一株产蛋白酶菌株的筛选鉴定及酶学性质分析

通过测量比较在牛奶平板上产生水解圈的大小,从韶关土壤中分离筛选获得一株产蛋白酶的ms2菌株。对该菌株的形态结构、生理生化特性以及16S rDNA序列的比对分析,鉴定该菌株为粘质沙雷菌(Serratia marcescens)。对该菌株进行液体发酵,其发酵液中的蛋白酶最适反应p H值为10.0,表明发酵液中含有碱性蛋白酶;最适反应温度45℃,45℃保温处理100 min后,酶活性仍保留70%以上,表明蛋白酶具有较强的热稳定性。1 mmol/L的Mn2+对酶有激活作用,但1 mmol/L的Cu2+和Fe2+对酶具有明显的抑制作用;EDTA对蛋白酶也具有明显的抑制作用,说明发酵液中含有金属蛋白酶。与Alcalase碱性蛋白酶相比,发酵液中的蛋白酶对大豆分离蛋白水解能力更强。在单因素试验中,干酪素和蔗糖分别为氮源和碳源时,发酵液蛋白酶的活性最高。     

不同栽培辅料诱导对3个香菇菌株液体发酵产漆酶活力的影响

以南方香菇产业主栽品种香菇808、庆科R20以及贵州省特有香菇马桑香菇为研究对象,通过拮抗反应、系统发育树及温度试验,对香菇菌株进行了区别性鉴定,并利用碱性木质素(纯品)及4种食用菌栽培中常用的栽培辅料为诱导物,研究3种不同香菇菌株液体发酵产漆酶活力连续12 d的变化规律.研究结果表明,马桑香菇、香菇808、庆科R20虽均同为有机香菇的下属分支,但菌株间是有区别的,马桑香菇同香菇808和庆科R20间的亲缘性也较远,且两两间均有拮抗反应,3种菌株菌丝生长对适宜温度的选择也有较小差异,存在一定种源差异.此外,香菇液体产漆酶活力受菌株遗传差异和5种不同诱导培养基的影响差异均为极显著(P<0.001),但各处理漆酶整体变化规律均呈现先升后降的趋势.对香菇808产漆酶诱导力最强的是玉米芯,其次为麦麸,最高漆酶活力分别为464.06、205.44 U/L;对庆科R20产漆酶诱导力最强的是麦麸,其次为玉米芯,最高漆酶活力分别为265.07、237.15 U/L;对马桑香菇产漆酶诱导力最强的是米糠,其次为麦麸,最高漆酶活力分别为178.34、161.83 U/L.从诱导漆酶活力强度出发,香菇808、庆科R20和马桑香菇培养的最佳辅料分别为玉米芯、麦麸和米糠.     

镉胁迫下黑曲霉TL-F2的促生特征及其对黑麦草种子萌发、幼苗生长和镉含量的影响

以黑曲霉(Aspergillus niger)TL-F2为供试菌株,黑麦草为供试植物,研究Cd胁迫下A. niger TL-F2的促生特性,以及对黑麦草种子萌发、幼苗生长和Cd含量的影响。结果表明:与不加Cd的对照组相比,低浓度Cd(5 mg·L^-1)胁迫下,A. niger TL-F2产吲哚乙酸(IAA)和溶磷的能力无显著变化,但产铁载体的能力显著(P<0.05)降低48.18%;中(20 mg·L^-1)、高(50 mg·L^-1)浓度Cd胁迫下,A. niger TL-F2产IAA的能力分别显著(P<0.05)降低55.76%和65.69%,溶磷量分别显著(P<0.05)降低50.07%和78.19%,产铁载体的能力分别显著(P<0.05)降低69.71%和80.08%。接种高浓度(1×10⁸ mL^-1)A. niger TL-F2有助于促进Cd胁迫下黑麦草种子的萌发和生长,高浓度Cd胁迫下,黑麦草地上部Cd含量较不接菌的显著(P<0.05)增加,增幅为17.95%;接种低浓度(1×10⁶ mL^-1)A. niger TL-F2对黑麦草种子萌发、Cd含量无明显促进作用。综合来看,接种适当量的A. niger TL-F2有助于促进Cd胁迫下黑麦草种子的萌发和生长,增加黑麦草地上部Cd含量,可作为黑麦草修复Cd污染水体和土壤的强化措施。     

北京百花山植物种间相关性和植被数量分类

本文选用中点象限法(Point-centred Quarter Method)搜集到55块有效样地资料,用各样地种的重要值计算定量种联结指数,编绘半数阵、数阵、半矩阵图和矩阵图,精确地表明21种乔木之间,10种乔木与20种灌木之间及10种乔木与40种草本植物之间相关性.同时,依据《中国植被》确立的分类原则、单位和系统,用聚类分析方法,将百花山植被分成11个群系,并结合种联结指数,对11个群系特征进行了描述.     

硒对草鱼生长、营养组成和消化酶活性的影响

选用体长（10．16±0．14）cm,体重（21．20±0．24）g的草鱼种630尾,随机分为7个试验组,每组设置3个重复,每个重复30尾草鱼。在纯化饲料中添加0、0．15、0．3、0．6、1．2、2．4、4．8mg,／kg的硒,以0mg,／kg添加组为对照组,进行为期84d的生长试验以研究饲料不同硒水平对草鱼生长、营养组成和消化酶活性的影响。结果表明：饲料中添加硒能促进草鱼的生长,提高饲料效率,提高体蛋白含量,降低脂肪含量,提高草鱼消化酶活性。饲料硒对草鱼脂肪酶活性的影响最为显著（P〈0．05）。当硒添加量为0．6mg／kg时,草鱼的特定生长率、增重率、饲料效率、蛋白质效率和饲料蛋白沉积效率为最大值,与对照组相比,其特定生长率和饲料效率分别提高了28．37％和38．30％;草鱼鱼体蛋白含量最高,脂肪含量最低;草鱼的肝胰脏和肠道蛋白酶、淀粉酶以及脂肪酶活性均达最大值,其中肝胰脏和肠道脂肪酶活性分别比对照组提高了205．55％和249．33％。上述研究表明饲料中适量添加硒能提高消化酶活性,改善草鱼品质,促进生长。     

大豆DNA脱甲基化酶相关基因的克隆及连作胁迫应答

利用大豆基因组数据库Phytozome v12.1.6获得大豆DNA脱甲基化相关基因Glyma03g34860和Glyma10g07601的CDS序列,以大豆叶片RNA为模板,RT-PCR克隆获得Glyma03g34860基因大小为5 226 bp,Glyma10g07601基因大小为6 045 bp。利用STRING在线软件预测这两个转录本的互作蛋白质完全一致,主要互作蛋白8个,包括一个AP位点裂解酶和2个RNA聚合酶亚基;采用qRT-PCR分析他们对大豆连作综合逆境胁迫的响应。结果表明:连作综合逆境胁迫使Glyma03g34860和Glyma10g07601的表达均不同程度上调,其中,Glyma10g07601基因在大豆品种安达农家、黑大豆、绥农14和黑农40达显著水平(P0.05),分别增加1.37、1.22、1.98倍和1.67倍;Glyma03g34860基因在大豆品种垦丰16、绥农14达显著水平(P0.05),分别增加1.62倍和1.65倍,因此推测他们可能通过使基因组DNA脱甲基化而参与大豆连作综合逆境胁迫的响应。     

一种汽车蛇形试验操作规范性评价方法

汽车试验中,由于试验人员的操作随机性和主观性会对试验数据造成影响,基于这些试验数据计算出的试验评价参数亦会受到影响而发生数值变化。通过搭建人在环路的汽车性能虚拟试验与评价系统,设计车辆性能评价参数提取算法,提出过程评价与结果评价的综合评价策略与评价模型,对操稳试验中的蛇形试验进行操作规范性评价研究。结果表明:车辆性能评价参数提取算法可以准确提取试验的有效数据,并计算车辆性能得分;操作规范性评价策略与评价模型可以对学员的操作规范性进行有效评价计分。     

森林公园康养旅游发展策略探讨——以月岩国家森林公园为例

在解析森林康养概念的基础上，梳理森林康养旅游发展重点，选择月岩国家森林公园为实例，总结提出森林公园在优化森林康养环境、开发特色森林康养产品、构建森林康养文化体系、完善配套服务设施、提升康养服务水平等方面的策略应用，以期为同类型森林公园康养旅游发展提供借鉴。     

高原羊肚菌营养成分与栽培土壤养分相关性探讨

为探讨羊肚菌（Morchella esculenta）营养成分与栽培土壤养分的相关性，对自主选育品种羊肚菌QJ-2、QJ-3、QJ-6、QJ-8和QJ-9进行栽培，在其子实体成熟期，每个品种选择6个样方，每个样方1m×1m，每个样方内采集4个子实体，并收集子实体基部周围土壤，测定不同品种的子实体营养成分和土壤养分含量，采用偏最小二乘回归（partial least square regression, PLS）分析子实体营养成分与土壤养分的相关性。结果表明：不同品种的子实体在营养成分方面，除氨基酸总量、维生素B2含量和粗多糖含量差异不显著外，其他指标均存在不同程度的差异；在土壤养分方面，除有机质含量和有效磷含量差异不显著外，其他指标也均存在不同程度的差异；子实体的氨基酸总量、维生素B2含量和粗多糖含量均与土壤的全磷含量、全钾含量、水溶性有机碳含量、有效磷含量和速效钾含量之间存在显著正相关，与全氮含量之间相关性不显著。本研究结果可为青藏高原羊肚菌的科学栽培和品质控制提供参考。     

一株异养硝化菌的筛选鉴定及其在农村养殖废水处理中的应用

【目的】针对养殖废水中的高浓度 NH4+-N 难处理的问题，从湖泊底泥中分离筛选出 1 株异养硝化细菌，并鉴定。【方法】对筛选菌株进行革兰氏染色、扫描电镜观察、菌株鉴定。16SrDNA 测序结果在 Blast 数据库进行同源性分析并构建系统发育树；研究不同氮源下，该菌株的异养硝化和好氧反硝化性能以及通过不同菌液接种量、碳源、初始 pH、温度、C/N、初始 NH4+-N 浓度为环境因素研究其脱氮特性；将该菌株投加到实际农村养猪废水中，评价其应用能力。【结果】筛选得到的菌株异养硝化菌株，鉴定为不动杆菌（Acinetobacter sp），命名为 L-1；单因素试验结果表明：菌株 L-1 在接种比例 2%、碳源为柠檬酸钠、pH 值 6~9、温度 20~30℃、C/N10~20、NH4+-N 初始浓度 50 mg/L 条件下异养硝化效果最好；在实际养猪废水中投加 L-1 进行脱氮，在96 h 时，其中 1 000 mg/L 的 NH4+-N 废水降至 298.46 mg/L，去除率达 70.15%，对比空白对照 NH4+-N 去除率提高 45.78%，其中 NO3--N 和 NO2--N 浓度均在下降。【结论】菌株 L-1 具有异养硝化和好氧反硝化能力，在异养硝化菌处理养猪废水研究方面具有一定的参考价值。