PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建

[目的]克隆PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因并构建其原核表达载体。[方法]根据PRRSV美洲株ATCC-VR2332的ORF5基因序列设计特异性引物,用RT-PCR方法从Hn-1/06株中扩增得到GP5蛋白基因的片段,与PTG19-T载体连接获得其阳性克隆PTG19-T-ORF5。以该基因片段为模板分别设计ORF5完整序列和删除信号肽的ORF5序列两条引物,进行PCR扩增,将目的片段与原核表达载体pET32a连接,并对其进行酶切鉴定。[结果]扩增得到GP5蛋白基因全长序列603 bp,编码200个氨基酸残基;具有3个潜在的N-糖基化位点和9个半胱氨酸;分子量为22.4 kD,等电点为8.550;双酶切pET32a-ORF5鉴定,结果与预期一致,证实重组质粒构建成功。[结论]成功构建了PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因的表达载体,为深入研究GP5蛋白的本质与功能及其致病性奠定基础。     

猪气喘病的治疗与预防

在生猪的养殖过程中,猪气喘病病发的频率越来越高,给养殖户造成了一定的经济影响.在呼吸道疾病中,猪气喘病属于进行长期治疗的一种疾病.在短时间内,很难完全恢复健康,所以,如何快速并且彻底治愈猪气喘病是需要解决的问题之一.本文就猪气喘病的治疗以及相应的预防措施进行了详细的论述,希望给同行带来一定的借鉴作用.     

牛羊产道疾病治疗中甲硝唑的应用

目的:探讨甲硝唑在牛羊产道疾病治疗中的应用效果.方法:此选取2015年02月～2016年07月我市某农服中心治疗的56例患有产道疾病的牛羊,将其随机分为对照组和观察组各28例,对照组采用中药和消炎针剂治疗,观察组患畜在对照组治疗基础上采用甲硝唑治疗,观察两组治疗效果.结果:观察组控制产道疾病总有效率为96.43％,对照组控制产道疾病总有效率为71.43％;且观察组患畜发生产道疾病复发率3.57％低于对照组的32.14％,两组比较存在统计学差异(P<0.05).结论:在治疗牛羊产道疾病中,选择甲硝唑治疗方法效果显著,安全性高,而且价格低廉,值得推荐.     

"夏抗40"萝卜高产栽培技术

“夏抗40”萝卜是武汉市蔬菜所利用抗热材料育成的杂交一代白皮萝卜，我市引进试种后表明抗热性好、生长期短、品质佳等优点，适合平原、山区进行反季节栽培。     

猪源肠球菌两种致病基因和表型的检测

摘要：目的：调查53株猪源肠球菌2种致病基因和2种表型的分布。方法：应用聚合酶链反应检测53株肠球菌的2种致病基因,用50mL/L兔血平板和30g/L明胶平板检测β溶血和明胶溶解表型。结果：粪肠球菌、屎肠球菌和鸟肠球菌2种致病基因的检出率分别为cylA 94.4%、96.9%、100%; gelE 100%、87.8%、50%;β溶血检出率分别为72.2%、42.4%、0;明胶溶解检出率分别为100%、0、0。结论：细胞溶解素激活基因(cylA)明胶酶基因(gelE)为猪源肠球菌的主要致病基因;粪肠球菌2种致病基因和2种表型的检出率高于屎肠球菌;来源于新鲜猪肉中的粪肠球菌存在较强的毒力,提示注意食品卫生安全;在新鲜猪肉中检测到2株鸟肠球菌,基因型和表型检测说明其存在较弱毒力。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株GP4蛋白免疫活性研究

克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株的ORF4基因,将疏水序列缺失后,再克隆到原核表达载体pET-32a中,得到阳性重组质粒,经IPTG诱导,纯化后由Western blotting分析,并将所得的包涵体、变性蛋白和复性蛋白分别免疫小鼠,获取的血清抗体进行效价和中和活性的检测。为深入研究GP4蛋白的免疫特征奠定了基础。     

我国狂犬病诊断中直接快速免疫组化法的初步应用研究

目的：探讨我国在实施狂犬病诊断过程中,应用直接快速免疫组化法（DRIT）获得的诊断效果。方法：选取我国2012年12月～2014年12月收集的家犬以及患者脑组织标本共144份。针对所有标本分别选择DRIT法、DFA法（直接荧光抗体法）以及RT-PCR法（反转录-聚合酶链式反应）进行监测。对三种方法的最终检查结果进行比较,对DRIT法进行检测的敏感性以及特异性进行评价。结果：针对所有标本,选择三种方法完成检测后,最终的检测结果基本一致,DRIT法同DFA法以及RT-PCR方法进行比较,表现出相同的敏感性以及特异性。此外研究成本较低,针对技术要求较低,针对经费有限以及技术力量较弱的实验室更合适此种方法。结论：我国在进行狂犬病诊断的过程中,选择DRIT法能表现出显著的应用价值,于基层狂犬病实验室监测工作中获得广泛应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪后病毒与抗体消长规律

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种新的传染性疾病.猪繁殖与呼吸综合征病毒具有抗体依赖性增强作用(ADE),低滴度的特异性母源抗体或由免疫接种产生的低滴度的特异性抗体不但起不到免疫保护作用,还会使猪繁殖与呼吸综合征病毒更易进入血液中的单核细胞或肺泡中的巨噬细胞,促进猪繁殖与呼吸综合征病毒的复制,导致长期的持续性感染,加重病情.