IBV S1基因RT—PCR产物的分子克隆

报道了在两条引物的５‘端加有不同酶切位点的ＩＢＶ Ｄ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物与ｐＵＣ１８进行分子克隆的研究情况。采用自己改进的微量基因克隆的方法，经回收的插入片段的分子量大小及ＨａｅⅢ酶切分析，证明获得了两株重组质粒转化子。     

禽传染性支气管炎病毒纤突蛋白的研究进展

本文对禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）纤突蛋白的形态，结构，免疫学活性，血凝活性，与病毒血清型的关系，尤其是其分子生物学研究的新近进展进行了综述，以期对ＩＢＶ基因工程疫苗的制备及疾病的快速诊断和防治打下基础。     

Mab-ELISA对IBV毒株定性检测方法

针对禽传染性支气管炎病毒（IBV）血清型众多、临床检测不易的难题，用我国自已研制的2株IBV单克隆体，通过多种方法的比较与鉴定，建立起活用于定性检测IBV的包被鼠源IBV单抗的Mab-ELISA方法，其操作程序是：包被鼠源IBV单抗－被检测病毒－鸡抗IBV高免血清－兔抗鸡IgG(AGP效价1：32）－羊抗兔IgG-HRP;用本方法对国内46个IBV分离株及NDV、AIV－H9N2、PPMV－I等的检测，表明其具有较好的特异性和敏感性。     

鸡痘病毒PCR检测方法的建立及临床应用

根据已发表的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)4 b核心蛋白基因的核苷酸序列设计合成了(P3,P5)1对引物,通过对影响PCR扩增条件的优化,在不同的退火温度下,直接以病毒液为模板扩增出预期的1 107 bp的片段。特异性检测表明,两对引物对FPV102株、FPV282E4(北京)、大华农鸡痘疫苗毒株、重组鸡痘疫苗病毒及临床病料均能扩增出相应的特异性片段,而用鸡马立克氏病毒、传染性支气管炎病毒,鸽痘病毒及鸡胚成纤维细胞制备的模板进行PCR扩增均为阴性。敏感性检测表明,引物能检测0.195 ng/μL的模板量。用此方法检测50份临床样品,其中的阳性率为92%,用琼脂扩散试验方法检测的阳性率为70%。以上结果表明,该方法可以用于FPV临床样品的检测。     

盐酸可乐定人工抗原及其鼠源多抗的制备

以盐酸可乐定（Clonidine hydrochloride,CLO）的衍生物盐酸阿可乐定（Apraclonidine hydrochloride,ACLO）为半抗原,采用重氮化法合成人工抗原,免疫小鼠制备高敏感性、特异性的CLO鼠源多抗并进行鉴定,为CLO单克隆抗体的制备奠定基础。将ACLO分别与牛血清白蛋白（Bovine serum albumin,BSA）和鸡卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）偶联,合成免疫原CLO-BSA和包被原CLO-OVA,经紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联效果后,免疫BALB/c小鼠,并对获得的鼠源多抗采用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其特性。结果显示,免疫的4只小鼠血清抗体效价均达到1∶25 600以上,其中2号小鼠的抗体敏感性最高,半数抑制质量浓度（IC₅₀）为7.026 ng/mL,与其他几种常见瘦肉精类药物的交叉反应率均小于0.1%,特异性良好。表明成功合成免疫原性良好的CLO人工抗原,并获得敏感性高、特异性强的CLO鼠源多抗,为其单克隆抗体的制备及免疫学快速检测方法的建立奠定良好基础。     

血清9型鸭疫里默氏杆菌在华南地区的分离鉴定

本研究于2009年7月～2010年4月针对广东、广西、福建等养鸭密集地区进行鸭疫里默氏杆菌(RA)流行病学调查,并分离到5个RA分离株。经形态特征、生化特性和血清学鉴定表明,5个分离株与血清9型RA相似。对16S rRNA部分基因进行序列测定,并与GenBank中登录的菌株16S rRNA基因序列进行比对及系统进化分析显示:该5株分离株与报道的RA H-1785、H-2199、H-2565和P-2123的16S rRNA序列相似性较高,同源性达99.1%～99.7%,进一步证实这5个分离株为血清9型RA。     

聚乙二醇胁迫下甘蔗根系蛋白质差异表达图谱分析

以甘蔗品种ROC22为材料,采用含100 g/L聚乙二醇（PEG）6000的Hoagland营养液模拟干旱胁迫处理,SDS-PAGE电泳技术分析干旱胁迫对甘蔗幼苗根系蛋白质的影响。结果表明:与对照相比,24 h胁迫过程中稳定存在的新增蛋白条带为44.5 ku,可能是应答干旱胁迫的主要新增调节蛋白;57.1和29.0 ku 蛋白条带在24 h处理期间相对表达量变化活跃,胁迫初期57.1 ku蛋白条带显著增加,29.0 ku蛋白条带显著下降,胁迫过程中出现起伏变化;而62.7、40.4与48.2 ku蛋白条带在PEG胁迫早期相当长时间保持稳定,后期才出现显著增加与下降; PEG胁迫14 h处理蛋白质条带变化最活跃,新增蛋白分子质量为44.5 ku;消失蛋白分子质量为25.5、18.9 ku;而分子质量为81.8、48.2、38.0、29.0 ku的蛋白条带表达量下降。甘蔗根系蛋白质在响应PEG胁迫的基因表达调控中扮演重要角色,其变化可能与甘蔗PEG胁迫密切相关。     

BVDV荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株序列,选择5'NTR保守区域设计1对特异性引物和1条Tagnum探针,通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度,建立了检测BVDV的荧光RT-PCR方法.结果显示,用1.5μL上下游引物混合液(10 μmol/L)和0.5 μL探针溶液(10 μmol/L)对BVDV进行检测,可获得较小Ct值、较高吸光值,并可降低检测成本.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好.将该方法应用在疫苗生产中,可快速准确地筛选出合格的原辅材料和半成品,为生产提供及时准确可靠的数据.     

双向SLA公平调度算法及其在EPON中的应用

研究了开放接入网络中带宽分配的公平性问题.将最大〖CD*2〗最小公平算法应用到双向SLA带宽调度算法中,给出了一种基于EPON的易于实现的双向SLA公平带宽调度算法.以用户SLA为首要SLA,以业务提供商的SLA为次要SLA,通过带宽分配和调整,实现了双向公平的带宽分配.仿真实验表明,双向SLA算法实现了业务提供商和用户的公平性需求,具有合理性和可用性.     

鸭出血性卵巢炎广东病例报道及其RT—PCR方法的建立

本文对广东省内9个白鸭种蛋鸭场发生的鸭出血性卵巢炎症状、病变、流行情况进行了报道,并建立能从病死鸭肝脾组织直接进行特异性RT-PCR的快速检测方法。