青海省人与动物弓形虫病的血清学检测

应用ELISA诊断方法,对来自青海省的部分孕妇、藏系绵羊、马、藏狗、骆驼、喜马拉雅旱獭、高原鼠兔、中华鼢鼠、藏羚羊和实验小鼠的1 090份血清样品进行弓形虫特异性抗体的检测。结果检出75份阳性血清,阳性率为6.88%。     

用重组蛋白 NcSAG1t作为ELISA诊断抗原进行改良绒山羊Neospora caninum的血清学诊断

N caninum；NcSAG1t；ELISA；改良绒山羊；抗体     

西宁地区猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种猪严重的接触性的呼吸系统传染病，以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征。各种年龄的猪均易感，死亡率在20%-100%不等。为了摸清青海省西宁地区主要养猪场中猪传染性胸膜肺炎的感染情况我们应用间接血凝抑制试验（IHA）对该养猪场进行血清学检测，现将结果报告如下。     

牦牛源多杀性巴氏杆菌分离鉴定与药敏试验

本研究对刚察县沙柳河镇某养殖场中病死牦牛病料进行细菌的分离鉴定、PCR检测、分型鉴定以及药敏试验,结果于死亡牦牛病料组织中分离鉴定到荚膜A型脂多糖L3型多杀性巴氏杆菌,该菌株对多粘菌素、多粘菌素B、诺氟沙星、左氧氟沙星、阿莫西林、氨苄青霉素、头孢唑林、呋喃妥因、恩诺沙星、红霉素、四环素、氧氟沙星、头孢唑林/先锋霉素、阿莫西林—克拉维酸共14种药物敏感;对新生霉素、万古霉素、阿米卡星3种药物耐药;对强力霉素、氯霉素、庆大霉素中敏。该研究为本地区流行菌株疫苗研制以及药物防治提供了参考。     

羊传染性脓疱诊断方法的建立

利用MDBK细胞从青海某养殖户发病羊唇部痂皮中分离获得一株病毒,通过临床症状、PCR检测以及组织病理学观察等方法对该株病毒进行了鉴定,证实分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf Virus,ORFV),命名为ORFV-QHMH01。参照GenBank中ORFV F1L基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,对ORFV-QHMH01株F1L基因进行了克隆、测序,并推导出其氨基酸序列。序列分析表明,分离株F1L基因片段长987bp,编码328个氨基酸,与AF097215、AY040081、AY040082、AY040083、AY040084、AY040085、FJ808075、HM133903、HQ221964、JQ271535株的核苷酸序列同源性分别为:96.7%,95.6%,96.1%,96.2%,97.5%,97.2%,96.5%,48.6%,95.3%,98.3%。系统发育进化树结果表明,ORFV-QHMH01分离株与参考毒株JQ271535和AY040084的亲缘关系较近,这表明不同地区分离株的F1L基因具有较好的保守性。     

青海省西宁地区藏獒巴贝斯虫病的血清学检测

用基于重组的犬吉氏巴贝斯虫P50蛋白作为ELISA诊断抗原,对来自青海省西宁地区的5个藏獒养殖基地的118份藏獒血清,进行犬巴贝斯虫病的血清学诊断,共检出阳性血清12份,阳性率为10.17%。结果初步表明西宁地区部分藏獒养殖基地中存在犬吉氏巴贝斯虫的感染。     

青海省海北地区牦牛源贾第虫检测与基因型分析

为研究青海省海北地区牦牛贾第虫的感染情况及虫种基因型,对青海省祁连县、海晏县和刚察县的297份牦牛粪样采用蔗糖密度梯度离心法纯化,之后用免疫荧光方法对贾第虫进行鉴定,对阳性及疑似阳性样品采用基于18SrRNA和谷氨酸脱氢酶(gdh)基因的套式PCR扩增,并对扩增产物进行测序。将测序结果与GenBank中的贾第虫序列进行比对分析。免疫荧光抗体试验结果显示,共检出24份贾第虫阳性粪样,总阴性率为8.1%。套式PCR扩增结果显示,24份阳性样品中18SrRNA基因扩增阳性22份,gdh基因扩增阳性18份,产物大小分别为292bp和432bp。序列分析表明,分离的虫种均为牦牛源肠贾第虫,基因型为集聚体E,未发现人畜共患基因型。     

绵羊肺炎支原体诊断方法的建立

从青海省海晏县发生胸膜肺炎的绵羊群中采集3份肺组织病料,进行病原的分离培养和特异性PCR检测。结果从3份肺组织中均分离到支原体,经鉴定为绵羊肺炎支原体,表明建立的PCR方法能对绵羊肺炎支原体做出正确诊断。     

青海省大通种牛场牦牛弓形虫病的血清学调查

用弓形虫的重组蛋白P30作为ELISA诊断抗原,用于青海省大通牛场牦牛群中T．gondii抗体的检测。经过对898份血清样品的检测,检出T．gondii抗体阳性血清21份,阳性率为2．34％,结果初步说明大通牛场的牦牛群中存在T．gondii感染。     

一步法RT—PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的方法建立及应用

根据GeneBank公布的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）美洲型毒株VR-2332序列设计了一对特异性引物P1／P2,扩增片段为508bp,从而建立了检测PRRSV的一步法RT—PCR蛤测方法,特异性试验表明,该引物均不能扩增其它常见的与繁殖障碍有关的病毒基因。敏感性实验表明,该引物可以检测到10^-5TCID50的病毒含量。利用该方法对青海某猪场中20份临床上疑似PRRS的组织进行检测,其中16份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为80％,表明建立的该方法完全可以快速检测组织中的PRRSV。