紫茎泽兰的生物学特点及其在畜牧生产中的应用

紫茎泽兰在我国分布范围广泛,是一种可利用的资源。目前有大量研究在探讨紫茎泽兰的生物学功能和提取其有效的活性成分,可以通过资源化利用提高紫茎泽兰的经济价值,变废为宝。论文综述了紫茎泽兰的生物学特点、生物学活性及其在动物抗寄生虫、抑制细菌、免疫调节和作为饲料原料的应用研究现状,为后期紫茎泽兰的研究提供参考。     

猴D型逆转录病毒P27基因的表达、纯化及重组蛋白的鉴定

根据GenBank上已发表的猴D型逆转录病毒SRV-2株基因组序列设计合成了一对特异性引物,通过PCR扩增出P27基因。将扩增出的片段克隆到原核表达载体pBAD/Thio-TOPO上,通过序列分析证实该片段与猴D型逆转录病毒SRV-2株P27基因序列一致。将阳性重组质粒转化至大肠杆菌T0P010中,用阿拉伯糖诱导表达,表达的融合蛋白进行SDS-PAGE和WesternBlot分析,并用proBondTM柱在天然状态下进行纯化。结果表明,表达的融合蛋白分子量约为50KDa,其大小与预期相符。     

PRRSV云南株的分离与鉴定

从云南某猪场采取病料经RT-PCR检测为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS)阳性,将其处理后接种到猪肺泡巨噬细胞(PAM)和Marc-145细胞上。接种后3 d,猪肺巨噬细胞开始出现细胞病变(CPE);Marc-145细胞盲传3代后,细胞也出现了CPE。对出现CPE的细胞培养物,用RT-PCR法、间接免疫荧光试验进行检测,结果均为PRRSV阳性;细胞培养物经PEG初步浓缩后,接种到PRRSV阴性,PRV、CSFV抗体阳性的仔猪,15 d后猪只出现体温升高并伴有食欲减退,精神不振等症状。采血并用同上的RT-PCR法检测,结果为阳性;采血用同上的RT-PCR法检测,结果亦为阳性;用电镜对纯化后的病毒进行观察,可见有囊膜包裹的圆形病毒粒子,其直径约为50 nm;间接免疫荧光实验可见黄色荧光;TCID50测定其毒价为10-4.75/0.1 mL。该病毒对氯仿、紫外线、酸碱度变化(pH5.0或pH7.5)和热敏感;结果表明,已成功分离获得一株PRRSV云南地方流行毒株,命名为YN-1。     

猪弓形虫病的血清学调查

为了解云南省西双版纳州猪感染弓形虫病的情况,本调查从云南省西双版纳州所属的3个县级市,即景洪市、勐海县、勐腊县共采集猪血样711份,包括农村散养猪血样680份,屠宰场猪血样31份。采用间接血凝试验（IHA）检测弓形虫抗体,被检血清抗体滴度大于或等于1∶64判为阳性。结果显示,有174份血清为弓形虫阳性,平均阳性率为24.47%。调查数据表明,西双版纳州猪弓形虫病感染率较高,需要进一步加强对该病的防控措施。     

洱源、怒江猫源弓形虫虫株的分离与鉴定

为了分离猫源弓形虫,本试验从云南洱源、怒江两地区捕捉18只野猫,取其心脏、肝脏、肺脏、脑组织用盐酸—胃蛋白酶溶液消化处理后,腹腔接种小白鼠,将分离到的弓形虫虫株至少传3代,用特异PCR方法对所分离的虫株进行鉴定。结果表明,从18只野猫的样品中分离出3株弓形虫虫株,用特异性引物对3株虫株进行PCR鉴定,均得到弓形虫的特异性目的条带,测序结果表明所扩增出的DNA片段确为弓形虫核糖体B1基因部分序列。同源性比对分析结果显示分离株与T.gondii B1的同源性为100.0%。将动物组织用盐酸—胃蛋白酶溶液消化处理后腹腔接种小白鼠是一种分离弓形虫虫株较理想的方法,对弓形虫B1基因进行特异性扩增,可以快速地鉴定弓形虫虫株。     

山羊口蹄疫、小反刍兽疫疫苗不同免疫剂量同步分点注射免疫效果比较

为探究一种适合基层同时开展山羊口蹄疫（FMD）和小反刍兽疫（PPR）疫苗免疫的方法和剂量,选取64只山羊随机分为4组,即常规免疫组（对照组）以及1.0、1.2和1.5头份剂量组（试验组）,开展FMD和PPR疫苗常规免疫和不同免疫剂量同步分点注射免疫的效果比较。结果显示：使用上述两种疫苗,采用常规免疫和一次性分点同步注射免疫的方法,以不同免疫剂量同步分点注射接种后,被免疫山羊未出现免疫应激反应;以不同免疫剂量接种后14、28、42、56、70、100和160 d,各组山羊FMD O型、A型以及PPR免疫抗体阳性率差异均无统计学意义（P> 0.05）。在接种后14 d,1.2头份剂量组FMD O型免疫抗体阳性率高于1.0和1.5头份剂量组;在接种后100 d,1.5头份剂量组FMD O型免疫抗体阳性率高于其余两剂量组;接种后14 d,对照组山羊FMD A型免疫抗体阳性率为87.5%,其余各组均可达到100%,并维持至接种后100 d。各组山羊PPR抗体阳性率均在接种后14 d达到100%,并持续保持至接种后160 d。结果表明：在试验免疫剂量范围内可开展山羊FMD和PPR疫苗一次性分...     

非洲马瘟病毒VP7基因的克隆与表达

为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白,以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础,笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白。在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列,人工合成VP7基因,将VP7基因片段克隆插入pBAD/Thio-TOPO表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌TOP10。经测序鉴定,筛选获得VP7基因正向插入、有正确读码框的阳性克隆,经L-Arabinose诱导表达VP7融合蛋白抗原。SDS-PAGE分析表明以终浓度为0.2%的L-阿拉伯糖进行诱导,4h后表达可达到高峰,融合蛋白质量约54.72 kDa。Western blotting检测和间接ELISA表明诱导表达的融合蛋白能与非洲马瘟病毒VP7单克隆抗体发生特异性反应,说明蛋白有特异的免疫学活性。     

线粒体与细胞凋亡

细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自杀性死亡过程,是机体维持自身稳定的一种基本生理机制。机体通过细胞凋亡清除损伤、衰老与突变的细胞,维持生理平衡。通过对细胞凋亡的研究发现,线粒体在调节细胞凋亡中发挥着关键作用。尤其是被称为细胞凋亡主开关的线粒体通透性改变孔(MitochondrionPermeabilitytransitionPore,MPTP),它是细胞色素C、Smac、AIF等凋亡诱导因子的主要来源。本文以MPTP的开放、细胞色素C、AIF在细胞凋亡中的作用以及Bcl-2家族对细胞凋亡的调控做一综述,以便广大读者能系统地了解线粒体在细胞凋亡中的作用。     

组织病理技术研究进展

病理技术是病理诊断的基础,也是病理研究中的方法学,在生物医疗活动中占有重要作用.组织病理技术作为基础医学和临床医学的桥梁,在多个领域得到了广泛的应用,并在各项研究中不断进行着新的探索,发展和形成了免疫组织化学、原位核酸分子杂交、激光共聚扫描显微等多种现代病理技术,具有较好的应用价值和广阔的应用前景.论文就近年来组织病理...     

昆明滇池红嘴鸥源沙门氏菌的分离鉴定、耐药性及致病性分析

为了解昆明滇池红嘴鸥(Larus ridibundus)携带的沙门氏菌(Salmonellaspp.)的耐药性、毒力特征及致病性等情况,2019年11月,从昆明滇池随机选择100只越冬红嘴鸥,对其泄殖腔内容物进行细菌分离培养、生化鉴定、染色镜检、分子生物学鉴定、多位点序列分型和血清学鉴定;采用药敏纸片琼脂法对5大类14种抗菌药物进行耐药检测,使用PCR扩增检测耐药基因,分析耐药情况;通过毒力基因检测及动物致病性试验对所分离的细菌进行致病性分析。结果显示：确定其为ST19型鼠伤寒沙门氏菌(SalmonellaTyphimurium),抗原结构式为O抗原1, 4,[5], 12; H抗原i, 1, 2,主要对阿莫西林、环丙沙星、四环素和多西环素耐药,且检出四环素类耐药基因tetB,喹诺酮类耐药基因gyrA、gyrB、parC和psrE。该分离菌检测出mogA、sseL、mgtC、bcfA、araB、spvC、spvB、stn、fimA、orgA、sopB、sipB和spaN13种毒力基因。动物试验结果表明,该分离菌株对试验小鼠有一定致病性,接种浓度为5×10⁶、 5×...