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活的非可培养状态沙门菌RT-PCR检测 总被引:1,自引:0,他引:1
依据沙门菌Salmonella活的非可培养状态(VBNC)差异基因序列设计特异性引物C1和C5,并对处于VBNC的沙门菌模型开展RT-PCR检测.结果表明,引物C1和C5可从模型中分别扩增出198和137 bp的目的片段,这些片段与差异基因的核苷酸序列相似性均大于99%.而且所获得的电泳图谱也不同于正常状态的沙门菌、霍乱弧菌Vibrio cholerae等一些食源性致病菌.另外,2对引物的最低cDNA检出量分别为30.65和3.065 pg/μL.由此证明,引物C1和C5具有较好的特异性和敏感性,可用于建立VBNC沙门菌的检测方法. 相似文献
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荧光RT-PCR技术与古典病原分离技术检测AIV比较试验 总被引:7,自引:0,他引:7
应用荧光RT-PCR技术和古典病原分离技术对304份样品进行AIV对比检测试验,结果应用RT-PCR技术可在4小时内从304份样品中检出AIV阳性26份,而病原分离技术检出了AIV阳性22份,需要时间为至少15天.两者阳性样品重复率为100%,因此,与古典病原分离技术比较,荧光RT-PCR技术具有高度特异、敏感的特性,而且可以大大地缩短对AIV的检测时间。 相似文献
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以大肠杆菌E.coli ATCC25922株的染色体DNA为模板,PCR扩增AcrA蛋白部分基因,获得约691bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMD18-T载体中测序,并进一步将acrA亚克隆于pET28a原核表达载体中,进行该基因的诱导表达。表达的产物经SDS-聚丙酰胺凝胶电泳分析,可见一条约33ku的特异性蛋白条带。用纯化的acrA基因原核表达产物免疫獭兔,ELISA法检测不同时期獭兔抗体效价。蛋白质印迹结果表明,用表达的AcrA蛋白制备的acrA抗体能够用于检测大肠杆菌AcrA蛋白的表达水平。 相似文献
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硫酸新霉素在吉富罗非鱼体内的药代动力学及休药期 总被引:1,自引:0,他引:1
在实验水温(28±2)℃条件下,按25 mg·kg-1 的剂量对吉富罗非鱼(Genetically improved farmed tilapia,GIFT)单次口灌给药后,采用UPLC-MS/MS法测定吉富罗非鱼组织中的药物水平,研究硫酸新霉素在吉富罗非鱼体内的药代动力学及消除规律.结果表明,血药浓度时间数据符合一级吸收二室开放模型,药物在血浆中达峰时间Tmax、血药浓度高峰Cmax和消除半衰期T1/2β分别为1.299 h、16.138 μg·mL-1 和25.776 4 h.药物消除速度由快到慢依次为:肌肉、肝脏、肾脏,消除半衰期T1/2β分别为31.802 h、34.917 h、45.175 h.选取吉富罗非鱼可食性肌肉组织作为残留检测靶组织,参考中华人民共和国第235号公告中对禽肌肉MRL规定,以0.5 mg·kg-1为残留限量,建议休药期不低于6 d. 相似文献
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罗非鱼血液和肌肉中土霉素萃取方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过HPLC方法对土霉素对照品进样分析,绘制了土霉素的标准曲线,线性方程为y=35500x+238,检测限为0.0025μLg/mL,定量限为0.005μg/mL,在0.005-10.000μg/mL之间线性关系良好,相关系数R=1.0000。使用乙酸乙酯和不同体积高氯酸萃取,发现:使用乙酸乙酯萃取效率略低于5%高氯酸,但因为沸点低易于浓缩的优势。在满足试验要求的前提下可以考虑使用乙酸乙酯萃取:对于血液和肌肉中土霉素的萃取,考虑时间和试剂消耗,10mL的5%高氯酸1次萃取即可满足一般检测需求。 相似文献
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siRNA抑制口蹄疫病毒在BHK-21细胞中复制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选取口蹄疫病毒(FMDV)的VP1、IRES、2B、3D和L基因保守序列,设计、合成siRNA,并成功构建表达siRNA的穿梭载体,通过脂质体2000在BHK-21细胞上转染6个重组siRNA表达质粒,观察其对FMDV S72毒株复制的抑制效果.结果发现:病毒对照和空载体对照细胞死亡脱落,脂质体2000对照和细胞对照细胞状态良好; 6个siRNA转染孔细胞状态明显优于病毒对照孔,表明6个重组质粒转染后均可以显著抑制FMDV S72毒株的复制,其中靶向IRES1基因的siRNA对FMDV的复制抑制最为明显. 相似文献
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王伟利 《农业图书情报学刊》2012,(2):74-77
在社会分工日趋精细和专业的时代,图书馆管理理念、发展目标和服务手段均发生了很大的变化,通过案例研究,论述了在实施"一站式"开放管理模式下高校图书馆进行的物业外包实践,探索如何提升外包管理水平的机制问题,预测了未来图书馆物业外包管理的发展趋势,以期能为我国高校图书馆的物业外包管理提供相应的借鉴之处。 相似文献