用于PCR的大豆DNA快速提取改良方法

大豆DNA的提取是进行大豆分子生物学研究的基础。为了探索方便快捷的适合大豆分子生物学研究的DNA提取方法,在Aljanabi和Martinez 1997年提出的通用DNA快速盐提法的基础上,调整缓冲液中NaCl、Tris-HCl、EDTA浓度,提出一种适合大豆叶片DNA提取的改良盐提方法。该方法具有快速、简易和环境友好的特点。试验表明,该改良方法所提DNA凝胶条带清晰,无拖尾,浓度在1.5397~2.1039μg/L之间,OD260/OD280检测值在1.6913~1.8025之间,所提DNA适用于PCR,PCR结果理想。     

海南部分荔枝种质的RAPD分析

 采用10个10碱基的随机引物，通过RAPD分析的方法，在分子水平上对海南30份荔枝种质进行鉴定、分类和亲缘关系分析。结果表明，大多数种质相似系数在55% ～80%之间，说明他们之间的亲缘关系较近；在相似系数为0.61的水平上，30份海南荔枝种质被分为4组，与以龟裂片特征为主要分类依据的形态分类有一定的相关性，但是RAPD分类比形态分类的分类范围更细。因此，传统形态分类不能完全反映出品种间的亲缘关系，有待结合RAPD分析方法进一步完善。     

巴西橡胶树PR107和海垦1号品种的核型分析

巴西橡胶Hevea brasiliensis)是重要的热带经济作物.PRl07与海垦1号是中国橡胶树种植、育种的两个重要品种.利用染色体直接敲片技术研究橡胶品种PR107、海垦1号的染色体数目和核型.结果表明:PR107染色体数目为2n=36,核型公式为2n=36=30m(2sat)+6sm,海垦1号染色体数目为2n=36,核型公式为2n=36=22m(2sat)+14sm(2sat),两者核型类型均为2B型.     

多肽对荔枝成花、果实发育、产量和果实品质的影响

以海南主栽品种妃子笑和白糖罂为试材,探讨了多肽对荔枝成花、果实发育、产量和果实品质的影响。结果表明:多肽能显著提高荔枝的单株花穗数、单穗雌花数量、单果鲜重和单株产量;能通过提高优质果率、降低裂果率,提高了荔枝的商品果率;可使荔枝盛花期提前2～4d,采收期提前2～3d,能显著提高荔枝果肉的可溶性总糖含量、降低可滴定酸含量、增加了糖酸比;能提高荔枝果肉可溶性固形物、水解氨基酸和维生素C的含量,改善果实的营养品质;能提高果皮花色素苷含量,降低果皮叶绿素含量,果皮更加红艳,改善了外观品质;喷施多肽的800倍和1000倍水稀释液的总体效果好于500倍液。     

荔枝采后果皮褐变过程中差异表达基因的SSH分析

 以‘妃子笑’荔枝果实为材料,采用抑制差减杂交（SSH）与cDNA 微阵列技术相结合,研 究了采后荔枝果皮褐变过程中的基因差异表达。分别以采后0 h 与32 h 的果皮总RNA 为驱动组与检测组, 构建了正向与反向SSH 文库,分别获得了282 个与76 个阳性克隆。通过cDNA 微阵列杂交筛选获得了在 采后32 h 果皮中上调表达克隆17 个,下调表达克隆49 个,分别代表了在采后32 h 果皮中上调表达基因 16 个和下调表达基因17 个,其中有较多的热击蛋白基因、糖代谢相关基因、细胞壁代谢相关基因等。 RT-PCR 检测基因表达结果与cDNA 微阵列杂交结果一致。     

荔枝漆酶基因LcLac 的克隆与表达分析

 为了探明荔枝漆酶基因LcLac的表达与果皮褐变之间的关系,通过筛选‘妃子笑’荔枝果皮cDNA文库和3′-RACE技术,克隆获得了荔枝LcLac全长cDNA序列（EU 527187.1）。该序列全长1 779 bp,5′-UTR长26 bp,3′-UTR长52 bp,含一个1 701 bp的完整开放阅读框,编码含566个氨基酸残基的多肽。该氨基酸残基序列与欧亚槭树等物种的漆酶蛋白相似性较高。荧光定量PCR结果表明,LcLac在荔枝花中表达量最高,果肉中表达量最低。在采后贮藏前期,随LcLac表达量上升果皮褐变指数升高,且褐变指数较高的‘妃子笑’果皮中LcLac表达量高于褐变指数低的‘紫娘喜’果皮。贮藏中后期严重褐变果皮中LcLac表达量比贮藏前期低。采后贮藏前期果皮中LcLac的上调表达可能对其褐变起促进作用。     

2个荔枝品种体胚发生过程中糖含量及相关酶活性变化

为研究糖代谢在荔枝体胚发生过程中的作用,将‘大丁香’和‘新球蜜荔’胚性愈伤组织接种在TD培养基上,并将‘新球蜜荔’接种在TX培养基上,对比体胚诱导过程中3种胚性培养物之间淀粉、蔗糖等糖组分及其代谢相关酶活性变化,以期从糖代谢方面找出影响荔枝体胚发生效率差异的关键因素。结果表明:在体胚发生过程中,‘新球蜜荔’在2种培养基上的淀粉含量都低于‘大丁香’;三者的葡萄糖与果糖含量变化相似,但‘大丁香’都高于‘新球蜜荔’,而‘新球蜜荔’的蔗糖含量则高于‘大丁香’;‘新球蜜荔’的淀粉酶、β-淀粉酶活性都高于‘大丁香’,而α-淀粉酶活性相似。‘新球蜜荔’的蔗糖合酶及在TD培养基上的酸性转化酶活性高于‘大丁香’,但中性转化酶活性是以‘大丁香’偏高,且‘新球蜜荔’在TX培养基上也以中性转化酶为主。由此‘新球蜜荔’通过淀粉酶、蔗糖合酶及转化酶将淀粉转化成蔗糖为体胚发生提供物质能量,而高活性的中性转化酶与低活性的淀粉酶,使‘大丁香’的蔗糖没有得到积累,使其体胚发生效率低于‘新球蜜荔’。     

荔枝果皮褐变过程中膜脂过氧化及相关酶活性变化的比较研究

以紫娘喜、无核荔枝、小丁香等3个海南主栽荔枝品种为试材,研究了室温贮藏过程中果皮褐变与膜脂过氧化及有关酶活性变化的关系,结果表明,随着贮藏时间延长,3个品种果皮都表现出褐变指数上升,丙二醛(MDA)含量升高,质膜透性增大,抗坏血酸氧化酶(APX)活性下降,脂氧合酶(LOX)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性先升后降。但紫娘喜褐变最慢,无核荔枝褐变最快。耐贮的紫娘喜MDA含量、质膜透性及LOX活性较不耐贮的无核荔枝要低,GR活性较不耐贮藏的无核荔枝高。除GR活性外,无核荔枝其余指标变化幅度大于紫娘喜。不同品种果皮褐变进程差异与LOX活性变化、活性氧清除途径及质膜破坏进程差异有关。     

3种野生茄和1个栽培茄的核型分析

分析3种野生茄和1个栽培茄品种染色体核型.结果表明:所有供试材料的染色体数目均为2n=24,核型类型均为"2A"型:染色体主要由中部着丝点和近中部着丝点染色体组成,属较对称核型.但它们的核型也具有明显差异, "04E28"的核型公式为2n=16m+6sm+2st,核不对称系数60.20%;04E42的核型公式为2n=14m+8sm+2T,核不对称系数65.91%;07E67的核型公式为2n=18m+6sm,核不对称系数59.68%;栽培品种.04E08"的核型公式为2n=22m+2sm.核不对称系数58.59%.     

采后荔枝果皮褐变过程中的生理变化研究

[目的]荔枝采后果皮褐变严重降低了果实的商品价值,限制了荔枝贸易的发展.本文通过研究采后荔枝果皮褐变过程中的生理变化,寻找影响果皮褐变的主要因素,为阐释果皮褐变机理提供基础. [方法]妃子笑果实贮存于温度25℃.相对湿度70%±5%条件下,每8 h测定一次果实形态及生理变化. [结果]妃子笑荔枝采后72 h内完全褐变,其中,在采后48-64 h褐变指数急剧上升,好果率急剧下降.随褐变程度的增加,果实与果皮失水量增加,但果肉含水量变化不大.果皮丙二醛含量、pH值和相对电导率都随褐变加重而增加,而花色素苷、类黄酮、总酚、叶绿素a和总叶绿素含量则下降.果皮POD活性在采后32 h上升,然后下降,而PPO活性一直下降.过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性都呈现先升后降然后再升高的趋势.相关分析,逐步回归分析和通径分析表明,果皮失水是引起果皮褐变的主要原因.主成分聚类分析表明果皮褐变町分为两个阶段. [结论]果皮水分状况是影响果皮褐变的主要因素.果皮褐变过程呈现阶段性变化,主要由果皮失水决定. Abstract： [Objective] Pericarp browning in the postharvest litchi significantly reduced its commercial value and limited the expanding of litchi markets.Physiological changes during the process of pericarp browning were determined in order to identify the underlying mechanisms,[Method]Matured Feizixiao fruits were stored at 25 ℃ and 70%±5% relative humidity.The physiological changes happened in pericarp during storage were tested at an 8-hour interval. [Result] The fruit of Feizixiao (Litchi chinensis Sonn.cv Feizixiao) turned completely brown within 72 h after being harvested under the experimental conditions.Sharp increase of the browning index occurred from 48 to 64 hours after harvest (HAH).With the browning of pericarp,water content of the whole fruit and pericarp decreased continuingly.In contrast,there were no significant changes in the water content of pulp during the same period.MDA content,pH value and relative leakage rate of pericarp were increased during storage.Most of pigment contents including anthocyanin,flavonoid,phenols,chlorophyll a and total chlorophyll decreased.POD activity was initially increased in 32 HAH and then decreased afterwards.PPO activity was decreased continuously,while the activities of catalase and superoxide dismutase exhibited the pattern of "increasing-decreasing-increasing" as the storage time progressed.Correlation,stepwise regression and path analyses showed that water loss of pericarp was the major factor of pericarp browning.Principal and cluster analyses showed that there were two stages of pericarp browning during the course of litchi storage. [Conclusion] Water status of pericarp was the most important factor affecting pericarp browning.The pericarp browning happened by stages,which was mainly determined by the water loss of pericarp.