番茄转录因子SlNAC29在调控植株衰老中的作用及机理

【背景】番茄（Solanum lycopersicum）作为连续发芽分化和坐果的重要园艺作物,早衰是限制其生长期长短、产量和品质的重要因素。NAC（NAM、ATAF1/2和CUC2）转录因子家族参与调控拟南芥、水稻等多种植物衰老进程,但在番茄中的研究尚不深入。目前已知,SlNAP2（NAC-like, activated by apetala3/pistillata）参与番茄植株衰老进程。【目的】SlNAC29为SlNAP2的同源基因,对其在番茄植株衰老中的功能及调控机制进行研究,以期为园艺栽培中番茄的衰老调控及种质创新提供科学依据。【方法】以野生型番茄（Condine Red,CR）为背景,采用qRT-PCR技术明确SlNAC29在不同衰老阶段叶片中的相对表达量,并分别利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和基因过表达技术构建Slnac29纯合突变体及OE: SlNAC29稳定过表达植株。在此基础上,在自然生长状态下和黑暗处理诱导衰老条件下,对野生型、Slnac29突变体和OE:SlNAC29过表达植株的生长、叶绿素含量、光合作用、叶片衰老和叶绿素降解相关基因的相对表达量等参数进行分析,明确SlNAC29转录因子在调控番茄植株衰老中的生物学功能;进一步利用聚类热图分析过表达植株OE: SlNAC29中29个衰老相关基因、叶绿素降解基因以及ABA合成/信号转导相关基因的相对表达量。并选取在黑暗诱导衰老条件下不同株系植株中表达差异明显的4个基因进行凝胶迁移阻滞分析（electrophoretic mobility shift analysis,EMSA）,以鉴定SlNAC29直接转录调控的靶标基因及其与衰老调控的关系。【结果】SlNAC29在初老叶和衰老叶片中的相对表达量较嫩叶和成熟叶显著上升。自然生长状态下,突变体材料Slnac29与野生型长势以及光合速率无明显差异,而过表达材料OE: SlNAC29株高则显著低于野生型植株,叶绿素含量和光合速率分别是野生型植株的25%和50%。在黑暗诱导衰老的条件下,野生型植株叶片明显变黄,叶绿素含量显著下降。Slnac29突变缓解了叶片衰老程度,叶片无明显变黄,叶绿素含量是野生型的3倍,衰老相关基因（senescence-associated genes,SAGs）和叶绿素降解基因的表达量均较低。OE: SlNAC29则相反,叶片衰老程度比野生型和Slnac29突变体均明显严重。基因聚类分析表明多个衰老相关基因和叶绿素降解基因在OE: SlNAC29植株中显著上调表达。EMSA鉴定到SlNAC29能够直接与衰老相关基因家族SAGs成员SlAGT1（Glyoxylate aminotransferase）启动子绑定,且SlAGT1在OE: SlNAC29中的相对表达量较野生型和Slnac29突变体显著增加。【结论】转录因子SlNAC29调控番茄植株的衰老,促进番茄叶片在黑暗诱导条件下的衰老进程。SlNAC29直接绑定衰老相关基因SlAGT1启动子区域调控其转录表达。     

农产品农药残留速测技术的应用

介绍了农产品农药残留速测技术应用的必要性和可行性,并通过对农药残留速测技术的适用性试验,提出此项技术值得广泛应用。     

猪腺病毒感染的血清学诊断

1直接免疫荧光法检验 制片。猪在发病3天内，用咽喉拭子擦咽喉部扁桃体处，取出棉拭子，于洁净载玻片上涂2～3个圆点，涂布处有细胞贴附，或刮取细胞培养分离物涂片，或者采取肾、肺、肠等新鲜组织制成4～6微米厚冷冻切片。干燥后冷丙酮固定8～10分钟，风干。     

家畜全麻手术的监护

1麻醉深度 麻醉程度由手术引起的疼痛刺激程度所决定，应通过患畜咬肌紧张度，眼球位置和眼睑反射来判断麻醉深度，血压的变化和呼吸频率也是重要的表现。若动物的眼球处于中间的位置而不再偏转，且瞳孔放大，凝视不动，对光反射微弱或消失，此为高度抑制体现，说明麻醉深度过大。     

转三价抗虫基因棉花遗传特性研究

研究采用农杆菌介导法将外源三价抗虫基因(Bt CpTI GNA)导入常规棉花品种中获得转基因再生株,分子检测表明外源基因已在棉花体内表达并遗传给后代材料。其转化再生株后代材料经抗性检测,进行大田选育已至F8代。PCR分子检测与转化的标记基因和外源目的基因抗性三者极有规律性,转化后代材料分离有的符合孟德尔规律,有的则较偏离,其所携带的基因在转基因棉花低代材料中分离规律较为含糊,高代材料则较稳定。     

PRRSV高致病性毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

根据GenBank中已发表的PRRSV的NSP2基因序列,设计一对特异性引物。针对经典型毒株与高致病性毒株,采用RT-PCR方法扩增,可分别扩增出相应的576bp,486bp的目的片段。从而在检测PRRSV的基础上,进一步区分PRRSV的经典型和高致病性毒株。通过对扩增条件的筛选,成功地建立了猪繁殖与呼吸综合征经典型与高致病性毒株的RT-PCR鉴别诊断方法,且为PRRSV分离株的鉴定分型及NSP2功能研究奠定了基础。     

施肥对中棉所41产量及光合特性的影响

研究不同氮磷钾配比及施肥量对中棉所41产量及光合特性的影响。结果表明,在N∶P∶K=1∶0.8∶0.6条件下,随着氮肥用量的减少,产量随之下降。在同样氮肥用量的情况下,不同P,K配比,产量表现不同,在高肥情况和低肥情况下均表现为磷肥增产效应比钾肥明显。在花铃期测定光合特性变化规律与产量表现一致。在同样肥料用量情况下,16叶期1次追施氮肥,皮棉产量最高,达到1648.61kg/hm2。     

绵阳市冬季麻雀种群数量及分布调查

2013年12月至2014年3月期间,对绵阳市麻雀种群数量与空间分布的现状进行了初步调查。结果表明:调查区内麻雀于20世纪80年代初期开始锐减,目前种群数量有了一定的恢复,绵阳市冬季基本上形成河边、杂草地麻雀种群数量稀少,居民区数量较大,其他区域广布的的格局。不同生境条件的差异对麻雀的分布有一定的限制作用,而人类随活动干扰对其也有较大影响。     

农田残膜对土壤环境及作物生长发育的影响研究

通过盆栽模拟和大田试验研究了残膜量对土壤物理性状及不同作物生长发育的影响.结果表明,土壤中的残留地膜对土壤环境有较大影响,可使土壤容重增加、土壤水分移动速度减慢,随着残留地膜量的增加,小麦、玉米和棉花的生长发育均受到严重影响,小麦产量降低0.8%～22.1%,玉米籽粒产量降低2.1%～27.5%,棉花产量降低1%～7.5%.     

玫瑰黄链霉菌活性代谢产物诱导烟草灰霉病抗性机制研究

【目的】解析温室条件下玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63活性代谢产物Roflamycoin和Men-myco-A（简称R&M）诱导烟草灰霉病抗性的作用机制,为利用R&M绿色防控烟草灰霉病提供理论依据。【方法】通过80 mg/L R&M注射4~5叶期本生烟草叶片后过敏反应（HR）染色验证及100 mg/L R&M注...