犬瘟热病毒、犬细小病毒二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立一种特异、高通量检测犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,本研究选取高度保守且具有型特异性的CDV H基因和CPVVP2基因序列,设计CDV和CPV特异性引物对及TaqMan MGB探针;经反应条件优化,建立了检测CDV和CPV的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法检测CDV、CPV的标准曲线线性相关系数(R~2)分别为0.997和0.993,最低检出限均为10拷贝/μL,具有较高的灵敏性;对犬副流感病毒等4种病原对照和阴性对照均未出现扩增,特异性良好;CDV、CPV标准品批间试验结果显示,该方法具有很好的重复性;对48份临床疑似CDV或CPV感染样品检测结果显示,14份为CDV阳性,19份为CPV阳性,4份为CDV/CPV双阳性,与CDV H基因、CPVVP2基因测序结果符合率为100%。本研究建立的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、高通量和可准确定量等优点,可用于临床CDV/CPV病毒感染各个时期的快速鉴别检测。     

禽流感免疫抗体检测及结果分析

高致病性禽流感是由A型禽流感病毒引起的禽类的一种急性高死亡性传染病,目前对该病尚无确实有效的治疗方法,一旦发病就必须扑杀,易感动物紧急免疫。对家禽进行疫苗免疫是预防禽流感病毒感染的最有效途径。我们采用血清学血凝与血凝抑制试验的方法,对家禽的免疫抗体水平进行检测,从而全面了解禽流感的免疫状况。该实验为评估本县禽流感的发病几率提供科学依据,为以后的免疫方案制定及补免工作提供参考。     

西尼罗河热现状及未来我国防控应对思考

<正>西尼罗河热是《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》中重点防范的外来动物疫病。目前非洲、欧洲、中东、北美洲和西南亚均有报道。该病由黄病毒科、黄病毒属西尼罗病毒(WNV)引起,可感染蚊子,鸟类、人、马、猪、狗、山羊、蝙蝠、猫、洗熊、野兔、鳄鱼和臭融等多种动物。鸟类(乌鸦、鸽子、莺等)是该病毒的自然宿主,病毒主要通过蚊子叮咬传播。虽然80%的人感染后不表现出明显的     

检疫证明管理应引起注意的两个问题

自《中华人民共和国动物防疫法》发布实施以来,辽宁省各级动物防疫监督机构不断强化检疫证明管理,为控制动物疫病流行,保证畜牧业发展和人民身体健康做出了贡献。据笔者不完全统计,自1999年以来,全省《动物产地检疫合格证明》《动物产品检疫合格证明》《出县境动物检疫合格证明》《出县境动物产品检疫合格证明》《动物及动物产品运载工具消毒证明》发放数量连续4年超过10万本,4年累计发放491118本。在加强检疫证明管理的工作上,除加强领导、严格执行各项规章制度之外,笔者认为还应该注意以下两个问题。     

急性猪肺疫的诊治和预防措施

猪肺疫是影响养猪生产较为严重的高危病害之一,患猪如不能得到良好的治疗极易发生大批的死亡,给养猪生产造成巨大的经济损失。因此做好该病的预防、诊断与治疗对减少患病造成的经济损失有重要意义。     

褪黑素受体Mel 1a在皖西白鹅各组织中的表达与分布

【目的】探究褪黑素受体Mel 1a在皖西白鹅各组织中的分布特点和表达水平，为褪黑素在皖西白鹅的功能调控奠定理论基础。【方法】以皖西白鹅作为研究对象，提取各组织器官的总RNA，采用Real-time PCR和Western blot检测褪黑素受体Mel 1a mRNA和蛋白在鹅组织中的分布和差异性表达，免疫组化检测褪黑素受体Mel 1a蛋白在鹅的组织中的表达。【结果】在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、大脑、小脑、肌肉、卵巢各组织中均存在Mel 1a mRNA表达；Mel 1a蛋白广泛分布于大脑、心脏、肾脏、肝脏、肺脏、脾脏、胰脏和肌肉组织细胞中，利用Image-pro plus 6软件分析免疫组化阳性信号的IOD值显示，脾脏阳性信号最强，其次是胰腺。脾脏显著强于大脑，肺脏中的信号显著强于心脏和肌肉组织。采用Real time PCR和Western blot技术检测各组织中Mel 1a mRNA和蛋白表达水平，结果表明，卵巢中表达水平最高，其次是胰腺、脾脏、肾脏、肝脏、心脏和脑组织中，肺脏和肌肉中的表达水平最低，另外在各级卵泡中Mel 1a mRNA的表达水平随卵泡发育逐渐增加，直到...     

5种萜类及增效组合对桃蚜生物活性及防效的影响

为减少化学农药使用量，寻找无公害防治果蔬桃蚜新路径，本文研究了5种萜类及增效组合对桃蚜的驱避、毒杀及防治效果。采用双向选择法测定驱避作用，玻璃管药膜法测定触杀活性，苗木喷雾测定防治效果。结果表明，甲基胡椒酚对桃蚜驱避率在3 h时达70.1%，芳樟醇、枯茗醛、左旋香芹酮的驱避率分别为62.9%、56.7%、49.6%，枯茗醇的驱避率为-6.2%。枯茗醛、左旋香芹酮、甲基胡椒酚、枯茗醇和芳樟醇对桃蚜的致死中浓度LC₅₀分别为0.49 mL/L、0.56 mL/L、0.67 mL/L、0.87 mL/L和1.75 mL/L。枯茗醇与马来酸二乙酯、水杨酸乙酯组合增效，2种增效比分别为2.47和2.67，枯茗醇+水杨酸乙酯组合对桃蚜的防治效果较好，在油菜及枸杞上的防治效果分别为(84.1±5.7)%和(66.4±3.1)%，值得开发研究。     

L-苹果酸对肉鸡生长性能、肉品质及抗氧化能力的影响

本研究旨在探究L-苹果酸对肉鸡生长性能、肉品质及抗氧化能力的影响。选取1日龄爱拔益加(AA)肉鸡288只，随机分成4组，每组6个重复，每个重复12只(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮，3个试验组分别饲喂额外添加0.40%(T1组)、0.80%(T2组)和1.20%L-苹果酸(T3组)的基础饲粮，试验期42 d。结果显示：1)与对照组相比，T1组1～21日龄、22～42日龄和1～42日龄平均日增重(ADG)显著提高(P <0.05),22～42日龄和1～42日龄料重比(F/G)显著降低(P<0.05);T2组22～42日龄ADG显著提高(P<0.05),1～42日龄F/G显著降低(P<0.05)。各组之间平均日采食量(ADFI)和死亡率差异均不显著(P>0.05)。2)与对照组相比，42日龄时，各试验组半净膛率和腹脂率显著提高(P<0.05)，肌肉滴水损失和剪切力显著降低(P<0.05)，同时T1组全净膛率显著提高(P<0.05)。各组之间屠宰率、胸肌率和腿肌率以及肌肉pH45 min、pH24 h、肉色[亮度(L^*     

大同恒山茶旅融合现状与发展对策

借助佛教文化，整合山西药茶资源与旅游资源，探索大同恒山景区茶业与旅游业的融合发展。分析了大同恒山景区茶旅融合存在的问题，并提出了建设性的建议。     

猪伪狂犬病病毒疑似感染人的实验室诊断及分析

为给人感染伪狂犬病病毒(PRV)来源分析及其感染机理研究提供相关信息，对一例疑似感染PRV患者的血清、脑脊液、拭子及其工作猪场的病猪血清、组织等样品进行病原学、血清学检测及病毒分离，对其工作猪场开展流行病学调查，并采集患者同事血清样品进行PRV抗体检测。结果显示：病人样品经数字PCR检测均为PRV核酸阳性；病人发病后5～90 d内的血清样品均为PRV gB抗体阳性，gE抗体发病后18 d转为阳性并一直持续到发病后90 d；病人同事均未表现临床症状，其血清样品PRV gB抗体阳性率为22.2%,gE抗体均为阴性；从病人工作猪场的病猪样品中分离到PRV，且样品经荧光定量PCR核酸检测及ELISA抗体检测均检出阳性；病人工作猪场为PRV阳性场，病人及PRV gB抗体阳性同事均有直接接触病猪史。结果表明，患者感染的PRV来自其工作猪场猪群的可能性较大，人感染后表现出和动物感染相似的抗体消长规律。PRV对公共卫生的影响及其感染机制需进一步关注和研究。