环境友好型诱杀蛀果甲虫的新技术

首次提出利用高效低毒杀虫剂和微生物杀虫剂联用、利用诱饵法控制蛀果甲虫的一种新方法。利用绿僵菌和苦参碱作为生物杀虫剂,用诱饵诱集蛀果甲虫白星花金龟(Protaetia brevitarsis),在用药量极少的情况下,可以控制果园内白星花金龟的发生,在果实成熟期有效预防葡萄等多汁水果被甲虫蛀食。与不防治对照相比,葡萄园采用该新技术防治,果实受害率可以降低69.2%～100%。     

梯度条带PCR快速检测CSBV方法的建立

通过与传统RT-PCR检测方法比较,建立了一种新的快速、准确鉴定中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的方法,为中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断与防治提供了重要的手段。对陕南、陕北、关中三地的健康蜂及CSBV感染蜂分别进行传统RT-PCR和梯度条带PCR两种方法的检测,通过琼脂糖凝胶电泳及测序结果对两种方法进行分析比较。结果发现传统RT-PCR和梯度条带PCR方法对陕西三地的感染病毒蜂鉴定结果一致,而梯度条带PCR方法相对更快速和直观。与传统RT-PCR鉴定方法比较,该新方法能够在电泳检测阶段通过DNA片段的梯度次序即确定是否存在病毒,能够省去PCR产物测序步骤,缩短了对该病毒的鉴定周期,对及时发现和鉴定病蜂、采取预防措施提供了重要的技术手段。因此,梯度条带PCR快速鉴定方法不仅为CSBV的检测提供了一种简单、快速、直观的方法,对类似动物病毒的快速鉴定也提供了很好的借鉴。     

园艺植物昆虫学课程教学改革探讨

针对园艺植物昆虫学课程在课程计划调整后的实际情况,并结合高校复合型人才的培养目标,从调整和优化理论与实验教学内容及教学方法等方面进行改革,实践证明:这些教学改革措施提高了教学质量,取得了明显的教学效果。     

陕西核桃病虫害综合治理研究进展

介绍了陕西省近年来核桃主要病虫害种类和危害症状,总结了核桃病虫害综合防治技术,主要包括植物检疫、林业防治、物理防治、生物防治和药剂防治等,为陕西省核桃产业健康可持续发展提供指导。     

九香虫醇提物对大鼠运动能力及骨骼肌抗氧化酶系的影响

为探讨补充九香虫醇提物对大鼠运动能力和骨骼肌抗氧化酶系的影响,对大负荷游泳训练大鼠补充剂量分别为0.5、1.0和1.5 g/kg的九香虫乙醇提取物,大负荷训练8周后,测定大鼠力竭游泳时间和骨骼肌抗氧化酶系的活性。结果表明,与对照组（单纯大负荷运动组）比较,大负荷训练后补充九香虫醇提物组力竭游泳时间均明显延长,补充1.5 g/kg九香虫醇提物组游泳力竭时间较对照组延长37.1%;补充九香虫醇提物能够显著提高抗氧化酶系活性,尤其是SOD活性有极显著升高（P<0.01）;补充1.0 g/kg 和1.5 g/kg九香虫醇提物组受试动物血清MDA浓度显著低于对照组（P<0.05）。说明补充九香虫醇提物有助于提高训练大鼠的运动能力及骨骼肌抗氧化酶活性。     

昆虫壳聚糖对鲫鱼生长及肠道消化酶活性的影响*

 将平均体重为（25.2±1.7）g/尾的225尾鲫鱼（Carasslius auratus）随机分为5个处理,每个处理组3个重复,每个重复15尾。不同处理组的鲫鱼随机饲喂昆虫壳聚糖水平为0,0.25%,0.50%,0.75%和1.00%的饲料,研究昆虫壳聚糖对鲫鱼部分生长性能指标及肠道消化酶活性的影响。结果表明,昆虫壳聚糖的添加显著提高了鲫鱼的特定生长率和蛋白质效率（P<0.05）,鲫鱼的生长性能未随昆虫壳聚糖水平的升高而不断增加,以0.50%壳聚糖水平组最佳;昆虫壳聚糖的添加显著提高了鲫鱼肠道蛋白酶和淀粉酶的活性（P<0.05）,对肠道脂肪酶活性无显著影响（P>0.05）,各个处理组中,以0.50%壳聚糖水平组肠道消化酶活性最高。综合分析上述结果后,认为昆虫壳聚糖在鲫鱼饲料中的适宜添加水平为050%。     

小菜蛾性信息素结合蛋白Ⅰ基因的表达及多克隆抗体制备

提取羽化3 d的小菜蛾成虫触角总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出小菜蛾性信息素结合蛋白基因(PxPBPⅠ),大小为495 bp,Blast结果显示与多种昆虫的PBPⅠ具有较高同源性。将该基因克隆到表达载体pMAL-c4E中,转化宿主菌TB1(DE3),获得单克隆重组质粒pMAL-c4E-PxPBPⅠ。IPTG成功诱导pMAL-c4E-PxPBPⅠ表达出约60 ku的融合蛋白。优化诱导条件为3 mmol/L IPTG、诱导表达6 h,可获得大量可溶性蛋白。表达的融合蛋白通过亲和色谱法纯化、免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1∶512 000。     

RBSDV P7-2基因重组AcMNPV的构建及其对sf9细胞的致死作用

[目的]为克服杆状病毒杀虫速度慢等固有缺点,首次尝试将异源病毒细胞凋亡诱导基因重组到昆虫杆状病毒中,以期为遗传修饰杆状病毒、提高杀虫效果提供新思路。[方法]将带有SV40终止子的苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)多角体基因ph、AcMNPV ie-1启动子、在C端融合Flag标签的水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)的P7-2基因依次插入到供体质粒p Fast Bac-HTB的多克隆位点。使用供体质粒p Fast Bac-HTB自身的启动子及ie-1启动子分别启动ph和P7-2基因的表达。通过转座的方法将ph、P7-2基因及启动子插入到bacmid b MON14272的多角体位置,获得重组bacmid Ac-P7-2,并通过Western blot检测P7-2基因的表达。转染sf9细胞后通过光学显微镜观察重组病毒多角体的形成并统计不同时间细胞死亡数量。通过TCID50的方法绘制病毒生长曲线。[结果]成功构建了P7-2基因重组AcMNPV bacmid Ac-P7-2,Western blot检测到P7-2蛋白可以正确表达。在转染sf9细胞48、72、96和120 h后,重组病毒v Ac-P7-2细胞死亡数量显著高于野生型病毒v Ac-WT,并发现重组病毒v Ac-P7-2多角体形成并释放的速度也快于野生型病毒v Ac-WT。病毒的生长曲线显示,在转染sf9细胞48、72、96和120 h后,v Ac-P7-2的增殖速度显著快于v Ac-WT。[结论]成功构建了多角体形成迅速的重组病毒v Ac-P7-2,与野生型病毒v Ac-WT相比其具有较快的增殖速度,对寄主细胞有较强致死作用。     

苹果蠹蛾半人工饲料与饲养温度的优化

为实现苹果蠹蛾Cydia pomonella(L.)的人工大规模饲养,对国外学者已经报道的半人工饲料配方进行改良,比较了取食5种饲料对苹果蠹蛾生长发育和繁殖的影响,并组建苹果蠹蛾在20、24、28、32℃条件下取食最优配方时的实验种群生命表。结果表明,来自我国西北疫区的苹果蠹蛾,在以豆粕、蔗糖、面粉、小麦胚芽为主要成分并添加酵母粉配制成的配方B饲喂后,与传统饲料配方相比显著影响苹果蠹蛾的发育历期和种群参数,提高存活率至50.24%、缩短幼虫发育历期至20.18 d、增加蛹重至26.54 mg,并提高单雌产卵量至85.30粒。生命表结果显示,24℃时种群趋势指数最高为16.42、单雌产卵量最大为62.44粒,28℃内禀增长率最高为0.08、雌性比例最大为0.55。表明我国西北疫区的苹果蠹蛾在24~28℃条件下,取食优化的半人工饲料利于其种群数量增加。     

海棠花离体繁殖技术研究

以海棠花组培苗和叶片为材料,应用正交试验法,以MS培养基为基础,分别加入不同浓度配比的6-BA/IBA组合和TDZ/IBA组合作为增殖培养基和叶盘不定芽再生培养基,研究了不同植物激素及其配比对组培苗增殖、叶片不定芽再生的影响。结果表明:在添加6-BA 1.0mg.L-1+IBA 0.1mg.L-1的MS培养基上最适宜海棠花组培苗的增殖及生长,增殖倍数高达8.11,海棠花组培苗平均高度达2.14cm;在添加TDZ 1.0mg.L-1+IBA 0.5mg.L-1的MS培养基上叶再生效率最高,再生效率为100%,每叶平均再生芽数为6.73。