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11.
利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在体外成熟培养44~48 h后,对核成熟卵母细胞进行激活.试验1为不同化学激活方法10% 乙醇 10 mg/L 放线菌酮组、2.5 mmol/L 氯化锶 10 mg/L放线菌酮组、5 μmol/L离子霉素 2.5 mmol/L 6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)组、200 μmol/L 硫柳汞 8 mmol/L二硫苏糖醇组和对照组(不用任何激活剂).试验2为用不同电场强度和脉冲时程进行电激活之后放入胚胎培养液中进行体外培养7 d.结果显示,(1)4种不同化学激活方法处理卵子的1原核形成率、2原核形成率和原核形成率都显著比对照组高(P<0.05),其中离子霉素 6-DMAP组的2原核形成率和总原核形成率最高,分别为(23.1±3.5)%和(65.2±3.5)%,显著高于其他处理组(P<0.05);(2)4种不同化学激活方法处理组的囊胚率都比对照组高(P<0.01),其中离子霉素 6-DMAP组的卵裂率及囊胚率最高,分别为(46.6±18.5)% 和(5.6±4.2)%;(3)本试验所用的4种不同化学激活方法对猪4-细胞孤雌胚SDS-PAGE电泳的蛋白质表达图谱没有显著影响;(4)电场强度为1.7 kV/cm、脉冲时程为50、70 μs时猪体外成熟卵母细胞激活效果最好,卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数分别为(77.4±9.7)%、(12.4±3.7)%、(17.6±5.9)%和(75.1±10.6)%、(12.3±2.6)%、(19.1±8.1).以上结果说明本试验所用的4种化学激活方法均能有效激活猪体外成熟卵母细胞,其中离子霉素 6-DMAP的激活效果最理想;在本实验室条件下,采用1.7 kV/cm的电场强度、50~70 μs的脉冲时程均能有效地激活猪体外成熟卵母细胞;本试验所用的4种不同化学激活方法对猪4-细胞孤雌胚SDS-PAGE电泳的蛋白质表达图谱没有显著影响. 相似文献
12.
13.
14.
15.
利用微量液体组织块贴壁法原代培养分离新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,进行常规传代培养、冷冻和复苏;通过接触抑制和解除抑制研究该类细胞的增殖潜力,免疫荧光进行鉴定;并通过脂质体介导对分离到的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞分别进行EGFP-N1和DsRed-N1基因转染。结果成功分离到新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,体外可以大量传代和冷冻,目前已经传至50代以上,生长良好;冷冻复苏和接触抑制解除后仍可以正常培养和传代;细胞免疫荧光检测,波形蛋白表达阳性,角形蛋白表达阴性;转染48h后荧光显微镜下可以观察到绿色荧光和红色荧光,表明瞬时转染新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞可以获得成功,其中转染DsRed-N1基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞已经传至60代以上。结果表明,本试验成功建立了新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞的体外培养体系,在体外能稳定培养和传代,并可以成功获得转基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞。 相似文献
16.
本研究按国际通用的方法用0.25%胰蛋白酶溶液清洗牛体外受精胚胎,然后冷冻或在室温下短期保存胚胎,检查胚胎在体外和体内的发育率,结果表明胰蛋白酶处理的胚胎与未处理胎的发育相似,说明这样的处理对胚胎活力无不良影响。 相似文献
17.
18.
19.
康发亮 《青海畜牧兽医杂志》2011,41(2):55-56
奶牛产后身体虚弱,加之泌乳活动加强,营养代谢处于负平衡,抵抗力减弱,所以容易发生胎衣不下、子宫复旧不全、子宫脱出等疾病。据报到,奶牛产后胎衣不下的发病率100%~25%,有的高达30%,其中引发子宫脱出的占4%~10%,占不孕奶牛的60%~95%。子宫脱出中兽医统称为垂脱症,近年来在兽医临床中 相似文献
20.
1 发病起因 该场于 1 998年 9月引进大约克、杜洛克、长白公母猪共计 81头 ,于 1 999年 2月初 ,发生三胎流产 ,胎龄分别为 6 2天、84天、57天 ,并有部分公母猪出现呕吐、体温上升现象。在 4月底 ,由于饲料霉变引起公母猪严重下痢 ,随后几天 ,带奶仔猪也开始严重腹泻 ,到 5月底 ,所产 43胎 3 6 9头仔猪中 ,共有死胎 9头 ,有 2 3胎发病 ,带奶仔猪死亡 1 56头 ,断奶猪死亡 1 7头。初疑是黄白痢 ,后疑是传染性胃肠炎 ,一直口服补液盐、庆大霉素及注射氯霉素 ,但均无效果。2 临床症状 种公猪表现性机能减退 ,食欲差 ,对外界抵抗力降低。母猪… 相似文献