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111.
采用CTAB法和蛋白酶K法提取黄淮白山羊瘤胃微生物总DNA,酶切获得DNA片段,大小为23~50 kb,以E.coli EPI300为宿主细胞,构建瘤胃微生物宏基因Fosmid文库。研究发现该文库共获得克隆28 800个,插入片段大小约35 kb,空载率小于2%,容量1 008 Mb。通过羧甲基纤维素酶和木聚糖酶(Xylanase)活性筛选,分别获得具有两种酶活性的阳性克隆60和32个,木聚糖酶和羧甲基纤维素酶(CMC,Carboxymethyl cellulase)共同作用阳性克隆15个。通过已测序MF3木聚糖酶阳性克隆酶学活性分析,该木聚糖酶在最适应pH 4.5, 40℃条件下,酶活力为79.287μ·mL~(-1)。为进一步研究黄淮白山羊瘤胃内纤维素酶(Cellulase)基因奠定基础。 相似文献
112.
113.
为建立一种快速、特异、灵敏的检测猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法,本研究参照GenBank中公布的CSFV E2基因保守区域序列设计2对特异性引物,以CSFV总RNA为模板,优化反应条件,建立CSFV nested RT-PCR方法,对其进行特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的方法对35份临床疑似CSFV感染样品进行了应用检测,并对阳性PCR产物进行克隆测序鉴定。结果表明,本研究成功建立了CSFV nested RT-PCR检测方法,能够特异性地扩增CSFV,但对ST正常细胞对照和其他8种病原对照未扩增出任何条带;稳定性和重复性好;敏感性高,最低检测病毒含量为1 TCID50;自35份疑似CSFV感染样品中检出19份阳性样品,PCR阳性产物克隆测序结果表明均为CSFV E2基因片段。本研究成功建立了CSFV nested RT-PCR检测方法,可用于CSFV的快速检测,为CSF的早期检测诊断提供了特异、灵敏的方法。 相似文献
114.
我国是世界上最大的畜产品生产和消费大国,畜产品质量安全问题已成为畜牧业发展的重要矛盾之一,也越来越成为社会关注的焦点和热点。分析畜产品安全面临的潜在威胁并采取应对措施是保障畜产品安全的重要举措。 相似文献
115.
布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引起的重要的人兽共患慢性传染病。凡是养牛的地区均有不同程度的流行和感染,每年因此造成巨大的经济损失,严重影响畜牧业的持续发展,威胁着人类的健康。由于奶牛场集中饲养,如有个别发病没有及时隔离,便会很快蔓延全群,如果不能有效地控制和消灭,不仅会造成严重的经济损失,更会导致严重的社会公共卫生问题。人类生活与牛奶、牛肉制品关系非常密切,人接触病牛、饮用病牛的生乳或制品均可被感染,所以奶牛场布鲁氏杆菌病的净化、防控极其迫切、尤为重要。笔者根据《布鲁氏杆菌病防治技术规范》、《2009—2015年布鲁氏杆菌病结核病防治规划大纲》和实践经验,对布鲁氏杆菌病的诊断、净化、防控几方面进行归纳、总结,希望能对奶牛场布鲁氏杆菌病的净化、防控有所帮助。 相似文献
116.
鸡传染性法氏囊超强毒株(vvIBDV)可引起鸡群高死亡率及严重的免疫抑制,给养禽业带来巨大的经济损失。为了探究泰山松花粉多糖(TPPPS)对鸡传染性法氏囊病(IBD)的免疫调理作用,本研究以IBDV GX8/99超强毒株经鼻腔感染19日龄SPF鸡,并分别于感染前、后连续14d口服饲喂TPPPS,同时设置IBD疫苗对照组,病毒对照组和健康对照组,分别对各组试验鸡体质量及法氏囊指数、法氏囊带毒量及抗体变化,以及其他相关免疫学指标进行检测比较。结果显示,连续14d口服TPPPS后,试验鸡体质量及法氏囊抑制程度得到明显改善,法氏囊带毒量减少,法氏囊损伤程度降低,IBD抗体分泌提前、分泌量增加,IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,ND抗体水平提高,其中TPPPS预防组的各项检测指标均高于TPPPS治疗组和IBD疫苗组。结果表明,TPPPS对vvIBDV诱导的鸡群免疫抑制具有一定的免疫调理作用,且以在病毒接种前口服TPPPS发挥的免疫调理作用最显著,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控vvIBDV的早期感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失。 相似文献
117.
118.
119.
为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因缺失疫苗和野毒感染的快速鉴别诊断方法,本研究根据猪伪狂犬病野毒具有gD表面抗原基因和gE毒力基因,而基因缺失疫苗只有gD基因无gE基因的特性,针对gD/gE基因的5'端核苷酸序列自行设计引物,建立鉴别PRV gE基因缺失疫苗和野毒感染的二重PCR诊断方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了检测.结果表明,成功建立了鉴别PRV gE基因缺失疫苗和野毒感染的二重PCR诊断方法,该方法灵敏度高,最低检出限为100拷贝/μL;重复性好;特异性强,可特异性地扩增出PRV细胞毒中的gD和gE基因及gE基因缺失疫苗毒中的gD基因,但对PK-15细胞和猪流行性腹泻病毒等其他8种病原扩增不出任何条带;自835份临床疑似PRV感染病料中共检测出PRV gD和gE基因双阳性样品即野毒感染阳性样品267份,PRV gD基因单阳性样品28份,选取该方法检测出的26份PRV野毒感染阳性样品用于病原分离培养,两种方法的符合率为96.1%.说明本试验建立的二重PCR鉴别诊断方法快速、灵敏、特异,对于临床上疫苗毒和野毒感染的快速鉴别诊断具有重要意义. 相似文献
120.
牛结核病是由结核分支杆菌引起的一种人畜共患慢性传染病.近年来,牛结核的发病率逐年上升,严重影响畜牧业的持续发展,威胁着人类的健康,如果不能有效地控制和消灭,不仅会造成严重的经济损失,更会导致严重的社会公共卫生问题.结核病的易感动物中牛最易感,奶牛尤为易感.奶牛场集中饲养,如有个别牛发病没有及时隔离,便会很快蔓延全群,且由于人类生活与牛奶、牛肉制品关系非常密切,人接触病牛、饮用病牛的生乳或制品均可被感染,所以奶牛场结核病的防控和净化极为重要.本文根据《牛结核病防治技术规范》、《2009-2015年布鲁氏菌病结核病防治规划大纲》和实践经验,对结核病的诊断、净化、防控等方面进行了归纳与总结,希望能对奶牛场结核病的防控和净化有所帮助. 相似文献