CRISPR/Cas9技术高效制备山羊SOCS2基因编辑胚胎

旨在设计、筛选高效编辑山羊胚胎生长负调控因子SOCS2基因的sgRNA,为通过SOCS2基因编辑创制快长型山羊奠定技术基础。本研究利用在线网站对山羊SOCS2基因SH2结构域保守序列设计2条sgRNA,构建表达载体,体外转录获得sgRNA及Cas9 mRNA;体外检测sgRNA+Cas9蛋白切割靶DNA的效率;在此基础上将屠宰场山羊卵巢分离培养的442个孤雌胚胎进行分组,2个试验组显微注射sgRNA和Cas9 mRNA混合物,对照组注射超纯水,以单个囊胚全基因组DNA扩增产物为模板,PCR扩增靶区域并测序鉴定,发生编辑的样本进行T-A克隆测序检测编辑形式;根据在线网站预测,每条sgRNA选择5个错配数最少的潜在脱靶位点进行脱靶检测。结果表明,在SOCS2基因83和96号氨基酸密码子附近区域获得2条sgRNA并成功构建表达载体,体外转录获得高质量sgRNA和Cas9 mRNA;两条sgRNA均可引导Cas9蛋白在体外完全切割靶DNA;SOCS2-sg-83对胚胎的编辑效率为94.1%,160个T-A克隆中有152个在靶位点出现插入、缺失或替换,概率为95.0%,其中81.3%发生了移码突...     

架起支援西部职校建设的连心桥——以江苏省江阴中等专业学校为例

对口支援是职业教育东西部协作行动计划之一。本文以江苏省江阴中等专业学校对 口支援广西南宁市武鸣区职业技术学校专业建设为例,介绍对口专业建设的思路、措施及成效。     

基于均生函数模型的高温预测

目前,常用的高温预测方法主要有灰度、指数等模型.文章采用均生函数模型预测各气象观测站未来一个月的最高气温.气候数据按照时间序列有不同时间尺度震荡的特征,传统时间序列预测模型的预测值往往趋于平均值,而均生函数模型有很好的预测结果.最后,采用ArcGIS系统将未来可能超过35℃的区域生成图像产品,供用户用Web方式查看实时的预报信息.     

贵州野生匍匐翦股颖抗旱耐热性评价

于2008年7月,以贵州省内采集的5份野生匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera L.),以及对照Putter为材料,研究其在干热胁迫过程中的形态变化,测定叶绿素总含量、叶绿素a含量、叶绿素b含量、游离脯氨酸含量和相对电导率5个生理指标,根据隶属(反隶属)函数法,采用这5个指标对野生匍匐翦股颖资源及对照Putter进行抗旱耐热性综合评价。结果表明:材料及对照抗旱耐热能力依次为:材料4>材料2>材料1>材料3>Putter>材料5。试验研究结果将为抗旱耐热型匍匐翦股颖新品种筛选提供理论依据。     

浅谈提高造林质量的几点措施

森林是国家的重要资源,它不仅为社会提供木材及其它原材料,同时又具有净化空气、吸收二氧化碳、制造氧气等功能,并在改造自热、保护环境、保护自然界生态平衡等方面起到极其重要的作用.随着国家对生态环境的重视,各地造林绿化任务逐年增加.然而,造林难以成林,究其主要原因,除没有做到适地适树和管护不良外,还有苗木质量差和栽植技术不当等因素.造林质量是造林绿化工程的生命线,事关绿化工程的成败,因此,如何提高造林质量就成为林业生产中首要解决的问题.     

"贵草1号"多花黑麦草饲喂肉兔效果研究

选择健康的新西兰肉兔24只,随机分成4组,每组6只。各组随意采食“贵草1号”多花黑麦草,配合饲料限制为40、50、60、70g／d。试验30d后表明：在第2组饲草料比例下饲喂的肉兔,能达到较高的经济效益。在养兔生产中,试验第2组的草和料搭配效果较好,具有推广价值。     

贵州匍匐翦股颖新品种选育

贵州匍匐翦股颖是利用贵州野生匍匐翦股颖资源作亲本,采用系统选育法,经品比、区域、生产、耐旱性试验及良种繁育研究育成。该品种抗逆性强、适应性广、坪用性好,在贵州全年青绿,耐热抗旱性能明显优于对照Cato。适宜贵州海拔300m以上地区推广种植,同时适宜于亚热带到暖温带及相似气候地区推广种植,是建植高质量园林观赏类草坪以及高尔夫球场草坪的首选草种。     

浅谈宁夏酿酒葡萄高产的栽培要点

文章主要针对宁夏地区的气候,浅析了酿酒葡萄从种植、休整、到病虫害的防治关键,实现酿酒葡萄达成优质果高产目的。     

葡萄AMT基因家族生物信息学分析

运用隐马尔柯夫模型,对葡萄的蛋白质数据库进行搜索,共找到12个AMT蛋白同源序列。利用生物信息学方法对葡萄12个AMT基因进行染色体定位,进而预测它们的氨基酸组成成分、理化性质以及二级结构,并分析葡萄与拟南芥、水稻和杨树AMT基因家族之间的联系。基因组定位结果发现12个AMT基因分布在6条染色体上,较拟南芥AMT基因在染色体上的分布更为集中。12个葡萄AMT蛋白序列可分成2个亚族,AMT1亚族有3个成员,其余为AMT2亚族成员。本研究发现不同成员间氨基酸数目、氨基酸序列间的疏水性存在一定的差异;二级结构预测结果显示,12个AMT氨基酸序列以α-螺旋和无规则卷曲为主要组成部分。基因结构分析表明,仅有2个葡萄AMT基因家族成员不含内含子,其余10个AMT基因含有1~4个内含子。对葡萄AMT蛋白的亚细胞定位分析表明：12个VvAMT均定位于膜结构上。对获得的12个葡萄AMT基因进行EST分析,只有5个有对应的EST序列,而仅有2个有相应的电子表达谱。     

丙烯和1-MCP处理对采后柿果实ACS和ACO基因表达的影响

 【目的】研究丙烯、1-甲基环丙烯（1-MCP）处理对采后柿果实中与乙烯合成相关的ACS、ACO基因特异表达的影响。【方法】以中国涩柿的优良品种‘富平尖柿’为试材,于初熟期采收后将果实分别用丙烯、1-MCP处理,在常温下贮藏,定期检测乙烯释放速率及分组织提取RNA进行Northern分析。【结果】丙烯处理促进ACS、ACO基因表达进而促进内源乙烯合成;1-MCP处理抑制ACS、ACO基因的表达从而抑制内源乙烯合成。不过,二者对ACS、ACO基因表达的作用效果在不同组织中差异较大：1-MCP处理对ACS、ACO基因表达的抑制作用在果皮中最明显,其次是果肉、果心部位,果蒂着生部位处最低;丙烯对ACS、ACO基因表达的促进作用表现为果肉、果心、果皮、果蒂着生部位递增。另外,ACS、ACO基因家族各成员在不同组织的表达也不同,DKACS3基因只在果蒂着生部位表达在其它组织中没有表达,DKACS2基因在丙烯处理果中的4个组织中均有表达。【结论】丙烯处理促进ACS、ACO基因表达,1-MCP处理抑制ACS、ACO基因的表达;ACS、ACO基因在不同组织中的表达差异较大;ACS、ACO基因家族各成员在不同组织中的表达也不同。