中间偃麦草SGT1基因的克隆及其抗病功能的分析

为了探索中间偃麦草SGT1基因在小麦抗病反应中的应用潜力,采用RT-PCR和RACE方法克隆出中间偃麦草SGT1基因,命名为TiSGT1。该基因编码蛋白具有SGT1蛋白典型的功能域结构,与大麦SGT1序列高度同源。通过基因重组技术构建了TiSGT1的高效组成型表达载体,通过基因枪法将该载体转化到小麦品种扬麦12基因组中。对转基因植株PCR、Southern杂交与RT-PCR分析表明,TiSGT1基因可在T0、T1和T2代转基因小麦中遗传和表达。黄矮病、白粉病抗性鉴定结果表明,SGT1的超量表达可以提高小麦对黄矮病、白粉病的抗性,TiSGT1可以作为小麦广谱抗病性改良的潜在基因资源。     

农杆菌介导法将抗草甘膦基因EPSPS转入玉米自交系的研究

通过农杆菌介导法将抗草甘膦基因EPSPS转入玉米自交系H99中,同时研究了农杆菌浓度、侵染时间及共生培养条件等因素对转化频率的影响。结果表明:菌液浓度OD600为0.6、侵染时间20 min、共生培养时间3 d为最佳转化条件。获得的转基因植株经PCR分析鉴定,其中7株表现阳性,证明外源基因已经整合到玉米基因组中。     

藏獒基因组DNA提取及RAPD扩增体系的优化

采用改进的盐析法提取了藏獒血液基因组DNA,并对RAPD扩增体系进行了优化。结果表明,改进的盐析法所提取的藏獒基因组DNA完整、无降解,完全可以满足RAPD分析的需要;20μL的最佳扩增体系组成为2.50 mmol/L Mg2+、0.60 mmol/L dNTP、50 ng模板DNA、1.25U Taq酶和0.3μmol/L随机引物,最佳退火温度为36.5℃。     

黄土高原主要土壤污染物对紫花苜蓿的影响

紫花苜蓿是一种富含各种营养成分的优质饲草,其抗病性强,利用年限长,黄土高原一带是我国紫花苜蓿种植面积最大的地区。近年来随着油田的开发及农、工业活动的加强,大量的污染物进入土壤系统,主要土壤污染物(石油、镉、锌、铅)改变紫花苜蓿的细胞代谢、生长发育以及形态结构,降低了紫花苜蓿的产量和品质。本文对土壤污染物的特点、污染物对紫花苜蓿的作用机理、防治和应对的措施进行了论述。     

花生根茎白藜芦醇的开发研究

利用GC/MS和HPLC分离测定合肥地区主要种植品种花生根茎中白藜芦醇相对百分含量;通过选择超声波技术辅助提纯、A-B8大孔径树脂吸附、氮吹仪浓缩和HPLC高纯化精制工艺流程,定量制得白藜芦醇精品;根据原料费用、工艺流程成本、白藜芦醇市场价格等,推算出花生根茎白藜芦醇开发的经济价值。结果表明：废弃的花生根茎中白藜芦醇的含量依次为根〉茎〉叶;不同品种对花生根茎中白藜芦醇的含量影响较大;花生根白藜芦醇高纯化精品定量制取实验,成功获得约3.20mg纯度为90.00%白藜芦醇精品;农户种植花生,每年每667m2收获一次花生,利用废弃的花生根茎生产白藜芦醇,就可获得至少790元的纯利润。     

玉米ZmPR4启动子的克隆及其在小麦幼胚愈伤组织中的活性分析

以玉米B73基因组DNA为模板,通过特异PCR扩增,克隆出玉米启动子ZmPR4序列。序列分析表明,该启动子与AJ969166序列同源性为100%。构建了ZmPR4或玉米泛素基因(Ubiquitin)启动子控制的报告基因GUS的表达载体。通过基因枪介导法转化小麦幼胚愈伤组织。瞬间表达实验表明,在小麦幼胚愈伤组织中,玉米ZmPR4启动子的本底表达活性明显比Ubi启动子的低,但经纹枯病菌诱导后,ZmPR4启动子控制的GUS基因的表达明显增强。PCR检测结果证实ZmPR4启动子在小麦愈伤组织中具有表达活性,能够驱动GUS基因的表达。因此,玉米ZmPR4启动子在小麦抗病基因工程育种中具有潜在的应用价值。     

曙红Y-盐酸丁卡因体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用

在弱酸性介质中, 盐酸丁卡因(TA·HCl)与曙红Y形成1∶1的离子缔合物, 引起溶液共振瑞利散射(RRS)显著增强, 最大散射峰位于279 nm, 在一定范围内TA·HCl浓度与散射增强程度(ΔI)成正比, 可用于TA·HCl的测定;反应有很高的灵敏度, 对TA·HCl的检出限(3σ)为0.005 μg/mL;考察了共存物质的影响, 表明方法有良好的选择性. 基于TA·HCl与曙红Y反应产物的RRS光谱, 发展了一种高灵敏、简便快速测定痕量TA·HCl的新方法. 用于人血清和尿液中TA·HCl测定, 平均回收率94.7%～103.3%之间.     

抗纹枯病、根腐病的转SN1基因小麦的获得与鉴定

SN1是源于马铃薯的一种抗菌肽, 可以抑制多种植物病原菌的生长。小麦纹枯病(主要病原菌为禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis)和根腐病(主要病原菌为平脐蠕孢菌Bipolaris sorokiniana)是小麦的主要土传真菌病害。本研究利用基因工程技术构建了SN1基因的单子叶植物表达载体pA25-SN1, 它受玉米泛素(ubiquitin)启动子的控制;采用基因枪法将pA25-SN1转化小麦推广品种扬麦18幼胚愈伤组织4 000块, 获得203株再生植株, 通过PCR检测出阳性植株55株, 转化率为1.38%。对转SN1基因小麦T₀~T₂代植株, 进行外源基因的PCR、Southern blot、RT-PCR、荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析和小麦纹枯病菌与根腐病菌接种及其抗病性鉴定。结果表明, 转入的SN1基因已经整合到转基因小麦的基因组中, 能够在转基因小麦中遗传、转录与表达。SN1基因的表达提高了转基因植株对小麦纹枯病和根腐病的抗性, 其抗病性可以遗传。     

不同类型大豆品种及杂种后代对生态条件反应的研究

不同类型大豆品种及杂种后代,在不同肥力条件下表现各异的适应性。瘠薄土壤条件下,植株高大繁茂、多分枝、进化程度低的为适应的生态型。肥力水平较高条件下,主茎发达、百粒重高、进化程度高的集约型品种表现适应。中等肥力水平下,株高适宜,有一定分枝能力和粒茎比较高者为适应生态类型。无论品种类型及生态条件如何,大豆经济产量与生物产量呈极显著正相关。根据本试验得出的规律,提出了移动生态育种的概念。     

广东医学院附院职工连续8年健康监测的结果与分析

目的：了解我院职工健康状态和制定保健对策，提高职工的健康水平。方法：从1995年起每2年进行健康监测一次，每次时间安排在10月一11月进行。采取专科登记，按年龄组选项进行肝功能 乙肝病毒；空腹血脂、血糖；胸透、心电图、B超等项目检查，保健科核实汇总。结果：职工的谷丙转氨酶(ALT)、血脂和心电图异常率逐年增高，以2002年增高明显(P＜0．01)；血糖水平呈现先升后降，以2002年降幅明显(P＜0．01)；前列腺肥大检出率以1995年与1997年最高，分别为40．4％和44．8％，至2002年下降为18．0％(P＜0．01)。结论：我院职工的健康状况并不乐观。为提高职工健康生活质量，应大力开展健康教育和健康促进活动，改变不良的生活，调节饮食，减轻精神压力，而适当运动，控制血脂血糖的升高是疾病预防的首要任务。