OrerSNPV与Bt毒素联用防治灰斑古毒蛾研究

利用构建的BL21-28a-BtCry1Ab基因工程表达菌,优化表达BtCry1Ab毒素蛋白,表达菌裂解后的粗产物与OrerSNPV以一定的浓度混合饲喂3龄灰斑古毒蛾,测定出不同比例复配后的杀虫效果。生测结果表明:BtCry1Ab与Orer-SNPV不同复配比例均能够取得很好的毒效。当OrerSNPV浓度为5.0×106PIBs/mL、BtCry1Ab蛋白浓度为20μg/mL时,对3龄灰斑古毒蛾幼虫的致死中时间(LT50)比单用Orer-SNPV缩短3.2 d,90%死亡时间(LT90)缩短3.8 d。     

斑蝥素人工抗原的制备与初步鉴定

【目的】合成并鉴定斑蝥素人工抗原,为建立斑蝥素的酶联免疫分析方法提供依据。【方法】对斑蝥素进行化学修饰,引入羟基合成N-羟乙基斑蝥酰亚胺(BY),并经MS、NMR、IR法对其结构进行鉴定。进一步经琥珀酸酐法合成琥珀酸酯(BYS)并纯化,在此基础上,分别采用混合酸酐法和碳二亚胺法将半抗原与载体蛋白偶联,合成斑蝥素的人工抗原(BYS-HS-BSA、BYS-TY-BSA、BYS-HS-OVA、BYS-TY-OVA),并经MS、IR法对人工抗原进行定性鉴定。免疫原免疫兔子获得抗斑蝥素多克隆抗体并测定其效价。【结果】成功合成了一种斑蝥素半抗原,与载体蛋白BSA、OVA偶联后得到免疫原(BYS-HS-BSA、BYS-TY-BSA)和包被原(BYS-HS-OVA、BYS-TY-OVA),免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,效价分别为8 000和16 000。【结论】初步合成并鉴定了斑蝥素人工抗原,在设计合成斑蝥素的半抗原时不能破坏其关键的环结构。     

海棠花离体繁殖技术研究

以海棠花组培苗和叶片为材料,应用正交试验法,以MS培养基为基础,分别加入不同浓度配比的6-BA/IBA组合和TDZ/IBA组合作为增殖培养基和叶盘不定芽再生培养基,研究了不同植物激素及其配比对组培苗增殖、叶片不定芽再生的影响。结果表明:在添加6-BA 1.0mg.L-1+IBA 0.1mg.L-1的MS培养基上最适宜海棠花组培苗的增殖及生长,增殖倍数高达8.11,海棠花组培苗平均高度达2.14cm;在添加TDZ 1.0mg.L-1+IBA 0.5mg.L-1的MS培养基上叶再生效率最高,再生效率为100%,每叶平均再生芽数为6.73。     

棉铃虫核型多角体病毒orf80多克隆抗体的制备

从HearNPV G4株基因组中克隆得到orf80基因的全序列,将该基因构建于pMAL-c4E载体并在TB1中融合表达,orf80融合表达蛋白分子质量为73.3ku,与预测的蛋白一致,Western blot验证正确。纯化融合蛋白后制备抗原并注射新西兰大白兔从而得到orf80的多克隆抗体,经ELISA检测其效价达到2.56×105,表明该抗体具有较高的免疫原性,可用于orf80编码蛋白的检测及蛋白互作等相关研究。     

佳多频振式杀虫灯对广场园林害虫诱杀情况研究

自2011年以来,利用太阳能频振式杀虫灯对市中心广场园林害虫进行诱集。通过对201 5年诱集的害虫情况进行分析研究,结果表明,诱集到的昆虫包括鳞翅目、鞘翅目、等翅目、双翅目、半翅目等9个目共计1 0 296头,其中鳞翅目、鞘翅目和等翅目昆虫最多,共占总数的99．55％;调查地鳞翅目昆虫基本全年都有发生,以7月和1 0月为发生高峰期,等翅目的白蚁4月底5月初为婚飞季,发生较为严重,鞘翅目主要是金龟子为害,2～7月为其发生期。     

棉铃虫核型多角体病毒ORF44基因的序列分析及原核表达

棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)ORF44是一个功能未知的基因,研究对HearNPV ORF44基因的序列及原核表达进行了初步研究。结果表明,HearNPV ORF44基因全长1 137 nt,编码378aa,预测编码蛋白分子量为42.7 ku。序列分析显示,ORF44具有双相启动子特征序列,同时兼有杆状病毒早期和晚期基因转录启动子特征序列。ORF44的推导氨基酸序列中含有1个强跨膜螺旋区域,32个磷酸化位点和4个糖基化位点。除HzNPVORF45外,未发现与ORF44氨基酸同源性高于30%的基因。构建了pET-44表达载体,并在大肠杆菌BL21中得到了高效表达,表达的融合蛋白分子量为44 ku,与预测编码蛋白分子量大小相符。序列分析结果表明,ORF44是He-arNPV的一个特有基因,ORF44融合蛋白的成功表达为深入研究HearNPV ORF44奠定了基础。     

农户宅基地退出意愿及影响因素研究——以湖南省湘潭县与龙山县为例

选取湖南省湘潭市湘潭县与湘西土家族苗族自治州龙山县作为研究区域，对其农户宅基地退出意愿进行问卷调查及访谈，根据所得数据对其影响因素进行分析。结果表明，农户宅基地退出意愿与年龄、宅基地利用现状和宅基地重置成本呈显著负相关；与家庭年均总收入、收入最主要来源、文化程度、宅基地使用年限、在城镇购房情况和补偿方式呈显著正相关。因此，在制定农户宅基地退出机制时，应综合考虑各种因素。     

四川省蝉花自然分布与生境因子研究

对四川省蝉花资源分布进行调查，并分析蝉花自然分布与海拔、林地类型、光照、温度、坡度、相对湿度的相关性。结果发现，四川省蝉花自然分布区域有绵阳市安州区、北川羌族自治县通、乐山市犍为县、南充市蓬安县和金城山等地。先后分离获得蝉花菌分离株20株，经过分子鉴定蝉花种类分别为大蝉草和小虫草。相关生态因子分析发现，四川省蝉花生长密度与海拔没有相关性；四川省蝉花生长密度与光照强度、温度、坡度、相对湿度存在显著相关性。其中蝉花生长密度与光照强度正相关，但随着温度、坡度、相对湿度的升高呈现出先增加后减少的趋势。该研究首次对蝉花资源自然分布及其影响因子进行探索，对于深入了解蝉花的生物学及人工培育提供了重要的科学基础。