我国部分省份猪流行性腹泻的流行病学监测

[目的]为摸清我国猪群流行性腹泻的感染状况,[方法]从2011年底到2014年3月,对云南、广西等29个省份开展了猪群腹泻疫情流行病学调查,采集、收集了发生腹泻症状的发病猪群样品（新鲜粪便、肠道组织等）,进行了猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）等多种病原检测。[结果]在7021个调查猪场中,出现腹泻的阳性猪场4060个（57.83%）。在收集的1383份腹泻样品中,利用RT-PCR方法检测到PEDV阳性样本686份（49.58%）,其中腹泻发病猪样品中PEDV的检出率为67.82%,675份组织样品共检测出PEDV阳性样本86份（12.75%）。[结论]这表明我国猪场PEDV的感染十分普遍。对S基因进行分子流行病学分析发现,我国PEDV流行毒株与已有PEDV毒株可以分为2个完全不同的进化分支G1和G2,G1以CV777和DR13等疫苗株和早期毒株为主,G2则以2011-2013年流行毒株为主,流行毒株之间的同源性为97.8%-100%,与疫苗株CV777之间的同源性为94.3%-94.5%。     

一起猪蓝耳病与伪狂犬病混合感染的紧急流行病学调查

2017年11月4日起,山东省某猪场部分育肥猪出现咳嗽、气喘、发烧等症状,发病6~7 d后死亡。随后,个别母猪发生流产,哺乳仔猪、保育猪接连出现呼吸道症状并死亡。为探寻可能的发病原因,以便及时提出并采取行之有效的防控措施,开展了紧急流行病学调查。通过现场调查、临床诊断与实验室检测,确定本次疫情系猪蓝耳病病毒与伪狂犬病病毒混合感染所致。调查发现:邻场发病、人员传播、寒冷应激、断奶应激均可能是诱发此次疫情的原因。针对此次疫情,提出全群紧急免疫伪狂犬病疫苗,并配合使用长效土霉素与抗生素进行治疗等建议。养殖户采纳了建议并采取了相应措施,最终疫情得到有效控制。     

PRV SD株gE基因主要抗原区域原核表达及间接ELISA方法的建立

参考猪伪狂犬病病毒(PRV)SD株g E基因序列,设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含g E主要抗原表位编码区的618 bp片段,将其用Bam HⅠ和Xho L I双酶切后,插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达、SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和纯化;利用表达的PRV SD g E蛋白进行g E-ELISA鉴别检测方法研究。结果发现:gE重组蛋白得到了高效表达,融合蛋白的分子量约为42ku;表达产物存在于上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,并且能被PRV抗体所识别。将纯化后的g E蛋白作为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪Ig G为二抗,建立检测PRV抗体的间接ELISA方法。结果显示:确定的抗原最佳包被浓度为36μg/m L,最佳包被时间为37℃、1 h并4℃过夜,待检血清(1:50稀释)37℃作用1 h,二抗(1:3 000)37℃作用1 h。重复性试验、交叉试验证明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高。用g E-ELISA和IDEXX g E-ELISA同时对采集的92份猪血清进行平行检测,发现该方法的特异性为85.71%,敏感性为90.63%,二者符合率为89.13%。该方法为我国猪伪狂犬病的鉴别监测提供了一种可供选择的技术手段。     

湖南省部分猪场猪圆环病毒2型的感染和流行

本文选择湖南省部分养殖场进行猪圆环病毒2型(PCV2)的调查和监测,结果发现PCV2总阳性率为50%,专业户的阳性率为36.8%,感染猪主要是仔猪和育肥猪。对其中3株PCV2湖南株进行核苷酸同源性进化分析发现,表明湖南株之间的同源性为98.5%-99.5%,与国内其他PCV2毒株之间的同源性为91.3%-92.3%,与国外PCV2毒株的同源性为85.7-89.5%。表明我国PCV2与国外其他国家同源较性较低,已经形成自己的优势流行毒株。     

猪生殖与呼吸综合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

用RT—PCR方法从河南分离的1株（HN6）猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核酸中扩增缺失N端疏水序列的基因片段dORF5（deleting ORF5），并将其克隆到pMD18-T载体中测序，再亚克隆到原核表达载体pET-32a上。重组质粒转化大肠杆菌BL21，用不同浓度IPTG分别于37℃诱导，经SDS—PAGE分析，所表达的融合蛋白的分子质量约31．4ku，薄层扫描分析显示，表达量占菌体总蛋白含量的28．8％。Western—blotting结果表明，重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。证实，该蛋白可用于PRRSV的诊断。     

猪圆环病毒2型HN0712株ORF2基因的原核表达

根据已测猪圆环病毒2型湖南分离株（HN0712）全基因序列,设计一对克隆和表达HN0712株ORF2全基因（709bp）的引物,利用原核表达载体pET-32a（＋）获得重组pET—ORF2质粒。经IPTG诱导后成功地在BL21宿主菌中表达分子质量约为48．2ku的融合蛋白。Western blot分析表明,该融合蛋白具有较好的反应原性。     

某发病猪场链球菌的分离鉴定及药敏试验

猪链球菌是一种能感染人和动物的常见病原菌。本实验从山东省某猪场病死猪中分离出两株细菌;通过培养特性观察,革兰染色镜检,特异性基因扩增等一系列分析,确定其为链球菌;进一步进行PCR分型检测,确定其中一株属马链球菌兽疫亚种,另一株为猪链球菌7型。通过药敏试验发现,这两株菌对约95%的常用药物表现出耐药性,仅对链霉素、氯霉素、万古霉素和呋喃妥因较为敏感。     

现代科技在我国主要动物疫病防控工作中的应用

目的分析现代科技对动物疫病防控工作的作用。方法综述了现代高新科技在生物技术与信息技术等多方面的进展,及其在主要动物疫病防控领域的最新应用。探讨了加强重大动物疫病防控的可能途径,以促进畜牧业经济快速、稳定、健康发展。结论随着现代科技的日新月异,将近一步促进我国动物疫病防疫工作的发展。     

用RT—PCR技术检测蓝舌病病毒的研究

蓝舌病病毒非结构蛋白NS_1基因在各型中具有高同源性,可作为群特异性检测的依据。采用NS_1基因中210bp的区段作为PCR扩增模板,经逆转录酶合成第一股cDNA后,再进行PCR扩增。结果对BTV可扩增出特异片段,而鹿流行性出血病病毒和茨城病病毒则不出现扩增。     

非洲猪瘟的流行特征和传播路线

2018年8月3日辽宁省沈阳市某猪场首次暴发非洲猪瘟疫情。为了解全球非洲猪瘟流行形势,正确认识非洲猪瘟的病原学和流行病学特征,防止非洲猪瘟在我国进一步扩散和传播,本文简明阐述了非洲猪瘟特有的病原学特征、主要感染源、传播途径以及监测技术要点,分析了需特别关注的4种传染源,供相关人员参考,以便及早根除国内的非洲猪瘟疫情,保障我国养猪业健康发展。