H7N9亚型流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立一种快速检测H7N9亚型流感病毒的通用荧光RT-PCR方法,根据GenBank数据库中收录的相关基因组序列,应用Primer 5.0软件设计合成针对H7和N9序列的特异性引物和Taq Man探针,并对该方法开展特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:H7和N9核酸片段最低检测限均为1.7×10~3 copies/mL;使用该方法重复检测10次,H7和N9核酸片段检测的变异系数(CV)1%,说明稳定性良好;利用第二代人感染H7N9流感病毒核酸检测试剂国家参考品样品,测得该方法灵敏度为100%(10/10)、特异度为100%(20/20)。结果表明,本研究建立的H7N9亚型流感病毒荧光定量RT-PCR方法快速、准确、稳定性高、特异性好,为控制流感病毒传播增添了技术手段。     

常陆合剂对人工感染鸡柔嫩艾美耳球虫的疗效观察

为研究常陆合剂对鸡球虫病的防治效果,采用以1×10~5个/mL浓度,对14日龄蛋公雏经口感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊液进行模型制备,并与攻虫当天开始饮水给药,试验组按体积百分比分为常陆合剂高(1%)、中(0.75%)、低(0.5%)剂量组,地克珠利组(0.02%),不给药攻虫组及不给药不攻虫组,试验周期9 d。结果显示:与不给药攻虫组相比较,所有给药组的鸡盲肠病变形态及病变计分明显下降;所有给药组的鸡存活率均高于不给药攻虫组;所有给药组的相对增重率均高于不给药攻虫组;各组抗球虫指数(ACI)值分别为常陆合剂高剂量组177.33、常陆合剂中剂量组164.57、常陆合剂低剂量组161.14、地克珠利组178.41,均达到中等效力抗球虫药物水平;22日龄,不给药攻虫组的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)值显著高于常陆合剂各剂量组、地克珠利组及不给药不攻虫组(P0.05),而白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)等指标均显著低于其他各组(P0.05)。结果表明,常陆合剂作为一种纯中药抗球虫制剂具有良好的抗球虫效果,值得进一步深入研究。     

应用非洲猪瘟病毒基因质粒标准物质评价荧光PCR试剂盒及核酸提取方法

为评价不同检测试剂盒对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)的检测性能,以及不同提取方法对ASFV核酸的提取效率,本研究以国家标准物质“ASFV B646L基因质粒标准物质”作为模拟样品,通过荧光定量PCR检测,比较扩增曲线、Ct值等指标,分析了4个厂家的5种试剂盒的敏感性、重复性及反应耗时等检测性能,同时比较了磁珠法与柱式法等2种核酸提取方法的提取效率。结果显示：5种试剂盒均能有效检测出不同浓度的ASFV B646L基因质粒标准物质,不同的试剂盒最低检测限不同,最低的试剂盒为5.8×10^-1 copies/μL,线性关系最优的试剂盒R~2=0.997,各试剂盒实际反应时间与理论时间均有差异。2种提取方法均可有效提取ASFV B646L基因质粒标准物质,其中柱式法的提取效率高于磁珠法,但柱式法的离散度大于磁珠法。综上,4个厂家的5种试剂盒及柱式法与磁珠法均可使用ASFV B646L标准物质作为基准进行试剂盒性能及提取效率评价。在实际检测中,应根据具体情况选择合适的检测试剂盒及核酸提取方法。     

生猪屠宰场非洲猪瘟检测能力比对

为了了解山西省屠宰场非洲猪瘟的检测能力与水平,2019年山西省动物疫病预防控制中心对全省11个市的屠宰场开展了非洲猪瘟病毒检测能力比对。本次比对采用荧光PCR检测方法进行非洲猪瘟病毒核酸检测。结果显示,共有96个屠宰场参与比对工作,其中71个屠宰场检测结果符合要求,符合率为74.0%。比对结果客观地反映了全省屠宰场非洲猪瘟病毒核酸检测能力,表明屠宰场非洲猪瘟病毒核酸检测工作仍存在多方面不足,应该进一步增强检测人员的业务能力,以确保检测结果真实准确。     

山西省平陆县野生大天鹅H5N8高致病性禽流感疫情紧急流行病学调查

2020年11月,山西省平陆县三湾大天鹅景区发现2只野生大天鹅不明原因死亡,经山西省动物疫病预防控制中心初诊,国家禽流感参考实验室确诊,诊断为H5N8亚型高致病性禽流感疫情.为查明疫情起因,摸清疫情情况,按照国家相关技术规范,组织相关部门开展了紧急流行病学调查和疫情处置工作,查找疫情的可能来源和扩散路径,研判疫情扩散风...     

猪链球菌荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用

为快速诊断和检测猪链球菌病,根据GenBank中已登录的猪链球菌抗原基因保守区域序列,设计并合成特异性引物及Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应体系及扩增条件,构建了快速、准确检测猪链球菌的Taqman荧光定量PCR检测方法(Taqman FQ-PCR),测定了该方法的灵敏性、重复性和特异性,并对疑似猪链球菌临床感染样本进行了检测。结果显示:所建立的Taqman FQ-PCR方法检测灵敏度为1×10~2拷贝/μL;对3种不同浓度的猪链球菌重组质粒进行3次重复扩增,变异系数均小于3%,说明重复性好;特异性检测显示,只有猪链球菌样本的扩增曲线呈阳性反应,其他致病菌均无荧光信号;采用此方法,对30份临床疑似猪链球菌感染样本进行检测,发现有27份样本为阳性,比采用国标法检测得到的结果更加灵敏。结果表明,建立的FQPCR方法具有灵敏性高、重复性好、特异性强等特点,可用于猪链球菌的快速诊断和检测。     

提高奶牛配种情期受胎率的几点体会

众所周知,在奶牛场人工授精情期受胎率的高低,是影响繁殖率的首要因素;是衡量一个配种员的技术水平和工作效力的标志;也是决定一个奶牛场经济效益好坏的关键一环。我场1985年全年情期受胎率为49.6％,86年全年情期受胎率为58.1％,比85年提高了8.5％,1986年全年参配牛384头次,则和85年相比等于全场在不增加任何费用的基础上多养了2.7头产奶牛,产量按头5000kg计算多盈利7560元(0.56/1kg)并且少用冻精颗粒32.64