,5μm),以0.2 mol/L三氟乙酸-甲醇溶液(98:2)为流动相,柱温30℃,流速1.0 ml/min,雾化器加热级别为60%,漂移管温度为60℃,气体压力为35psi,增益为5.对照品在进样量为0.4-10μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),安普霉素回收率为99.5%-102.7%.该方法简便、准确、快速,适合硫酸安普霉素及其制剂的质量控制.     

饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量.用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS/M进行检测.色谱条件: ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm i.d.,1.7 μm),流动相乙腈 0.1 %甲酸溶液,梯度洗脱流速0.3 mL/min.采用电喷雾串联四极杆质谱检测.结果表明,孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng/mL时线形良好,在1～100 μg/kg的添加水平条件下平均回收率为68.5 %～91.6 %,该方法的检测限为1.0 μg/kg.     

电位滴定法测定龙胆碳酸氢钠片和大黄碳酸氢钠片

建立了电位滴定法测定龙胆碳酸氢钠片和大黄碳酸氢钠片的新方法．方法简单、快速、准确。     

2018年河南省羊交易市场和经纪人调运活羊情况调查

为了解河南省羊群交易市场基本情况及经纪人行为和羊群调运情况,采用横断面研究方法,通过问卷调查、实地访谈等形式开展了本次调查。调查发现：河南省内的羊群交易市场多为自发形成,多种动物混合交易现象普遍;活羊经纪人存在跨区域、多环节连续收购活羊以及不同批次混群暂养、从事养殖等经营行为。因此,需进一步加强羊群交易市场管理,规范经纪人行为,做好动物移动监管,这对于实施羊群疫病的分区防控具有重要意义。     

动物源性沙门氏菌的分离及耐药性研究

为了掌握河南省动物源性沙门氏菌的分布及耐药情况,从具有代表性的屠宰场采集1820份猪盲肠内容物,经PCR初步筛选、分离纯化及鉴定,对菌株进行药敏试验。结果共分离沙门氏菌125株,分离率为6.9%;经药敏试验发现,沙门氏菌对四环素、多西环素、大观霉素、氨苄西林、磺胺异噁唑等抗生素耐药较为严重,对头孢噻呋、黏菌素、氧氟沙星等抗生素较为敏感。提示沙门氏菌存在较为严重的耐药现象,在畜禽生产上要谨慎使用抗生素。     

包埋法制备替米考星淀粉微球工艺的优化

[目的]研究替米考星淀粉微球的制备工艺。[方法]以可溶性淀粉为原料,以N,N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,以过硫酸钾和亚硫酸氢钠为引发剂,采用包埋法制备替米考星淀粉微球。以载药量和包封率为指标,通过正交试验,采用综合平衡法对替米考星淀粉微球的制备工艺进行优化,在扫描电子显微镜下观察替米考星交联微球的形貌及表面形态。[结果]替米考星淀粉微球的最佳制备工艺如下:替米考星0.02 g,可溶性淀粉4 g,交联剂(N,N’-亚甲基双丙烯酰胺)0.95 g,乳化剂(m_(Span80):m_(Tween80)=2∶1)0.75 g,反应时间1.5 h,在优化工艺参数下制得的替米考星淀粉微球载药量为1.63%,包封率为81.4%;微球大小分布均匀,外观圆整,表面粗糙多孔。[结论]该制备工艺可行,扩大了替米考星的应用,为替米考星的剂型改进提供了参考。     

饲料中致病性微生物监测结果分析

动物饲料是“从农场到餐桌”食品安全链的第一个环节,饲料被病原菌污染可导致人类食源性疾病。病原菌污染饲料的方式途径不一,可能来自于植物性原料如大豆和谷类作物的污染、动物源性饲料如鱼粉和骨粉及羽毛粉等污染、微生态制剂及酶制剂中病原菌污染以及加工环境造成的交叉污染等,这些被病原菌污染的饲料进入生物体内后可通过其产品转移、传播,危害人类健康。为了摸清饲料中致病性微生物的污染情况,进一步加强和完善饲料安全监测lT作计划,我们对饲料中霉菌、致泻性大肠杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、志贺氏菌等致病性微生物进行了监测。     

动物源食品的安全性及药物残留监控现状

改革开放以来，我国养殖业的发展极大地丰富了人民的菜蓝子，带动并促进了农村经济及出口创汇等相关产业的发展，产生了巨大的经济效益和社会效益。但是，由于养殖业者普遍热衷于提高动物性产品的产量，以满足人们对肉蛋奶及其制品不断增长的需要，往往对动物源产品的质量认识较晚，特别是动物源食品安全性上，老百姓只注重畜禽产品是否有传染病、寄生虫、产品是否注水等问题上，而对动物源食品的药物残留问题却认识不足。随着我国人民生活水平不断提高，广大人民不仅仅满足于填饱肚子，关注无疫病、无药残、无污染的绿色食品也摆到了日程上…     

奶牛场金黄色葡萄球菌的分离及耐药性研究

为了解河南省规模化奶牛养殖场金黄色葡萄球菌的分布及耐药情况,从具有代表性的奶牛养殖场采集400批样品,采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统对样品中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离出的金黄色葡萄球菌进行耐药性分析。结果显示,该研究共分离金黄色葡萄球菌82株,分离率为20.5%。经耐药性分析发现,分离得到的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、氨苄西林耐药严重,耐药率分别为100%、86.6%和98.8%;对头孢菌素类、林可霉素类、喹诺酮类抗生素较为敏感。该研究结果提示河南省规模化奶牛养殖场金黄色葡萄球菌存在严重的耐药现象,建议在畜禽生产中要谨慎使用抗生素。